鹽酸美普他酚片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究

楊 杰 ，陳渝軍 ，易以木

(1.武漢市婦女兒童醫(yī)療保健中心，湖北武漢 430016；2.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，湖北武漢 430030)

鹽酸美普他酚（meptazinol hydrochloride，MPH）為強(qiáng)效鎮(zhèn)痛劑，對呼吸抑制作用較弱，主要用于中等度疼痛、外傷、術(shù)后、產(chǎn)科疼痛及腎絞痛等[1]。片劑為白色或類白色粉末，制成制劑后均為白色，極易溶于水與甲醇，可溶于丙酮。本文制訂的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)能很好地控制產(chǎn)品質(zhì)量。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

紫外分光光度計（UV-260型，日本島津）；硅膠板（武漢藥科新科技開發(fā)有限公司）；DIONEX680PA （serialnumber：10000409，美國）；高效液相色譜儀。

1.2 試藥

MPH，甲基紅（上海遠(yuǎn)航化工廠），氫氧化鈉滴定液（天津市北方化玻購銷中心），乙醇（上海振興化工一廠），氨水（北方化工廠），氯仿、乙酸乙酯（上海試劑一廠），甲醇（fisher scientific）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：ODS Hypersil C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動相：甲醇-0.05mol/L 醋酸銨緩沖液（50∶50），醋酸調(diào) pH=6；檢測波長：275 nm；流速：1.0 ml/min。

2.2 鑒別

2.2.1 化學(xué)法鑒別 以0.2%本品溶于10 ml水中，加甲基紅1滴，顯紅色，加氫氧化鈉滴定液（0.02 mol/L）0.2 ml，變?yōu)辄S色。

2.2.2 紫外法鑒別 將0.01%（w/v）的本品溶液溶于乙醇中，并在190～400 nm范圍內(nèi)進(jìn)行檢測，在275 nm處有最大吸收，吸收度為0.8。

2.2.3 薄層法鑒別 采用60F-254硅膠板，將18 mol/L氨水-氯仿-乙酸乙酯以1∶30∶70的比例混合，作為流動相。分別以1.0%（溶液 1），0.01%（溶液 2），0.005%（溶液 3）的比例點三個樣。取出薄層板置于空氣中，在紫外燈下檢測（254 nm），暴露在碘蒸氣中2 h后進(jìn)行紫外檢測；每次檢測中溶液1的任何雜質(zhì)斑點不應(yīng)深于溶液2，也不應(yīng)深于溶液3。

2.2.4 HPLC法鑒別 取本品10mg，用甲醇溶解并配置成40μg/ml的溶液，進(jìn)樣并記錄色譜圖，與MPH標(biāo)準(zhǔn)品的圖譜比較，主峰保留時間一致，見圖1。

圖1 鹽酸美普他酚色譜圖（A.鹽酸美普他酚對照品；B.供試品；1.鹽酸美普他酚；2.輔料）Fig.1 HPLC Chromatogram of Meptazinol hydrochloride(A.Reference substance of Meptazinol hydrochloride;B.Sample;1.Meptazinol hydrochloride;2.Accessories)

2.3 檢查

2.3.1 片重差異檢查 取MPH片劑20片，精密稱定總重量，求得平均片重后，再分別精密稱定各片的重量。每片重量與平均重量相比較，超出重量差異限度的藥片為1片。

2.3.2 硬度與脆碎度檢查 將本品置于78X-2型片劑四用測定儀中，測得其可承受3～5 N的壓力；又經(jīng)脆碎測定得其脆碎度小于0.7%。

2.3.3 溶出度檢查 取本品，照《中國藥典》2005年版二部附錄ⅩC溶出度測定法第一法，以0.1 mol/L鹽酸900 ml為溶劑，溫度（37.0±0.5）℃，轉(zhuǎn)速 100 r/min，依法操作，結(jié)果見圖 2。分別設(shè)定 5、10、20、30、45、60 min， 定時取樣 10 ml， 同時補(bǔ)液10 ml，濾過，精密吸取 5 ml，置 10 ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取MPH對照品5 mg，精密稱定，置50 ml量瓶中，加0.1 mol/L鹽酸稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液；取上述供試品及對照品溶液照《中國藥典》2005年版二部附錄Ⅳ分光光度法，在275 nm的波長處分別測定吸收度，計算三批MPH片不同時間的累計溶出量，結(jié)果見表1。另以脫氣蒸餾水和0.1 mol/L鹽酸為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速100 r/min，分別取 6 片，投入到 6 個容器中，分別于 1、2、4、8、12、24 h 取樣10 ml濾過，并及時補(bǔ)充相同溫度、體積的溶出介質(zhì)，照HPLC法測定，得溶出曲線，結(jié)果見表2和圖3。根據(jù)溶出曲線，本品在45 min取樣檢測，計算每片溶出量。限度按《中國藥典》2005年版二部附錄ⅩC溶出度測定法要求為標(biāo)示量的70%，符合規(guī)定。

圖2 溶出度曲線Fig.2 Dissolution profiles

表1 三批樣品的累積溶出率（%）Tab.1 Cumulative dissolution rate in three tables of Meptazinol hydrochloride（%）

2.3.4 有關(guān)物質(zhì)的檢查 精密稱取本品10 mg加入10 ml水中，用移液管吸取1 ml和0.1 ml分別至10 ml量瓶中，用甲醇稀釋定容，分別作為供試品溶液和對照品溶液，照含量測定下的色譜條件，精密量取對照品溶液20μl注入高效液相色譜儀，調(diào)整儀器靈敏度，使主成分峰高為記錄儀滿刻度的20%～25%。再精密取供試品溶液20 μl注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2倍，制成樣品。供試品溶液顯示的雜質(zhì)峰面積均不大于其對照品溶液的主峰面積。

表2 溶出曲線數(shù)據(jù)Tab.2 Dates of dissolution profiles

圖3 溶出標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.3 Standard dissolution profiles

2.4 含量測定

2.4.1 檢測波長的確定 將0.01%（w/v）的本品溶液溶于乙醇中，并在190～400 nm范圍內(nèi)進(jìn)行檢測，在275 nm處有最大吸收，吸收度為0.8。

2.4.2 線性關(guān)系考察 取MPH對照品10 mg，精密稱定，置50 ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度作為貯備液。精密量取該貯備液 0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 和 5.0 ml，分別置于 10 ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。精密量取上述溶液20 μl分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以濃度（C）為橫坐標(biāo)，峰面積（A）為縱坐標(biāo)作線性回歸。結(jié)果為：A=0.1376C+0.0841（r=0.9998）。

2.4.3 精密度試驗 取 40 μg/ml MPH對照品液 20 μl在 0、1、2、4、8、12、24 h 進(jìn)樣，以峰面積為指標(biāo)考察日內(nèi)精密度，結(jié)果RSD 為 0.68%（n=7）。取 60 μg/ml樣品每日進(jìn)樣 1次，連續(xù)測定5 d，考察日間精密度及樣品液的穩(wěn)定性，峰面積的RSD為 0.75%（n=5）。

2.4.4 回收率試驗 按處方量取輔料適量，分別加入處方量80%、100%、120%的鹽酸美普他酚對照品，用流動相稀釋至20、40、60 μg/ml線性范圍內(nèi)高，中，低 3 種濃度的供試液各 3份，按含量測定方法測定并計算加樣回收率，結(jié)果回收率分別為99.36%、99.54%、98.99%，RSD分別為0.38%、0.35%、0.46%。2.4.5含量測定結(jié)果 對3批MPH片劑分別進(jìn)行含量測定和有關(guān)物質(zhì)檢查，并與《英國藥典》2000年版的測定結(jié)果比較，結(jié)果見表3。

表3 樣品含量及有關(guān)物質(zhì)測定結(jié)果Tab.3 Results of the content of meptazinol hydrochloride

3 討論

本實驗曾考察了電位法和HPLC法測定含量，兩法在用于測定MPH含量過程中，均有良好的表現(xiàn)，尤其HPLC法，而且HPLC法的普及率較高，實驗型較強(qiáng)，故最終選用HPLC法作為實驗方法。

本實驗對MPH的性狀、鑒別、檢查進(jìn)行了研究，確立了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。通過多方面比較，建立了HPLC法對MPH及其片劑進(jìn)行檢測。

實驗室制劑進(jìn)行了系統(tǒng)的質(zhì)量分析，各批實驗室制劑的外觀、片重差異、硬度和脆碎度、溶出度均令人滿意，在此基礎(chǔ)上，全面系統(tǒng)地制訂了MPH片劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

[1]湯光.實用內(nèi)科藥物手冊[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2001:191.

[2]British Pharmacopoeia Commission.British Pharmacopoeia [M].VolⅡ.London:The Stationery Office，2000:2083.

[3]劉亞妮,易以木,張耕.反相高效液相色譜法測定鹽酸美普他酚片含量及有關(guān)物質(zhì)[J].醫(yī)藥導(dǎo)報,2006,25(7):706-707.

[4]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[S].二部.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2000:附錄 16-24.

[5]宋麗,廖洪利,謝靜,等.色譜法檢測藥物雜質(zhì)的研究進(jìn)展[J].西南軍醫(yī),2007,9(5):79-80,82.