免疫法與化學(xué)法檢測糞便隱血試驗的對比分析

林智杰

糞便隱血試驗是臨床診斷和監(jiān)測消化道出血性疾病的一項重要常規(guī)檢查項目，其方法主要有兩類：一類是傳統(tǒng)的化學(xué)法，另一類是免疫法?；瘜W(xué)法檢測類隱血試驗簡單、方便，但干攏因素多，易受飲食（肉類、蔬菜、藥物、鐵劑等）的影響，靈敏度和特異性較低，常出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。免疫法檢測糞便隱血試驗不受飲食的限制，而且快速、簡單、準(zhǔn)確，靈敏度和特異性較高。本文對200例糞便隱血用免疫法和化學(xué)法檢測進(jìn)行比較。

1 材料來源

1.1 標(biāo)本來源

本鋼總醫(yī)院門診和住院患者隨機(jī)檢測糞便隱血200例。

1.2 試劑

BASO免疫法試劑，由（臺資）珠海貝索生物技術(shù)有限公司提供。②鄰甲苯胺法，試劑由本鋼總醫(yī)院檢驗科按全國臨床檢驗操作規(guī)程自行配制。

2 結(jié) 果

見表1。

表1 BASO免疫法與鄰甲苯胺檢測糞便隱血實驗結(jié)果

3 討 論

3.1 化學(xué)法鄰甲苯胺檢測糞便隱血試驗的原理是基于血紅蛋白中的含鐵血紅素部分有催化試劑中過氧化氫，分解釋放新生態(tài)氧，氧化試劑中的色原物質(zhì)而顯色，根據(jù)顏色的深淺反映血紅蛋白的含量。從表1中看出，鄰甲苯胺法檢測糞便隱血陽性78例，陽性率為39%，與有關(guān)報道相近[1]。由于鄰甲苯胺法測定糞便隱血試驗不僅對人體血紅蛋白產(chǎn)生陽性反應(yīng)，飲食動物中含有血紅蛋白、肌紅蛋白，植物中具有活性過氧化物酶，服用鐵劑等也致試驗產(chǎn)生較高假陽性結(jié)果。同時，服用大量維生素C或其它具有還原作用的藥物時致試驗產(chǎn)生假陰性結(jié)果。因此，鄰甲苯胺法檢測糞便隱血需要飲食限制。

3.2 免疫法是利用抗人血紅蛋白抗體或抗人紅細(xì)胞基質(zhì)抗體，只能特異地結(jié)合人血紅蛋白抗原。不受飲食（肉類、蔬菜、藥物、鐵劑等）因素影響。因此，免疫法檢測糞便隱血試驗特異性高，假陽性率低。這正是它與鄰甲苯胺化學(xué)法相比陽性率低的主要原因。從表中看出，免疫法檢測糞便隱血陽性為35例，陽性率為17.5%。與有關(guān)報道相近[1]，其中有8例在臨床上診斷為上消化道出血的糞便顏色為柏油樣外觀，免疫法開始檢測的結(jié)果為陰性，而鄰甲苯胺法檢測的結(jié)果為陽性，將原稀釋標(biāo)本再稀釋50～100倍后用免疫法重新檢測，則8例試驗才為陽性結(jié)果。為什么這8例標(biāo)本在稀釋前后用免疫法檢測結(jié)果不一樣呢？因為，當(dāng)抗原與抗體反應(yīng)時，二者分子比例合適時才出現(xiàn)陽性反應(yīng)，如果抗原過剩時則無沉淀發(fā)生，即產(chǎn)生后滯現(xiàn)象[2]。由于上消化道大量出血時，致反應(yīng)體系中血紅蛋白抗原過剩出現(xiàn)后滯現(xiàn)象，故試驗無沉淀發(fā)生產(chǎn)生陰性結(jié)果，而當(dāng)原稀釋標(biāo)本再稀釋50～100倍后就降低了血紅蛋白抗原量，此時與抗體量比例合適，試驗則出現(xiàn)陽性結(jié)果。因此，遇有外觀為柏油樣便，而免疫法陰性或弱陽性，此時需將原已稀釋的糞便標(biāo)本再稀釋50～100倍后重做或用化學(xué)法復(fù)檢。以進(jìn)一步判斷結(jié)果。

3.3 在表1中，免疫法（-）、鄰甲苯胺（+）的48例中有4例同上述8例所述情況相同，但其用免疫法重新檢測結(jié)果為陰性。另外還有5例臨床上診斷為上消化道出血，糞便顏色基本為正常黃褐色，而出現(xiàn)免疫法（-）、鄰甲苯胺（+）。為什么會現(xiàn)這兩種情況呢？可能原因[2]有：①血紅蛋白或紅細(xì)胞經(jīng)過消化酶降解或消化殆盡已不具有原來的免疫原性；②患者血紅蛋白的抗原與單克隆抗體不相匹配。因此免疫法試驗為陰性。后者還因為糞便顏色基本黃褐色疑為上消化道少量出血，此時少量血中的紅細(xì)胞往往會被胃酸或胃液中的酵素分解成血基質(zhì)（Heme）而以血基質(zhì)狀態(tài)存在于糞便中。免疫法只對血紅蛋白具有特異性，對血基質(zhì)則沒有，故單獨做免疫法可能產(chǎn)生漏檢或產(chǎn)生假陰性。在表1中，免疫法（+）、鄰甲苯胺（-）5例結(jié)果出現(xiàn)則可能是化學(xué)法靈敏度較低（20μg/mL血紅蛋白），而免疫法靈敏度較高（0.1μg/mL血紅蛋白），消化道出血量只能免疫法可以檢測得出陽性結(jié)果量。

綜上所述，化學(xué)法檢測糞便隱血簡單、方便，而且有半定量的特點，易于對出血程度的判斷。由于患者往往無法在采集糞便前3天進(jìn)行飲食的限制，而化學(xué)法易受飲食的影響而致較高假陽性，因此單獨只用化學(xué)法檢測糞便隱血易增加醫(yī)生對糞便隱血試驗結(jié)果是否陽性或陰性的判斷。免疫法檢測糞便隱血具有快速、準(zhǔn)確、靈敏度和特異性高的特點，且不受飲食的影響，但對于上消化道大量出致糞便為柏油樣便時，有部分為假陰性結(jié)果。在上消化道少量出血時有可能會產(chǎn)生漏檢現(xiàn)象。因此，本文認(rèn)為，對于糞便隱血檢測，最好用免疫法和化學(xué)法同時進(jìn)行，以便做出較準(zhǔn)確的判斷。

[1]韋常麗.糞便潛血單克隆抗體法臨床應(yīng)用的探討[J].廣西中醫(yī)報,2003,6(4):56-57.

[2]寇麗筠.臨床基礎(chǔ)檢驗學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1999:144.