金絲草鑒別方法研究

李韶英，許 智

(廣東省茂名市藥品檢驗(yàn)所，廣東 茂名 525000)

金絲草為外感平安茶(WS3－B－27941526－93)成藥組方藥材之一，多數(shù)文獻(xiàn)只有性狀描述[1－3]，且現(xiàn)有的國家標(biāo)準(zhǔn)和地方藥材標(biāo)準(zhǔn)中均沒有收載該品種。因此，筆者采用顯微觀察及薄層色譜(TLC)法對金絲草藥材的鑒別方法進(jìn)行了研究，報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

CH30型生物顯微鏡(日本奧林巴斯);YH140－1型電熱恒溫水浴鍋(北京東方紅儀器有限公司)。硅膠G(青島海洋化工廠，批號為060316);自制板規(guī)格為10 cm×20 cm，厚0.3 mm;預(yù)制板(青島海洋化工廠分廠，規(guī)格為 10 cm×20 cm，厚 0.20～0.25 mm)。10 批金絲草藥材(產(chǎn)地分別為廣東、廣西、云南)由廣州王老吉藥業(yè)股份有限公司提供，均經(jīng)中國科學(xué)院華南植物研究所葉華谷研究員鑒定。其他所用試劑均為分析純。本試驗(yàn)采用樣品自身作為對照。

2 方法與結(jié)果

2.1 顯微鑒別

本品為黃褐色粉末。氣孔裂縫狀，保衛(wèi)細(xì)胞啞鈴形，副衛(wèi)細(xì)胞半圓形，氣孔平行式。非腺毛大多為單細(xì)胞，先端急尖，底部鈍圓，短小如“逗號”狀。導(dǎo)管主為螺紋導(dǎo)管、網(wǎng)紋導(dǎo)管和梯紋導(dǎo)管，直徑7～44μm。莖纖維梭形或段狀，壁較薄，紋孔斜點(diǎn)狀，孔溝明顯而疏。莖厚壁細(xì)胞類長方形，邊緣稍彎曲，壁較厚，紋孔斜點(diǎn)狀，孔溝細(xì)密。根被細(xì)胞梭形，兩端稍彎曲如蟲，壁薄，排列緊密。根薄壁細(xì)胞類多角形。見圖1。

圖1 金絲草顯微鑒別圖(×400)

2.2 薄層色譜(TLC)鑒別

2.2.1 方法

取本品粉末1 g，加甲醇10 mL，加熱回流20 min，濾過，濾液作為供試品溶液。另取金絲草對照藥材粉末 1 g，加甲醇 10 mL，加熱回流20 min，濾過，濾液作為對照藥材溶液。照TLC法[2005年版《中國藥典(一部)》附錄ⅥB]試驗(yàn)，吸取上述2種溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷－甲酸乙酯(5∶3)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)(圖2)。

2.2.2 方法學(xué)驗(yàn)證

專屬性考察:吸取供試品溶液、對照藥材溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，按擬訂的方法試驗(yàn)。結(jié)果色譜圖中各斑點(diǎn)分離效果比較好。

耐用性考察:取手鋪硅膠G薄層板與預(yù)制硅膠G薄層板，分別按擬訂的方法試驗(yàn)，結(jié)果手鋪硅膠G薄層板與預(yù)制硅膠G薄層板分離效果基本一致。取點(diǎn)樣后的薄層板，分別在4℃和30℃中展開，顯色，檢視，結(jié)果表明在4～30℃范圍內(nèi)試驗(yàn)對鑒別無明顯的影響。取點(diǎn)樣后的薄層板，分別在用硫酸調(diào)節(jié)相對濕度32%和75%的層析缸中展開，顯色，檢視，結(jié)果表明在相對濕度32%～75%之間試驗(yàn)對鑒別無明顯的影響。上述方法學(xué)驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果表明，薄層板方面手鋪板分離效果與預(yù)制板一致，而溫濕度變化對展開效果影響不大，因此認(rèn)為本法的耐用性良好。

圖2 金絲草薄層色譜圖

3 討論

經(jīng)過反復(fù)試驗(yàn)，共觀察了10批次金絲草樣品，發(fā)現(xiàn)有10個顯微特征，包括氣孔、非腺毛、導(dǎo)管、莖纖維、莖厚壁細(xì)胞、根被細(xì)胞碎片、根薄壁細(xì)胞、根纖維、莖內(nèi)皮層細(xì)胞和木化薄壁細(xì)胞，因后者出現(xiàn)的幾率極少或特征專屬性不強(qiáng)，考慮到由此可能給檢驗(yàn)工作造成困難，故決定取前述7個為主要特征。

根據(jù)《廣東中藥志(第一卷)》“金絲草”藥材成分[3]描述，本品含有黃酮苷、酚類、氨基酸、有機(jī)酸和糖類，而化橘紅也含有黃酮類成分，故參考2005年版《中國藥典(一部)》“化橘紅”的TLC鑒別項(xiàng)下的方法[4]。但用該方法所用的展開劑展開效果不理想，改用環(huán)己烷－甲酸乙酯(5∶3)為展開劑，獲得了理想的薄層色譜條件，結(jié)果 R f適宜，斑點(diǎn)清晰，分離效果好，不同的溫度和濕度對鑒別無明顯影響。

[1]江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典(上冊)[M].上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社，1986:1387.

[2]《全國中草藥匯編》編寫組.全國中草藥匯編(上冊)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，1986:531.

[3]《廣東中藥志》編輯委員會.廣東中藥志(第二卷)[M].廣州:廣東科學(xué)技術(shù)出版社，1994:139.

[4]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:51.