中成藥和保健品中非法添加減肥類化學物質(zhì)的快檢

毛 慶，張小松

(重慶市藥品檢驗所，重慶 401121)

近年來，大量減肥類產(chǎn)品充斥我國中成藥、保健品市場，一些不法個人、廠商唯利是圖，為獲得明顯的療效，在藥品和保健品中非法添加茶堿、鹽酸麻黃堿、咖啡因、鹽酸芬氟拉明、酚酞、鹽酸西布曲明等減肥類化學物質(zhì)[1]。為及時有效地打擊這種非法行為，筆者利用最新的核－殼填料技術(shù)建立了適用于《國家食品藥品監(jiān)督管理局藥品檢驗補充檢驗方法和檢驗項目批準件》(No.2006004)中關(guān)于治療肥胖癥的中成藥非法添加減肥類化學物質(zhì)的快速檢測模式。

1 儀器與試藥

安捷倫1100型液相色譜儀。茶堿、鹽酸麻黃堿、咖啡因、鹽酸芬氟拉明、酚酞、鹽酸西布曲明對照品(批號分別為100121－199903，171241－200102，171215－200305，10073－0002，0091－9601，100624－200401，中國藥品生物制品檢定所);甲醇、乙腈(色譜純)，水(超純水)，甲酸銨、甲酸(分析純);減肥產(chǎn)品(市場抽樣品)。

2 方法與結(jié)果

2.1 分析條件

色譜柱:KinetexTMC18柱(100 mm ×2.10 mm，2.6μm);流動相:0.02 mol/L甲酸銨(用甲酸調(diào)節(jié)pH至3.50)緩沖液為組分A、乙腈為組分B、甲醇為組分C，起始比例為 A∶B∶C=86∶7∶7，4 min變化到 A ∶B ∶C=40 ∶35∶35，并保持到 20 min;流速:0.20 mL/min;柱溫:35℃ ;檢測波長:220 nm。

2.2 溶液制備

取膠囊內(nèi)容物約1粒量，取研細的片劑細粉約1片量，取茶包內(nèi)容物約1包量，分別置具塞試管中，加70%的甲醇溶液25 mL，密塞，振搖、超聲處理 5 min，靜置，用 0.22μm 濾頭過濾，取續(xù)濾液，用初始流動相稀釋10倍作為供試品溶液。分別取鹽酸西布曲明、鹽酸芬氟拉明、酚酞、鹽酸麻黃堿、茶堿、咖啡因?qū)φ掌愤m量，用初始流動相溶解并稀釋成分別約含50 μg/mL的混合溶液，作為對照品溶液。

2.3 測定法及分析

分別進樣 10 μL，記錄色譜圖(圖1)。在20 min內(nèi)，能夠快速確認樣品紫外色譜圖上的3種可疑減肥物質(zhì)，即咖啡因、鹽酸芬氟拉明、鹽酸西布曲明;利用安捷倫1100自動進樣器的進樣程序，對疑似峰用對應的對照品溶液自動加樣后進樣，用二極管陣列檢測器對加樣后疑似色譜峰進行峰純度檢測，并經(jīng)同一液相條件下液質(zhì)聯(lián)用儀一級和二級質(zhì)譜定性確認結(jié)果(圖2)。

圖1 混合對照品色譜圖

圖2 抽檢樣品色譜圖

3 討論

國家食品藥品監(jiān)督管理局規(guī)定:對涉嫌非法添加化學藥品的治療肥胖癥的中成藥進行檢查，【鑒別】用液相色譜保留時間及該色譜峰的一級、二級質(zhì)譜圖與對照品一致來確認;【含量測定】按照2005年版《中國藥典(二部)》附錄ⅤD高效液相色譜法測定。但實際工作中參照此方法監(jiān)管市場需要花大量時間來摸索方法，致使打假工作效率不高。非法添加減肥類化學物質(zhì)的目的是能夠產(chǎn)生好的減肥療效，非法添加的量一定是常量或超量，因而常規(guī)高效液相色譜法就能滿足對非法添加的減肥類化學物質(zhì)的分離、初步定性、定量;為了確保定性的準確，用色譜峰(前提還是要有效分離)的一級、二級質(zhì)譜圖與對照品一致來確認。但是常規(guī)高效液相色譜和液質(zhì)聯(lián)用間存在一個很大的問題，兩者的流動相組成、流速等不能通用，需要摸索兩套不同的色譜條件。利用超高壓液相色譜(UPLC)法在質(zhì)譜要求的0.2 mL/min流速下可以對樣品進行良好分離，但是UPLC太昂貴，藥檢所配置較少;5μm填料、4.6 mm內(nèi)徑的色譜柱的常規(guī)流速約為1 mL/min，在柱后用三通分流進質(zhì)譜檢測器，色譜峰的擴散太大。

我所利用美國菲羅門公司新近研發(fā)KinetexTM2.6μm填料、2.1 mm內(nèi)徑的核－殼技術(shù)色譜柱，在常規(guī)安捷倫1100型高效液相色譜儀上實現(xiàn)了UPLC法的性能，在以甲酸銨緩沖鹽為流動相、流速為0.2 mL/min的條件下使多個減肥類化合物良好分離，同時提高了檢測靈敏度，減少了溶劑的消耗。

筆者認為，建立一種流速(0.2 mL/min左右)適用于常規(guī)液相色譜儀、流動相為質(zhì)譜適用的揮發(fā)性緩沖鹽、各目標化合物完全分離且峰形良好的色譜方法是當前打假工作的當務(wù)之急。這樣就能真正讓常規(guī)液相和質(zhì)譜聯(lián)用成為現(xiàn)實，實現(xiàn)補充檢驗方法中的【鑒別】和【含量測定】方法的液相條件統(tǒng)一，減少非標方法摸索中的繁瑣和不確定性，本快檢模式能使樣品的粗篩工作盡量簡化，提高工作的目標性和準確性。

[1]譚小秋，高燕紅.高效液相色譜法測定減肥食品中的鹽酸芬氟拉明含量[J].中華預防醫(yī)學雜志，2001，35(2):124－125.