• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    經(jīng)皮球囊封堵冠狀動(dòng)脈法制備小型豬心肌梗死模型及評(píng)價(jià)*

    2010-08-02 07:38:34彭朝權(quán)王景峰張成喜劉金來程木華鄒麗媛
    中國病理生理雜志 2010年9期
    關(guān)鍵詞:心梗造模生理鹽水

    彭朝權(quán), 王景峰, 楊 珂, 張成喜, 何 可, 康 莊, 劉金來, 程木華, 鄒麗媛

    (中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院1心內(nèi)科,2放射科,3核醫(yī)學(xué)科,廣東 廣州 510630;4中山大學(xué)附屬第二醫(yī)院心內(nèi)科,廣東 廣州 510120)

    動(dòng)物模型被廣泛應(yīng)用于研究人類疾病,動(dòng)物心肌梗死模型是研究冠心病發(fā)病機(jī)制和治療方法的重要工具。目前,用于建立心肌梗塞模型的常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物主要有:豬、犬、兔、羊、大鼠等。由于豬的心臟解剖、冠脈循環(huán)與人類似,特別是豬的血液黏稠度大,冠脈側(cè)支交叉分布較少,不易建立側(cè)支循環(huán),故成為建立心肌梗死模型良好的選擇[1]。目前,建立心肌梗死動(dòng)物模型的方法主要有:結(jié)扎法、球囊封堵法、栓塞法、血栓形成法、藥物法、冷凍法、選擇性飲食法及Ameriod環(huán)套扎法等。其中后兩者屬慢性心肌梗死模型[2]。球囊封堵法能夠減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物創(chuàng)傷,并能最大程度模擬臨床實(shí)際情況,但術(shù)中室顫和血栓形成等因素限制了該模型的應(yīng)用[3]。本文主要就球囊封堵法建立急性心肌梗死模型的可行性及注意事項(xiàng)進(jìn)行探討,以提高建立小型豬心梗模型的成功率。并以此心梗模型初步探討間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植治療心肌梗死的效果。

    材料和方法

    1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象

    8-12個(gè)月的成年小型藏豬(質(zhì)量合格證為 No.0038589),雌雄不限,體重33-36 kg,購自南方醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。

    2 材料

    2.1 介入材料 橈、股動(dòng)脈穿刺針,6F動(dòng)脈鞘,各種導(dǎo)絲(造影導(dǎo)絲,指引導(dǎo)絲),各種指引導(dǎo)管{6F左冠狀動(dòng)脈指引導(dǎo)管(JL4.0),6F右冠狀動(dòng)脈指引導(dǎo)管(JR4.0)},各種球囊(2.5 mm×15 mm、2.5 mm×18 mm),壓力泵及換能器等。

    2.2 監(jiān)護(hù)及搶救材料 監(jiān)護(hù)儀,心電圖機(jī),除顫器,小手術(shù)包,氣管切開包,鼻導(dǎo)管,搶救藥品,麻醉藥品。

    3 麻醉過程

    3.1 藥物 速眠新Ⅱ,規(guī)格為1.5 mL/支的注射液,購自軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所,批號(hào)為吉獸藥(2004)005013。戊巴比妥鈉,中國醫(yī)藥上?;瘜W(xué)試劑公司進(jìn)口分裝,25 g瓶裝粉劑,批號(hào)為F20030816。用生理鹽水配置成3%戊巴比妥鈉溶液,過濾消毒備用。地西泮注射液:規(guī)格為2 mL∶10 mg/支的注射液。

    3.2 麻醉方法

    ①誘導(dǎo)期 動(dòng)物術(shù)前8 h禁食,動(dòng)物一般情況良好,無煩躁不安,無嗜睡淡漠,無嘔吐,肢體活動(dòng)良好,血運(yùn)正常。稱重,按0.1 mL/kg劑量速眠新Ⅱ聯(lián)合0.6 mg/kg劑量地西泮注射液臀部肌內(nèi)注射。給藥后幾分鐘即表現(xiàn)為四肢無力、步履蹣跚、頭頸下垂、不能避讓障礙物進(jìn)而臥倒在地,全身肌肉松弛,痛覺消失。平均誘導(dǎo)期為30 min。

    ②維持期 將豬仰臥位固定雙上肢于特殊木架上,雙下肢于手術(shù)臺(tái)上,充分暴露雙側(cè)腹股溝。再以0.3 mL/mg的劑量耳后肌肉內(nèi)推注3%戊巴比妥鈉生理鹽水溶液。在維持期表現(xiàn)痛覺和觸覺消失,瞳孔散大,腹式呼吸,肌肉松弛,手術(shù)切割和內(nèi)臟牽拉無反應(yīng)。視術(shù)中動(dòng)物肢體反應(yīng)于1-1.5 h追加3%戊巴比妥鈉生理鹽水溶液5-10 mL。保持麻醉狀態(tài),監(jiān)測其生命體征。

    ③蘇醒期 術(shù)后基本生命體征穩(wěn)定后,不再追加麻藥,等待其自行蘇醒。

    4 心肌梗死模型建立方法

    4.1 術(shù)前準(zhǔn)備 固定體位后,耳緣、胸部、四肢局部去毛,接心電監(jiān)護(hù)。用套管針在豬耳緣靜脈建立靜脈通路,持續(xù)靜脈滴注5%葡萄糖生理鹽水溶液,維持體液平衡。預(yù)防性使用抗心律失常藥物,胺碘酮300 mg、利多卡因500 mg于5%葡萄糖生理鹽水靜滴。做術(shù)前心電圖,接胸導(dǎo)聯(lián)及肢體導(dǎo)聯(lián)。觀察心電圖,理想心率應(yīng)低于110 beats/min,無期前收縮及傳導(dǎo)阻滯。

    4.2 冠脈造影及球囊置入 常規(guī)消毒鋪巾,取豬右側(cè)腹股溝部位,可采用經(jīng)皮穿刺或切開分離出股動(dòng)脈直接穿刺。經(jīng)皮穿刺時(shí)觸及股動(dòng)脈搏動(dòng)最強(qiáng)處,右手持針對(duì)準(zhǔn)該點(diǎn)斜行平刺入,穿刺成功可見動(dòng)脈血色鮮紅自針尾噴出,送入導(dǎo)絲。也可切開皮膚,鈍性分離暴露右側(cè)股動(dòng)脈穿線,穿刺針小心刺入股動(dòng)脈,通過穿刺針?biāo)腿雽?dǎo)絲,沿導(dǎo)絲送入6F動(dòng)脈鞘管,隨即彈丸式靜脈注入肝素10000 U,手術(shù)過程中每隔30 min追加肝素2000 U。經(jīng)動(dòng)脈鞘置入6FJL4指引導(dǎo)管。經(jīng)該導(dǎo)管置入球囊導(dǎo)絲至左前降支(left anterior desending coronary artery,LAD)遠(yuǎn)端,經(jīng)該導(dǎo)絲置入直徑為2.5 mm×15 mm的球囊至第一或第二對(duì)角支遠(yuǎn)端,以2-4個(gè)大氣壓打開球囊(根據(jù)冠脈的直徑大小選擇,以球囊擴(kuò)張后造影遠(yuǎn)端血流中斷為標(biāo)準(zhǔn)),預(yù)適應(yīng)5-7次,第1次1 min,第2次2 min,第3次5 min,每次間隔5 min,第4次10 min,第5次15 min,第6次20 min,第7次30 min,每次間隔10 min。預(yù)適應(yīng)期間可預(yù)防性使用抗心律失常藥。觀察球囊堵閉過程中動(dòng)脈內(nèi)壓力、心電圖ST-T變化及有無心律失常等。如出現(xiàn)頻發(fā)室早、短陣室性心動(dòng)過速或心室顫動(dòng)等情況可考慮延長預(yù)適應(yīng)時(shí)間,如無異常,則以2-4個(gè)大氣壓打開球囊堵閉LAD,造影示球囊遠(yuǎn)端血流中斷,持續(xù)90 min之后,緩慢釋放球囊(0.5atm/5-10min)。再次造影觀察血供情況,血供良好退出鞘管,壓迫止血。術(shù)中連續(xù)心電監(jiān)護(hù)及鼻導(dǎo)管氧氣吸入,監(jiān)測心電圖、心率、呼吸、有創(chuàng)壓、血氧飽和度,發(fā)現(xiàn)異常時(shí),立刻采取相應(yīng)措施。

    4.3 術(shù)后護(hù)理 術(shù)后抗生素肌注3 d預(yù)防感染,第2 d恢復(fù)進(jìn)食。

    5 心梗模型成功的指標(biāo)

    心梗前后行心電圖(electrocardiogram,ECG)檢查,心梗后行超聲心動(dòng)圖(echocardiography,UCG)、心肌核素顯像(single photon emission computed tomography,SPECT)、最后處死小型豬行梗死部位的病理檢查以證實(shí)心肌梗死已經(jīng)發(fā)生。

    6 MSCs移植

    將造模成功的10只小型藏豬隨機(jī)分為2組,MSCs移植組5只,采用OTW球囊移植MSCs到心梗部位,生理鹽水組5只,以相同方法注射生理鹽水。8周后比較2組的左室射血分?jǐn)?shù)(left ventricular ejection fraction,LVEF)和短軸縮短率(fractional shortening,F(xiàn)S)、左室舒張末期內(nèi)徑(end diastolic volume,EDV)和左室收縮末期內(nèi)徑(end systolic volume,ESV)的變化。

    7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    結(jié) 果

    1 球囊封堵情況

    經(jīng)皮球囊封堵成功阻斷LAD中遠(yuǎn)段血流情況見圖1、圖2。

    Figure 1.Normal blood flow of coronary artery angiography before ballon occlusion.圖1 球囊封堵前的冠脈造影顯示血流正常

    Figure 2.No blood flow of middle-distal segment in LAD by coronary artery angiography after ballon occlusion.圖2 球囊封堵后的冠脈造影LAD中遠(yuǎn)段血流被球囊完全阻斷

    2 ECG檢測

    小型豬心肌梗死前后ECG變化見圖3、圖4。

    Figure 3.Normal ECG of mini swine before ballon occlusion.圖3 球囊封堵前正常小型豬的ECG

    Figure 4.STV1-V5drive up ECG of myocardial infarction in mini swine after ballon occlusion.圖4 球囊封堵后心肌梗死小型豬的ECG3UCG和ECT檢測

    心肌梗死小型豬的心臟超聲和心肌核素顯像表現(xiàn)見圖5、圖 6。

    Figure 5.Apex and septa were thin,movement was weak detected by UCG.圖5 UCG示心尖和室間隔變薄、運(yùn)動(dòng)減弱

    Figure 6.Perfusion defect of apex and septa detected by SPECT圖6 ECT示心尖和室間隔核素灌注充盈缺損

    4 病理改變

    小型豬正常心肌和梗死心肌的病理變化,見圖7、8。

    Figure 7.Normal myocardium tissue.圖7 正常心肌組織

    Figure 8.Myocardial cell edema,profile illegibility and nucleus discharge of part cells were observed.圖8 心肌梗死后可見心肌細(xì)胞水腫,組織輪廓模糊,部分細(xì)胞核逸出胞質(zhì)

    5 成功率及術(shù)中并發(fā)癥

    20只豬均成功完成冠脈造影,經(jīng)皮球囊封堵法成功制備小型豬心肌梗死模型10只,均經(jīng)過ECG、UCG、ECT和病理證實(shí),成功率50%。死亡10只,其中4只分別于球囊封堵過程中誘發(fā)心室纖顫死亡,2只封堵結(jié)束時(shí)球囊釋放過快,致再灌注心律失常出現(xiàn)心室纖顫死亡,1只因指引導(dǎo)管深插入冠脈開口內(nèi),刺激冠狀動(dòng)脈痙攣,誘發(fā)心室纖顫死亡。1只因麻醉過深至呼吸抑制死亡,1只因麻醉不佳豬躁動(dòng)致指引導(dǎo)管穿破左冠狀竇急性心包填塞,心室纖顫死亡,1只疑肝素用量不足至冠脈內(nèi)血栓形成,血壓下降,心室纖顫死亡。

    6 UCG檢查結(jié)果發(fā)現(xiàn)

    與造模之前比,心梗后左室舒張末期內(nèi)徑(EDV)和左室收縮末期內(nèi)徑(ESV)顯著延長,左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)和短軸縮短率(FS)顯著下降(P<0.05),室壁活動(dòng)減弱。8周后,MSCs移植組均較移植前好轉(zhuǎn)(P<0.05,P<0.01),而生理鹽水組亦有所改善,但無顯著差異;MSCs移植組的EDV和ESV較生理鹽水組明顯減少(P<0.05,P<0.01),MSCs移植組的LVEF和FS較生理鹽水組明顯增加(P<0.05,P<0.01),見表1,MSCs移植組的室壁活動(dòng)較生理鹽水組好轉(zhuǎn)。

    表1 超聲心動(dòng)圖測定心功能的指標(biāo)Table 1.Index of left ventricular function by UCG examination(.n=5)

    表1 超聲心動(dòng)圖測定心功能的指標(biāo)Table 1.Index of left ventricular function by UCG examination(.n=5)

    **P <0.01 vs baseline;△P <0.05;△△P <0.01 vs 1 week after myocardial infarction.

    n LVEF(%)Baseline 82.75 ±6.43 82.34 ±5.951 week after myocardial infarction 63.06 ±4.89** 60.73 ±4.16**8 weeks after myocardial infarction 68.63 ±5.62 78.98 ±5.86△EDV(mL)Baseline 45.68 ±5.86 43.93 ±5.421 week after myocardial infarction 67.53 ±8.94** 65.19 ±7.69**8 weeks after myocardial infarction 69.86 ±7.64 46.31 ±6.18△△ESV(mL)Baseline 8.65 ±2.40 7.73 ±2.151 week after myocardial infarction 24.64 ±3.83** 25.62 ±4.74**8 weeks after myocardial infarction 19.68 ±3.29 11.84 ±2.96△FS(%)Baseline 51.42 ±5.36 50.67 ±5.241 week after myocardial infarction 33.74 ±3.78** 32.85 ±3.41**8 weeks after myocardial infarction 38.28 ±4.35 47.84 ±4.93△△

    討 論

    多年來動(dòng)物心梗模型一直沿用開胸結(jié)扎法[4],此法對(duì)動(dòng)物創(chuàng)傷較大,術(shù)后難飼養(yǎng),恢復(fù)慢,死亡率高[5],隨著介入技術(shù)的飛速發(fā)展,使得經(jīng)皮球囊封堵術(shù)制備心梗模型變?yōu)榭赡?,本研究采用的是?jīng)皮球囊封堵術(shù),它簡便易行,創(chuàng)傷?。?];且相比較開胸結(jié)扎法,心梗相關(guān)血管還可以再利用,比如通過該血管注射藥物或?qū)⒐撬韪杉?xì)胞移植到梗死區(qū),進(jìn)行更多領(lǐng)域的研究等。

    西藏小型豬是我國目前已知小型豬中體重最輕的品種之一,是一種理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物[7]。在解剖學(xué)方面,豬的心臟結(jié)構(gòu)及冠脈走行也與人有獨(dú)特的相似性。西藏小型豬與人類的血液生理指標(biāo)及血液生化指標(biāo)的比較,與其它實(shí)驗(yàn)動(dòng)物如犬、獼猴,差異是最小的。尤其是CHOL和TG指標(biāo)與人類接近,可能更適合用于人類器官移植的供體、制作心血管方面的疾病動(dòng)物模型等等。但是藏豬的紅細(xì)胞數(shù)和血紅蛋白偏高,可能與藏豬來自高原環(huán)境有關(guān)。血小板 PLT在(424.62±172.21)×109/L,高出人類正常值范圍,且有顯著差異。西藏小型豬的紅細(xì)胞壓積(HCT)高于人類且有顯著差異。這說明西藏小型豬的血液較黏稠,凝血功能較人類強(qiáng)。因此,在制備心梗模型時(shí)要特別注意加強(qiáng)抗凝治療,本文在開始造模時(shí)沒有特別注意這一點(diǎn),結(jié)果有1只豬因冠脈廣泛血栓形成而導(dǎo)致死亡,在以后的造模過程中注意大劑量肝素抗凝和30 min追加肝素,就再也沒有發(fā)生血栓事件。

    本文造模的成功率為50%,與孫帥等[8]報(bào)道的結(jié)果相似,死亡主要發(fā)生在造模初期,主要死于心室纖顫。待一切條件摸索成熟后,很少再出現(xiàn)動(dòng)物死亡。在本實(shí)驗(yàn)中,選取的小型豬體重在30-40 kg之間,方便操作,且動(dòng)物有一定的耐受力。術(shù)前動(dòng)物應(yīng)具備良好的一般生命體征,是實(shí)驗(yàn)成功的前提條件。理想的動(dòng)物生命體征包括心率平均為(110.96±29.37)beats/min,根據(jù)在實(shí)驗(yàn)中的體會(huì),應(yīng)維持術(shù)中心率小于110 beats/min、呼吸20 beats/min、血壓平均120/80 mm-Hg比較理想。

    實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行應(yīng)有良好的麻醉作為保障。在實(shí)驗(yàn)初期,有1只豬麻醉效果不穩(wěn)定,術(shù)中肢體擺動(dòng),煩躁不安,體位固定不佳。在球囊封堵20 min時(shí),血壓由156/120 mmHg迅速下降至20/20 mmHg,造影劑在冠脈開口處向四周擴(kuò)散,心包穿刺出不凝血,術(shù)后尸檢發(fā)現(xiàn)在冠脈開口附近有一破裂口貫通主動(dòng)脈管壁??紤]為麻醉過淺,豬肢體擺動(dòng),指引導(dǎo)管刺破管壁,誘發(fā)急性心臟壓塞。另有1只因麻醉過深導(dǎo)致呼吸停止而死亡。本實(shí)驗(yàn)中,麻醉采用的是地西泮、速眠新Ⅱ聯(lián)用戊巴比妥鈉生理鹽水溶液肌肉注射。速眠新注射液為氟哌啶醇、保定寧、新保靈、氯胺酮等藥物制成的復(fù)方制劑。具有中樞性鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜和肌肉松弛作用,具有起效快特點(diǎn)。但由于麻醉維持時(shí)間短,常被用作大動(dòng)物手術(shù)前誘導(dǎo)麻醉[9]。戊巴比妥鈉屬于巴比妥酸鈉的衍生物,屬于中效催眠藥,隨著劑量從小到大,依次會(huì)出現(xiàn)鎮(zhèn)靜、催眠和麻醉作用。該藥具有靜脈注射起效快、麻醉過程平穩(wěn),維持時(shí)間較長,術(shù)后恢復(fù)快等特點(diǎn),但其安全范圍較窄,對(duì)呼吸和循環(huán)系統(tǒng)有嚴(yán)重抑制,會(huì)出現(xiàn)血壓降低。聯(lián)合使用可以減少單獨(dú)使用每種藥物的劑量,進(jìn)而降低藥物對(duì)動(dòng)物的副作用,減少其在動(dòng)物體內(nèi)因麻醉藥蓄積造成的麻醉意外[10]。行腹腔麻醉效果不佳,是由于腹腔注射后藥物在腹腔內(nèi)被腹水稀釋后再緩慢吸收,血液達(dá)到有效濃度的時(shí)間較長,靜脈麻醉又不易控制給藥速度,不易控制麻醉深度。小型豬肌肉注射藥物先彌散入肌肉組織再進(jìn)入血液循環(huán),可起到一定的緩沖作用,有利于麻醉深度的控制。耳后肌群松軟,神經(jīng)反射不敏感,更利于給藥和縮短誘導(dǎo)時(shí)間。術(shù)中每隔30 min-1 h追加初始劑量的1/3-1/4,有效維持麻醉。

    實(shí)驗(yàn)豬心臟與體重的比值接近人類。有左右2條冠狀動(dòng)脈起自升主動(dòng)脈根部,位于主動(dòng)脈瓣上方。2條冠脈直徑相似,但與人相比,側(cè)枝循環(huán)較少。左冠狀動(dòng)脈走行于肺動(dòng)脈與左心耳之間,在到達(dá)錐旁室間溝前分為錐旁室間支和回旋支。前者發(fā)往心尖,類似于人類的左前降支LAD。它和右冠脈提供約80%的心肌血供。左冠脈分支供應(yīng)左心房、右心室、左心室、室間隔。豬的這些特殊的生理結(jié)構(gòu)使其在進(jìn)行心臟導(dǎo)管介入和心肌內(nèi)注射實(shí)驗(yàn)時(shí)易誘發(fā)心律失常、冠脈痙攣、血栓形成、心室纖顫、心臟停搏和猝死。在本實(shí)驗(yàn)中,心室纖顫的發(fā)生率為45%,且一旦發(fā)生室顫,搶救成功很低。綜合室顫發(fā)生的原因,有以下幾個(gè)方面:首先,急性缺血后折返環(huán)形成、觸發(fā)活動(dòng)、自律性升高構(gòu)成了室性心律失常的物質(zhì)基礎(chǔ)[11]。其次,相比其它動(dòng)物種屬,豬本身室顫閾值較低,缺血后容易誘發(fā)室顫[12]。另外,與人類急性心梗發(fā)生在粥樣斑塊基礎(chǔ)上不同,模型動(dòng)物冠狀動(dòng)脈本身正常,球囊封堵后心肌細(xì)胞缺乏缺血預(yù)適應(yīng)過程,容易發(fā)生心律失常[13]。

    因而在實(shí)驗(yàn)中我們應(yīng)采取如下措施降低室顫的發(fā)生率及死亡率:(1)麻醉適當(dāng),既不能過淺,也不宜過深。(2)肝素用量宜大,且于造模術(shù)中定期追加,才能預(yù)防血栓形成。(3)球囊封堵位置不宜過高,由于豬的LAD支配范圍廣,而側(cè)枝循環(huán)少,高位阻斷會(huì)擴(kuò)大心梗面積,超出豬的耐受能力。我們選用封堵點(diǎn)在左前降支第二對(duì)角支遠(yuǎn)端,既可以達(dá)到滿意的實(shí)驗(yàn)效果又可以保證存活率。(4)造模前和造模過程中,預(yù)防性靜脈給予利多卡因和胺碘酮,從而有效預(yù)防心律失常的發(fā)生。(5)造模開始時(shí),適當(dāng)延長預(yù)適應(yīng)時(shí)間和次數(shù)。(6)造模成功后,緩慢釋放球囊可明顯減少再灌注心律失常的發(fā)生。一旦發(fā)生惡性心律失常,則應(yīng)立即進(jìn)行緊急處理。如出現(xiàn)室性早搏時(shí),立即加大利多卡因和胺碘酮的用量。如出現(xiàn)室性心動(dòng)過速,立即靜脈注射利多卡因和胺碘酮。對(duì)于心室顫動(dòng),立即給予360J體外除顫,胸外按壓,直至恢復(fù)竇性心律。經(jīng)過實(shí)驗(yàn)前期的經(jīng)驗(yàn)積累,實(shí)驗(yàn)后期我們采用了以上預(yù)防措施,大大減少了室顫的發(fā)生率,提高了造模的成功率。

    本文采用了造模成功的小型藏豬,觀察了MSCs經(jīng)冠脈移植對(duì)小型藏豬梗死心肌的療效,MSCs移植組和生理鹽水組的基線LVEF、FS、EDV、ESV均無顯著差異,2組造模1周的LVEF、FS均較造模前明顯降低(P<0.01),但2組比較無顯著差異(P>0.05)。EDV、ESV均較造模前明顯增大(P<0.01),但2組比較無顯著差異(P>0.05),即2組小型藏豬的心梗模型具有可比性。MSCs移植組8周時(shí)LVEF、FS較心梗1周時(shí)明顯增加(P<0.05),EDV、ESV均較心梗1周時(shí)明顯減少(P<0.01),而生理鹽水組移植8周時(shí)LVEF、FS較心梗1周時(shí)有所增加,EDV、ESV均較心梗1周時(shí)有所減少,但均無顯著差異(P>0.05),心梗8周時(shí)MSCs移植組較生理鹽水組的 LVEF、FS明顯增加(P<0.05,P<0.01),EDV、ESV 明顯減少(P <0.05,P <0.01),說明 MSCs移植治療心肌梗死是有效的,同時(shí)也進(jìn)一步說明經(jīng)皮球囊封堵冠狀動(dòng)脈法制備的小型豬心肌梗死模型適合進(jìn)行骨髓干細(xì)胞移植的研究。

    [1]蔣益波,馮 毅,丁建東,等.豬急性心肌梗死模型的建立[J].東南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2006,25(6):441-444.

    [2]沈 偉,施海明,范維琥,等.小型豬實(shí)驗(yàn)性慢性心肌缺血模型的建立[J].中國病理生理雜志,2007,23(10):2078-2080.

    [3]Kmmbach GA,Kinzel S,Mahnken AH,et a1.Minimally invasiveclose-chest method for creating reporfused or oc-clusive myocardial infaretionin swine[J].Invest Rediol,2005,40(1):14-18.

    [4]張 治,諸葛縈,朱彥琪,等.裸鼠心梗模型及外周血干細(xì)胞移植模型的建立[J].中國病理生理雜志,2007,23(7):1454-1456.

    [5]Ohtsuka S,Ishikawa K,Suzuki S,et al.A porcine model of ischemic heart failure produced by chronic placement of a tube in a coronary artery[J].Eur J Heart Fail,2003,5(5):591-598.

    [6]Reffelmann T,Sensebat O,Birnbaum Y,et al.A novel minimal-invasive model of chronic myocardial infarction in swine[J].Coron Artery Dis,2004,15(1):7 -12.

    [7]羅 剛,張 樂.我國實(shí)驗(yàn)用小型豬的應(yīng)用研究前景[J].實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)與管理,2004,21(2):18-20.

    [8]孫 帥,郭 濤.冠狀動(dòng)脈堵閉法與栓塞法制備小型豬心肌梗死模型的對(duì)比[J].中國組織工程研究與臨床康復(fù),2009,13(50):9913-9916.

    [9]高天舒,鄒飛燕,唐運(yùn)蓮,等.速眠新復(fù)合麻醉對(duì)外科手術(shù)實(shí)驗(yàn)用犬的效果觀察[J].中國比較醫(yī)學(xué)雜志,2006,16(6):339-340.

    [10]吳清洪,那順巴雅爾,陳 麗,等.戊巴比妥鈉聯(lián)用速眠新Ⅱ?qū)ξ鞑匦⌒拓i麻醉效果觀察[J].中國比較醫(yī)學(xué)雜志,2008,18(10):29-31.

    [11]Wolk R,Cobbe SM,Hicks MN,et al.Functional,structural,and dynamic basis of electrical heterogeneity in healthy and diseased cardiac muscle:implications for arrhythmogenesis and anti- arrhythmic drug therapy[J].Pharmacol Ther,1999,84(2):207 -231.

    [12]Suzuki M,Asano H,Tanaka H,et al.Development and evaluation of a new canine myocardial infarction model using a closed-chest injection of thrombogenic material[J].Jpn Circ J,1999,63(11):900 -905.

    [13]Hong K,Kusano KF,Morita H,et al.Involvement of Ca2+in antiarrhythmic effect of ischemic preconditioning in isolated rat heart[J].Jpn J Physiol,2000,50(2):207-213.

    猜你喜歡
    心梗造模生理鹽水
    Physiological Saline
    腎陽虛證動(dòng)物模型建立方法及評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)研究進(jìn)展
    脾腎陽虛型骨質(zhì)疏松癥動(dòng)物模型造模方法及模型評(píng)價(jià)
    濕熱證動(dòng)物模型造模方法及評(píng)價(jià)研究
    心梗突發(fā)的九大不典型“求救信號(hào)”
    誘發(fā)“心梗”的10個(gè)危險(xiǎn)行為
    祝您健康(2019年10期)2019-10-18 01:29:28
    自制生理鹽水
    β2微球蛋白的升高在急性心梗中預(yù)測死亡風(fēng)險(xiǎn)的臨床意義
    潤腸通便功能試驗(yàn)中造模劑的選擇
    生理鹽水的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為什么是0.9%
    色哟哟·www| 精品久久久久久久久久久久久| 99精品在免费线老司机午夜| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 欧美又色又爽又黄视频| 国产精品三级大全| 熟女人妻精品中文字幕| 国产在线男女| 国产精品综合久久久久久久免费| 欧美精品国产亚洲| 性色avwww在线观看| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 欧美人与善性xxx| 我的老师免费观看完整版| 久久久久久伊人网av| 我要搜黄色片| 晚上一个人看的免费电影| 国产av麻豆久久久久久久| 日本黄色视频三级网站网址| 五月玫瑰六月丁香| 99在线视频只有这里精品首页| 高清在线视频一区二区三区 | 国产乱人偷精品视频| 亚洲最大成人中文| 久久99蜜桃精品久久| 久久久久久久午夜电影| 国产视频内射| 欧美+日韩+精品| 久久久午夜欧美精品| 国产一区二区亚洲精品在线观看| av女优亚洲男人天堂| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 五月伊人婷婷丁香| videossex国产| 99热这里只有精品一区| 欧美最新免费一区二区三区| 国产私拍福利视频在线观看| 夜夜爽天天搞| 亚洲国产精品国产精品| 成年女人看的毛片在线观看| 久久中文看片网| 在线观看午夜福利视频| 高清在线视频一区二区三区 | 欧美精品一区二区大全| 一级毛片电影观看 | 嘟嘟电影网在线观看| 91精品一卡2卡3卡4卡| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 哪里可以看免费的av片| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 少妇的逼水好多| 日本免费一区二区三区高清不卡| 久久精品影院6| 午夜福利视频1000在线观看| 国产大屁股一区二区在线视频| 夫妻性生交免费视频一级片| 黑人高潮一二区| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 久久久久久久久久久丰满| 亚洲av二区三区四区| 在线观看一区二区三区| 在线观看午夜福利视频| 成人综合一区亚洲| 午夜福利在线在线| 69av精品久久久久久| 中文字幕制服av| 看免费成人av毛片| 亚洲av男天堂| 男人和女人高潮做爰伦理| 欧美一级a爱片免费观看看| av.在线天堂| 99热只有精品国产| 熟女人妻精品中文字幕| 伊人久久精品亚洲午夜| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 国产片特级美女逼逼视频| 国产色婷婷99| 亚洲av中文av极速乱| 精品久久国产蜜桃| 成人鲁丝片一二三区免费| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 亚洲天堂国产精品一区在线| 边亲边吃奶的免费视频| 一级二级三级毛片免费看| 青春草国产在线视频 | 亚洲国产欧美人成| 免费在线观看成人毛片| 国产毛片a区久久久久| 日韩精品有码人妻一区| 男女视频在线观看网站免费| 亚洲在线自拍视频| 三级国产精品欧美在线观看| 国产精品精品国产色婷婷| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产伦一二天堂av在线观看| 国产伦精品一区二区三区视频9| 嫩草影院入口| 久久人妻av系列| 日本黄大片高清| 国产黄a三级三级三级人| 可以在线观看的亚洲视频| 亚洲av成人精品一区久久| 少妇熟女aⅴ在线视频| 日韩精品青青久久久久久| 国产一区二区在线av高清观看| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 国产美女午夜福利| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | av又黄又爽大尺度在线免费看 | 久久99热这里只有精品18| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 国产精品无大码| 一边亲一边摸免费视频| 久久韩国三级中文字幕| 久99久视频精品免费| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 成人欧美大片| 国内精品一区二区在线观看| 国产乱人视频| 久久亚洲精品不卡| 九九热线精品视视频播放| 国产精品久久视频播放| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 如何舔出高潮| 联通29元200g的流量卡| 国产精品.久久久| 波多野结衣高清无吗| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 六月丁香七月| 免费黄网站久久成人精品| 少妇的逼水好多| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 久久这里只有精品中国| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 午夜精品在线福利| 如何舔出高潮| 日韩在线高清观看一区二区三区| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 永久网站在线| www日本黄色视频网| 色哟哟·www| 毛片一级片免费看久久久久| 桃色一区二区三区在线观看| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 麻豆成人av视频| 两个人的视频大全免费| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 国产私拍福利视频在线观看| 午夜福利视频1000在线观看| 老女人水多毛片| 日本-黄色视频高清免费观看| 精品久久国产蜜桃| 国产精品永久免费网站| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 免费看美女性在线毛片视频| 国产 一区 欧美 日韩| 男的添女的下面高潮视频| 综合色丁香网| 啦啦啦观看免费观看视频高清| av天堂在线播放| 久久综合国产亚洲精品| 亚洲第一电影网av| 日本五十路高清| 天美传媒精品一区二区| 亚洲国产精品国产精品| 大型黄色视频在线免费观看| 国产黄片视频在线免费观看| 联通29元200g的流量卡| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 国产淫片久久久久久久久| 美女被艹到高潮喷水动态| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 在线免费十八禁| 特级一级黄色大片| 美女国产视频在线观看| 国产亚洲欧美98| 成人亚洲欧美一区二区av| 久久精品综合一区二区三区| 亚洲第一电影网av| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 国产成人a∨麻豆精品| 联通29元200g的流量卡| 99久久精品热视频| 乱系列少妇在线播放| 欧美激情久久久久久爽电影| 国产一区亚洲一区在线观看| 嘟嘟电影网在线观看| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产精品日韩av在线免费观看| 国产精品久久久久久久久免| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 床上黄色一级片| 如何舔出高潮| 国产乱人视频| 美女cb高潮喷水在线观看| av专区在线播放| 亚洲成人精品中文字幕电影| 可以在线观看的亚洲视频| 伦理电影大哥的女人| 亚洲自偷自拍三级| 欧美成人精品欧美一级黄| 亚洲国产高清在线一区二区三| 一级二级三级毛片免费看| 老女人水多毛片| 国产精品福利在线免费观看| 老司机影院成人| 搞女人的毛片| 精品久久久久久久久av| 久久久久久久久久久丰满| 神马国产精品三级电影在线观看| 亚洲欧美日韩高清专用| 婷婷精品国产亚洲av| 国产成人91sexporn| 欧美成人一区二区免费高清观看| 中出人妻视频一区二区| 午夜免费男女啪啪视频观看| 2022亚洲国产成人精品| 国产高清视频在线观看网站| 嫩草影院入口| 亚洲av电影不卡..在线观看| 岛国毛片在线播放| 日本色播在线视频| 中国国产av一级| 国产精品一二三区在线看| 亚洲人成网站在线观看播放| 身体一侧抽搐| 爱豆传媒免费全集在线观看| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 黄色一级大片看看| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 欧美另类亚洲清纯唯美| 久久精品人妻少妇| 亚洲精品国产av成人精品| 亚洲成av人片在线播放无| 男女下面进入的视频免费午夜| 一进一出抽搐动态| 九九在线视频观看精品| 成年女人永久免费观看视频| 99热6这里只有精品| 丝袜喷水一区| 夜夜夜夜夜久久久久| 青春草视频在线免费观看| 看免费成人av毛片| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 日韩人妻高清精品专区| 精品国产三级普通话版| 嫩草影院精品99| 亚洲久久久久久中文字幕| 免费观看在线日韩| a级毛片a级免费在线| 午夜激情欧美在线| 啦啦啦韩国在线观看视频| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 日韩成人av中文字幕在线观看| 一级av片app| 成人永久免费在线观看视频| 99国产极品粉嫩在线观看| 国产黄色小视频在线观看| 一级av片app| 国产精品1区2区在线观看.| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 成人漫画全彩无遮挡| 国产视频内射| 久久久久久久久久久免费av| 亚洲自偷自拍三级| 国产中年淑女户外野战色| 国产伦在线观看视频一区| 深夜a级毛片| 午夜亚洲福利在线播放| 久久久久久久久久久丰满| 国产精品一区二区性色av| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | av卡一久久| 久久久精品大字幕| 久久精品人妻少妇| 日日干狠狠操夜夜爽| 亚洲第一电影网av| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 深爱激情五月婷婷| 午夜精品国产一区二区电影 | 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 久久精品影院6| 女人被狂操c到高潮| 白带黄色成豆腐渣| 亚洲成人精品中文字幕电影| 一本久久中文字幕| 色5月婷婷丁香| 黄片无遮挡物在线观看| 两个人视频免费观看高清| 日本在线视频免费播放| 精品一区二区三区人妻视频| 欧美精品国产亚洲| 桃色一区二区三区在线观看| 一个人看的www免费观看视频| 国产精品免费一区二区三区在线| 国产真实乱freesex| 内射极品少妇av片p| 日韩欧美一区二区三区在线观看| av女优亚洲男人天堂| 亚洲,欧美,日韩| 亚洲综合色惰| 久久久色成人| 国产成人一区二区在线| 国产一区二区在线观看日韩| 久久久色成人| 搞女人的毛片| 久久人人爽人人爽人人片va| 国产视频内射| 欧美区成人在线视频| 男女边吃奶边做爰视频| 国产精品蜜桃在线观看 | 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 在线免费十八禁| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 精品久久久久久久久亚洲| 男人和女人高潮做爰伦理| 少妇熟女aⅴ在线视频| 搡女人真爽免费视频火全软件| 国产精品嫩草影院av在线观看| 十八禁国产超污无遮挡网站| 日日啪夜夜撸| 一边摸一边抽搐一进一小说| 免费人成在线观看视频色| 欧美日韩精品成人综合77777| videossex国产| 亚洲无线观看免费| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 日韩 亚洲 欧美在线| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 丰满乱子伦码专区| 99热这里只有精品一区| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 男女视频在线观看网站免费| 亚洲人成网站在线观看播放| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 少妇人妻精品综合一区二区 | 日韩精品有码人妻一区| 日韩亚洲欧美综合| 成人永久免费在线观看视频| av免费在线看不卡| 午夜激情福利司机影院| 国产精品.久久久| 国产成人精品婷婷| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 午夜精品国产一区二区电影 | 日韩av不卡免费在线播放| 丝袜美腿在线中文| 啦啦啦韩国在线观看视频| 五月伊人婷婷丁香| 99久久精品国产国产毛片| 久久久久免费精品人妻一区二区| avwww免费| 久久久久性生活片| .国产精品久久| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 联通29元200g的流量卡| 亚洲国产高清在线一区二区三| 国国产精品蜜臀av免费| 亚洲国产色片| 级片在线观看| 精品人妻偷拍中文字幕| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 午夜激情欧美在线| 亚洲欧美日韩东京热| 99久久中文字幕三级久久日本| 免费在线观看成人毛片| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 久久国产乱子免费精品| 一本一本综合久久| 日韩国内少妇激情av| 久久久久久伊人网av| 色播亚洲综合网| 国产在线男女| 欧美精品国产亚洲| 国产久久久一区二区三区| 大型黄色视频在线免费观看| 国产精品久久久久久av不卡| 少妇的逼水好多| 亚洲综合色惰| 色视频www国产| 成年女人看的毛片在线观看| 亚洲国产精品成人综合色| 国产欧美日韩精品一区二区| 亚洲欧洲国产日韩| 国产片特级美女逼逼视频| 成年版毛片免费区| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 精品日产1卡2卡| 91久久精品电影网| 成人无遮挡网站| 欧美一级a爱片免费观看看| www.色视频.com| 午夜精品国产一区二区电影 | 人体艺术视频欧美日本| 欧美一区二区亚洲| 成人欧美大片| 亚洲成人中文字幕在线播放| 久久99热6这里只有精品| 国产爱豆传媒在线观看| 国产精品久久视频播放| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 99热网站在线观看| 99久国产av精品| 麻豆久久精品国产亚洲av| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 麻豆av噜噜一区二区三区| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 极品教师在线视频| 在线a可以看的网站| 麻豆国产97在线/欧美| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 看免费成人av毛片| 男女边吃奶边做爰视频| 亚洲久久久久久中文字幕| 男的添女的下面高潮视频| av在线播放精品| 欧美一级a爱片免费观看看| 亚洲欧洲国产日韩| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产高潮美女av| 日本爱情动作片www.在线观看| 九九爱精品视频在线观看| 神马国产精品三级电影在线观看| 最后的刺客免费高清国语| 久久久久久久久中文| 26uuu在线亚洲综合色| 一本一本综合久久| 九草在线视频观看| 国产精品人妻久久久影院| 桃色一区二区三区在线观看| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 嫩草影院精品99| 国产在视频线在精品| 国产亚洲5aaaaa淫片| 成人无遮挡网站| 国产精品不卡视频一区二区| 久久精品国产自在天天线| 好男人在线观看高清免费视频| 欧美激情国产日韩精品一区| 亚州av有码| 免费看日本二区| 亚洲成人av在线免费| 变态另类丝袜制服| 欧美极品一区二区三区四区| 日韩一本色道免费dvd| 性色avwww在线观看| 欧美+日韩+精品| 99热网站在线观看| 国产日本99.免费观看| 欧美最新免费一区二区三区| 国产一区二区激情短视频| 成熟少妇高潮喷水视频| 久久久久久九九精品二区国产| 深夜精品福利| 久99久视频精品免费| 99视频精品全部免费 在线| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 欧美日韩国产亚洲二区| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 又爽又黄无遮挡网站| 国产精品综合久久久久久久免费| videossex国产| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 国产大屁股一区二区在线视频| 亚洲欧美精品专区久久| 麻豆成人午夜福利视频| 久久久久久久久久久免费av| 一级二级三级毛片免费看| 免费观看精品视频网站| 婷婷六月久久综合丁香| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产爱豆传媒在线观看| 国产成人影院久久av| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 舔av片在线| 91狼人影院| 我的女老师完整版在线观看| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 久久久成人免费电影| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 成人三级黄色视频| 一本久久精品| 亚洲成人av在线免费| 男女视频在线观看网站免费| 尾随美女入室| 国产精品一区二区三区四区久久| 国产综合懂色| 日韩欧美三级三区| 高清在线视频一区二区三区 | 国产伦一二天堂av在线观看| 亚洲自偷自拍三级| 成人亚洲精品av一区二区| 久久国产乱子免费精品| 亚洲一区高清亚洲精品| 国产精品一区二区性色av| 亚洲国产色片| 国产极品精品免费视频能看的| 久久韩国三级中文字幕| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 国产精品久久视频播放| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 久久6这里有精品| 国产精品人妻久久久久久| 国产黄a三级三级三级人| 精品人妻一区二区三区麻豆| 午夜a级毛片| 校园春色视频在线观看| www日本黄色视频网| 一级av片app| 欧美日韩在线观看h| 青春草国产在线视频 | 嫩草影院精品99| 久久亚洲国产成人精品v| 欧美一区二区亚洲| 欧美激情国产日韩精品一区| 搡老妇女老女人老熟妇| 亚洲欧美清纯卡通| 插逼视频在线观看| 国产亚洲精品久久久com| 亚洲一区二区三区色噜噜| 亚洲av免费高清在线观看| 人妻夜夜爽99麻豆av| 一进一出抽搐动态| 国产三级中文精品| 一级黄片播放器| 亚洲乱码一区二区免费版| 男人狂女人下面高潮的视频| 久久国产乱子免费精品| 国产精品久久久久久久久免| avwww免费| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 嫩草影院新地址| 国产极品精品免费视频能看的| 免费看av在线观看网站| 深夜精品福利| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 国产真实乱freesex| 男女下面进入的视频免费午夜| 国产av麻豆久久久久久久| 国产精品久久久久久av不卡| 男人舔奶头视频| 国产在视频线在精品| 国产精品精品国产色婷婷| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 国产片特级美女逼逼视频| 色噜噜av男人的天堂激情| 国产精品电影一区二区三区| 99久久无色码亚洲精品果冻| 亚洲精品自拍成人| 中文在线观看免费www的网站| 国产精品女同一区二区软件| 中文亚洲av片在线观看爽| 秋霞在线观看毛片| 成人国产麻豆网| 国产成人午夜福利电影在线观看| 高清毛片免费观看视频网站| 精品人妻视频免费看| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 欧美激情在线99| 日韩一本色道免费dvd| 99久久成人亚洲精品观看| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 亚洲第一区二区三区不卡| 99久国产av精品| 男女边吃奶边做爰视频| 在线观看66精品国产| 日本黄色片子视频| 又粗又硬又长又爽又黄的视频 | 精品久久国产蜜桃| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 国产视频内射| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 国产精品.久久久| 韩国av在线不卡| 亚洲av.av天堂| 内射极品少妇av片p| 国产真实乱freesex| 久久99热这里只有精品18| 免费av观看视频| 国内精品宾馆在线| 日韩精品有码人妻一区| 97超碰精品成人国产| 中国美女看黄片| 深夜a级毛片| 成人综合一区亚洲| 99久久无色码亚洲精品果冻| 国产av在哪里看| 亚洲图色成人| 色哟哟·www| 天天一区二区日本电影三级| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 麻豆久久精品国产亚洲av| 欧美丝袜亚洲另类| 久久久成人免费电影| 午夜视频国产福利| 美女cb高潮喷水在线观看| 少妇被粗大猛烈的视频| 国产午夜精品一二区理论片| 禁无遮挡网站| 免费看a级黄色片| 日本三级黄在线观看| 日韩三级伦理在线观看| 人人妻人人看人人澡| 两个人视频免费观看高清| 欧美+日韩+精品| 日韩成人av中文字幕在线观看| 成年版毛片免费区| 久久国内精品自在自线图片| av在线蜜桃| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 村上凉子中文字幕在线| 日本三级黄在线观看|