白灰樹花菌絲體最適營養(yǎng)生長條件的研究

周永斌，張志軍，劉連強(qiáng)，訾惠君，李鳳美

（天津市林業(yè)果樹研究所，天津 300112）

灰樹花 （Grifola frondosa）又名栗子蘑、舞茸。屬擔(dān)子菌亞門、層菌綱、非褶菌目、多孔菌科、樹花菌屬。子實(shí)體形同盛開的蓮花，柄短呈珊瑚狀分枝，菌蓋扇形，重疊成叢；菇體因品系差異呈白色、灰色、褐色等，孢子無色、光滑，卵圓形至橢圓形。在自然界，夏秋季多發(fā)生于板栗、青岡等闊葉樹的樹干周圍，土質(zhì)多為含有腐葉的沙質(zhì)土?；覙浠ㄊ鞘终滟F的食 （藥）用菌，它不僅香氣濃郁，肉質(zhì)柔嫩，口感鮮美，而且還具有極高的醫(yī)療保健功能，近年來以日本為主的許多國家對灰樹花藥理作用的研究表明，灰樹花具有抗癌和免疫增強(qiáng)作用，并具有抗高血壓，降低血糖、血脂和抗各類肝炎病毒的作用[1]。

白灰樹花是灰樹花的一種，從原基形成到子實(shí)體成熟均潔白如玉，商品價(jià)值略高于其它品種。盡管我國從80年代就開始了灰樹花的人工栽培研究，但對白灰樹花的人工栽培直到2004年才開始進(jìn)行，且規(guī)模較小，遠(yuǎn)不能滿足市場需求，并且國內(nèi)關(guān)于白灰樹花菌生物學(xué)特性研究的報(bào)道很少[2]。本研究通過對白灰樹花菌絲生長進(jìn)行不同碳源、氮源的單因子試驗(yàn)及最適生長溫度試驗(yàn)，旨在探究其最適的菌絲營養(yǎng)生長條件，掌握其生物學(xué)特性，為進(jìn)一步本地化示范推廣奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌種

白灰樹花引自日本鹿島農(nóng)產(chǎn)合作會社。

1.1.2 培養(yǎng)基

培養(yǎng)基1：蛋白胨0.2%、KH2PO40.15%、MgSO40.075%、VB12片 （每片10 mg）、瓊脂2%，蒸餾水1000 mL，pH值自然。

培養(yǎng)基2： 葡萄糖2%、KH2PO40.15%、MgSO40.075%、VB12片 （每片10 mg）、瓊脂2%，蒸餾水1000 mL，pH值自然。

馬鈴薯綜合培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、蛋白胨 2 g、 KH2PO41.5 g、 MgSO4·7H2O 0.75g、 VB120 mg、瓊脂20 g，水1000 mL，pH值自然。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 碳源利用試驗(yàn)

在培養(yǎng)基1中分別添加2%的蔗糖、葡萄糖、可溶性淀粉、玉米粉、紅糖、果糖。將培養(yǎng)基裝入試管 （20 mm×200 mm）， 制成斜面， 并滅菌 （121℃，30 min）、 接種，每個(gè)處理重復(fù)5次，于25℃條件下培養(yǎng)一定時(shí)間，以菌絲體在斜面上的直線生長距離及長勢的強(qiáng)弱作為生長量指標(biāo)，記錄菌絲生長速度、菌絲長勢和平均滿管天數(shù)。

1.2.2 氮源利用試驗(yàn)

在培養(yǎng)基2中分別添加 0.2%的 （NH4）2SO4、NH4NO3、蛋白胨、酵母膏、麥麩、黃豆粉。制作、培養(yǎng)及檢測指標(biāo)同1.2.1。

1.2.3 溫度影響試驗(yàn)

將馬鈴薯綜合培養(yǎng)基裝入20 mm×200 mm的試管內(nèi)，制成斜面，高壓滅菌 （121℃，30 min）后接菌種，于不同溫度條件下黑暗培養(yǎng)一定時(shí)間，每個(gè)處理重復(fù)5次，以菌絲體在斜面上的直線生長距離及長勢的強(qiáng)弱作為生長量指標(biāo)。

2 結(jié)果與分析

2.1 白灰樹花菌對碳源營養(yǎng)的利用

試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)白灰樹花菌接種到各種培養(yǎng)基上，要經(jīng)5 d～6 d后才開始萌發(fā)，而且在這5 d～6 d期間用肉眼無法看出試管斜面的變化，滿管時(shí)間相比其他食用菌要長，需15 d～20 d。對碳源營養(yǎng)的利用結(jié)果見表1。

表1 不同碳源對白灰樹花菌絲生長的影響

從表1可以看出，白灰樹花對果糖的利用最差，在以果糖為碳源的培養(yǎng)基上菌絲基本不萌發(fā)。白灰樹花菌絲生長速度和長勢，在其他5種不同碳源培養(yǎng)基上表現(xiàn)差異明顯。其中菌絲生長速度在以葡萄糖為碳源時(shí)最快，達(dá)0.55 cm·d-1，其次是可溶性淀粉、紅糖；再次是玉米粉和蔗糖。以葡萄糖、可溶性淀粉為碳源時(shí)，菌絲長勢相近，菌絲生長濃白、細(xì)密、健壯。同時(shí)發(fā)現(xiàn)白灰樹花在以紅糖為碳源的培養(yǎng)基上菌絲長勢要明顯好于以蔗糖為碳源的培養(yǎng)基，可能是紅糖中含有部分可刺激菌絲生長的物質(zhì)。在玉米粉培養(yǎng)基上菌絲淺白，生長較弱。

2.2 白灰樹花菌對氮源營養(yǎng)的利用

比較了6種氮源對白灰樹花菌絲生長的影響，結(jié)果見表2。

表2 不同氮源對白灰樹花菌絲生長的影響

從表2可以看出，有機(jī)氮比無機(jī)氮更適合白灰樹花菌絲的生長，菌絲體萌發(fā)時(shí)間、滿管時(shí)間和不同碳源培養(yǎng)基上培養(yǎng)的情況一致。2種無機(jī)氮 （NH4）2SO4和NH4NO3為氮源的培養(yǎng)基上，白灰樹花菌絲基本不萌發(fā)。菌絲生長的最適氮源是蛋白胨，在以蛋白胨為氮源的培養(yǎng)基中菌絲生長濃白、細(xì)密、健壯，且日生長速度高達(dá)0.55 cm·d-1；其次是酵母膏，以麥麩和黃豆粉為氮源的培養(yǎng)基上，菌絲生長較稀疏，不理想。

2.3 白灰樹花菌絲體最適生長溫度的確定

溫度對白灰樹花菌絲生長的影響見表3。

表3 溫度對白灰樹花菌絲生長的影響

由表3可以看出，白灰樹花菌絲在5℃～30℃范圍內(nèi)均能生長，35℃時(shí)菌絲不再生長。適宜生長溫度為20℃～25℃，培養(yǎng)溫度為25℃時(shí)，菌絲生長最快。

3 小結(jié)與討論

通過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，白灰樹花菌絲體生長周期較長，且要經(jīng)4 d～6 d后才開始萌發(fā)。培養(yǎng)白灰樹花菌絲的最適碳源為葡萄糖，菌絲生長速度為0.55 cm·d-1，菌絲長勢在所試驗(yàn)的碳源中表現(xiàn)最強(qiáng)，這說明白灰樹花菌與其它大部分食用菌一樣都能很好的利用以葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基[3]。同時(shí)發(fā)現(xiàn)白灰樹花菌絲體在無機(jī)氮中的銨態(tài)氮和硝態(tài)氮培養(yǎng)基上不萌發(fā)，這可能與無機(jī)氮提供的氮源營養(yǎng)單一有關(guān)。有機(jī)氮更適合菌絲體的生長，最適氮源是蛋白胨，其次是酵母膏、黃豆粉，在以蛋白胨為氮源的培養(yǎng)基中菌絲生長旺盛、潔白、濃密。菌絲體適宜生長溫度在20℃～25℃，培養(yǎng)溫度為25℃時(shí)，生長最快。

[1]蘭進(jìn).食藥用菌栽培技術(shù)圖解[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2004.

[2]鮑正光.白色灰樹花栽培技術(shù)[J].食用菌，2006(10)：48.

[3]楊國良.蘑菇生產(chǎn)全書[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2004.