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    30%蒼耳素EC對兩種蔬菜病害的藥效評價試驗

    2010-07-09 13:00:10丁德芳楊順義符海波沈慧敏
    湖南農(nóng)業(yè)科學(xué) 2010年11期
    關(guān)鍵詞:海因黑星蒼耳

    丁德芳,楊順義,符海波,沈慧敏

    (甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)草業(yè)學(xué)院草業(yè)生態(tài)系統(tǒng)教育部重點實驗室中-美草地畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展研究中心,甘肅 蘭州 730070)

    番茄灰霉?。˙otrytis cinereaPers.)和黃瓜黑星病(Cladosporium cucumerinumEll.)是日光溫室蔬菜的常發(fā)性病害,隨著規(guī)模蔬菜產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展,二者已成為蔬菜生產(chǎn)中的主要病害,嚴(yán)重影響了蔬菜產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。生產(chǎn)上主要使用化學(xué)殺菌劑對其進(jìn)行防治,化學(xué)農(nóng)藥的長期使用,不但增強了病原菌的抗藥性,而且?guī)砹宿r(nóng)藥高殘留和環(huán)境污染等一系列問題。因此,使用低毒、低殘留、無公害的藥劑來替代化學(xué)藥劑,是綠色蔬菜生產(chǎn)的迫切要求。植物源農(nóng)藥以其低殘留、低毒或無毒、不易產(chǎn)生抗藥性以及易與其他藥劑混配等特點受到人們的青睞[1]。

    甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)草業(yè)學(xué)院農(nóng)藥系研制的30%蒼耳素EC是以蒼耳有效抑菌成分—蒼耳素為原料開發(fā)出的植物源殺菌劑,該藥劑對蔬菜常見病害具有較高的抑菌作用[2-3]。為了明確30%蒼耳素EC對蔬菜病害的防治效果,筆者以番茄灰霉病、黃瓜黑星病為供試菌,進(jìn)行了藥效評價試驗,旨在為該藥劑的大面積使用提供科學(xué)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 供試藥劑

    30%蒼耳素EC,甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)藥系加工;50%撲海因WP,連云港市德倫農(nóng)藥有限公司生產(chǎn)。

    1.2 供試病菌

    番茄灰霉病菌(Botrytis cinereaPers.),黃瓜黑星病菌(Cladosporium cucumerinumEll.),由甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)藥實驗室提供。

    1.3 30%蒼耳素EC對供試病菌的藥效評價方法

    1.3.1 30%蒼耳素乳油的加工 30%蒼耳素EC由蒼耳提取液、溶劑、助溶劑、紫外保護(hù)劑、乳化劑按一定比例加工配制而成。

    1.3.2 室內(nèi)毒力測定[4]采用含毒介質(zhì)培養(yǎng)法測定乳油的抑菌效果。在培養(yǎng)好的番茄灰霉病菌和黃瓜黑星病菌菌落邊緣用內(nèi)徑6 mm的打孔器打取菌餅,置于含系列藥劑質(zhì)量濃度的PDA平板上(見表1),每處理重復(fù)3次,以加無菌水的培養(yǎng)基為空白對照。然后,將其放入25℃恒溫箱中培養(yǎng)3 d,用十字交叉法定期測量菌落直徑。計算病菌生長抑制率和 EC50。抑制率的計算見公式(1)、(2)。

    1.3.3 離體組織測定 參考李樹正[5]方法并有所修改,用黃瓜子葉測定供試藥液對供試菌的藥效,敘述如下。(1)菌種制備。將供試菌接種于PDA培養(yǎng)基中部,在(23±1)℃條件下培養(yǎng) 4 d 后備用;(2)子葉制備。供試黃瓜品種為“津研5號”,培育子葉期黃瓜幼苗,待子葉充分展開后摘取生長一致的子葉,將脫脂棉浸水后包裹葉柄,然后置于90 mm培養(yǎng)皿中(培養(yǎng)皿底部墊有浸水海綿,上覆一層濾紙)備用;(3)處理及對照設(shè)置。每處理一片子葉,重復(fù)3次,以50%撲海因WP 1 000倍為藥劑對照,清水為空白對照;(4)保護(hù)作用。采用浸漬法(將子葉于藥液內(nèi)浸2~3 min)進(jìn)行處理,藥液蔭干后用打孔器在菌落外緣打取菌餅(Φ=6.0 mm)并置于子葉中心部,在人工氣候箱中(溫度為(23±1)℃,光照 13 h、黑暗 11 h交替)培養(yǎng)至空白對照充分發(fā)病后測量病斑直徑;(5)治療作用。子葉接種供試菌后,在人工氣候箱中培養(yǎng)至初見病斑時,采用浸漬法進(jìn)行處理,其它方法同保護(hù)作用。防治效果的計算見公式(3)。

    1.4 田間藥效試驗

    1.4.1 試驗方法 依30%蒼耳素EC濃度的不同,試驗設(shè) 834、1 070、1 500、2 550、7 500 mL/hm2共 5個處理,以50%撲海因WP 750 g/hm2為對照藥劑,以清水為對照(CK),小區(qū)面積15 m2,各小區(qū)間設(shè)有保護(hù)行,每處理4次重復(fù),共計28個小區(qū),小區(qū)采用隨機(jī)區(qū)組排列。

    黃瓜黑星病第1次施藥時間為2009年5月10日,第2次施藥時間為5月17日;番茄灰霉病第1次施藥時間2009年6月1日,第2次施藥時間為6月8日。選用奧晟WFB-18AC型背負(fù)式噴霧機(jī)按750 kg/hm2的藥液量噴于葉片正、背面均勻噴霧。

    1.4.2 調(diào)查時間與方法[6-7]每小區(qū)5點取樣,每點確定2株進(jìn)行標(biāo)記,每株上、中、下部各取5片葉。根據(jù)每個小區(qū)番茄葉片灰霉病和黃瓜黑星病的發(fā)生情況,以每片葉上的病斑面積占整個葉面積的百分率進(jìn)行分級,調(diào)查病葉級數(shù)并觀察藥劑對作物的直接影響。按分級標(biāo)準(zhǔn)記載并計算病情指數(shù)及防治效果,見公式(4)、(5)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 30%蒼耳素乳油對供試病菌的室內(nèi)毒力測定結(jié)果

    30%蒼耳素乳油對供試病菌的室內(nèi)毒力測定結(jié)果見表1。結(jié)果表明:30%蒼耳素EC對番茄灰霉病菌和黃瓜黑星病菌都有較高的抑菌作用。在供試濃度為3 mg/mL時,對番茄灰霉病菌和黃瓜黑星病菌的抑制率分別達(dá)到81.77%、82.34%,抑菌毒力EC50值分別為0.471 8、0.958 6 mg/mL。對照藥劑50%撲海因WP 0.5 mg/mL對番茄灰霉病菌和黃瓜黑星病菌的抑制率分別達(dá)到97.24%、98.94%。30%蒼耳素EC對番茄灰霉病菌和黃瓜黑星病菌的抑制率略低于50%撲海因WP。

    表1 30%蒼耳素乳油對供試病菌的抑菌作用

    2.2 離體組織測定

    2.2.1 30%蒼耳素乳油對番茄灰霉病的保護(hù)作用和治療作用測定結(jié)果 如表2所示,在保護(hù)作用和治療作用下,供試藥劑對番茄灰霉病的防效隨濃度的提高而遞增,呈現(xiàn)明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系。對照藥劑50%撲海因WP在0.5 mg/mL濃度下,處理48 h后對番茄灰霉病的保護(hù)作用和治療作用的防效分別為45.52%、48.53%。與對照藥劑相比,30%蒼耳素EC 1 mg/mL的處理對番茄灰霉病的保護(hù)作用未表現(xiàn)出顯著性差異,而治療作用顯著低于對照藥劑;30%蒼耳素EC 3 mg/mL的處理對番茄灰霉病的保護(hù)作用顯著高于對照藥劑,而治療作用未表現(xiàn)出顯著性差異。

    表2 30%蒼耳素乳油對番茄灰霉病的室內(nèi)毒力測定結(jié)果(黃瓜子葉法)

    2.2.2 30%蒼耳素EC對黃瓜黑星病保護(hù)作用和治療作用測定結(jié)果 如表3所示,30%蒼耳素EC對黃瓜黑星病均有一定的保護(hù)作用和治療作用。在保護(hù)作用和治療作用下,供試藥劑對黃瓜黑星病的防效隨濃度的提高而遞增,呈現(xiàn)明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系。對照藥劑50%撲海因WP在0.5 mg/mL濃度下,處理48 h后對黃瓜黑星病的保護(hù)作用和治療作用的防效分別為40.21%、43.44%。30%蒼耳素EC 3 mg/mL的處理,對黃瓜黑星病的保護(hù)作用顯著高于對照藥劑,而治療作用極顯著低于對照藥劑。

    表3 30%蒼耳素乳油對黃瓜黑星病的室內(nèi)毒力測定結(jié)果(黃瓜子葉法)

    2.3 田間藥效試驗

    2.3.1 30%蒼耳素乳油對番茄灰霉病的田間防效由表4結(jié)果顯示,30%蒼耳素EC在藥劑用量為834~7 500 mL/hm2,第 1 次和第 2 次施藥 7 d 后,對番茄灰霉病的防效分別為25.91%~62.60%和27.12%~67.76%,第2次施藥14 d后,對番茄灰霉病的防效略有升高,為28.93%~72.03%。這表明蒼耳素前期藥效緩慢,速效性一般,持效佳。對照藥劑50%撲海因WP在藥劑用量為 750 g/hm2時,第2次施藥14 d后,對番茄灰霉病防效為64.17%。30%蒼耳素EC 7 500 mL/hm2的防治效果高于對照藥劑的同期防效。從總體來看,30%蒼耳素EC各藥劑處理對番茄灰霉病的防效明顯,14 d后仍有防效,且防效高于前期,表現(xiàn)出很好的持效性。

    2.3.2 30%蒼耳素乳油對黃瓜黑星病的田間防效

    由表5可知,30%蒼耳素EC在藥劑用量為834~7 500 mL/hm2時,第1次和第2次施藥7 d后,對黃瓜黑星病的防效分別為24.18%~53.82%和25.50%~56.88%,14 d后,對黃瓜黑星病的防效略有升高,為28.84%~60.12%。這表明蒼耳素前期藥效緩慢,速效性一般,持效佳。對照藥劑50%撲海因WP 750 g/hm2,第2次施藥7 d和14 d后,對黃瓜黑星病防效分別為62.92%和62.07%。30%蒼耳素EC 7 500 mL/hm2施藥14 d后對黃瓜黑星病的防效與對照藥劑50%撲海因WP無顯著差異,表現(xiàn)出良好的持效性。

    表4 30%蒼耳素乳油對防治番茄灰霉病田間防效

    表5 30%蒼耳素乳油對防治黃瓜黑星病田間防效

    3 結(jié)論與討論

    30%蒼耳素EC是從植物蒼耳中提取出來的殺菌活性成分,是一種植物源殺菌劑,具有保護(hù)和治療雙重作用。30%蒼耳素EC對番茄灰霉病菌和黃瓜黑星病菌具有一定的抑菌毒力(EC50分別為0.471 8、0.958 6 mg/mL),也有一定的保護(hù)作用和治療作用,且保護(hù)作用優(yōu)于治療作用。田間藥效試驗表明:第2次施藥14 d后,30%蒼耳素EC 7 500 mL/hm2對兩種病害的田間防效分別為72.03%和60.12%,對番茄灰霉病的防效顯著高于對照藥劑50%撲海因WP常用劑量的防效,對黃瓜黑星病的防效與對照藥劑50%撲海因WP無顯著差異。這表明30%蒼耳素EC對兩種病害有良好的防效,速效性一般,持效性好,14 d后仍有防效。

    室內(nèi)毒力測定結(jié)果與田間實際防效存在一定差異,其原因可能是田間防效受作物、病菌、環(huán)境條件等多種因素影響。30%蒼耳素EC田間防治蔬菜病害具有良好的效果,對試驗作物無任何不良影響,可在生產(chǎn)中使用。最佳施藥時期是在發(fā)病前或初見病斑時,施藥越早,防病效果越好。在生產(chǎn)上,施用30%蒼耳素EC 2 550~7 500 mL/hm2,7 d左右噴灑1次,連續(xù)施藥2~3次,可達(dá)到理想的防治效果。

    [1]段曉明,尹 衛(wèi).植物源農(nóng)藥的研究進(jìn)展[J].青海大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2006,24(5):56-59.

    [2]王興全,張新虎,楊順義.蒼耳提取物對番茄灰霉病菌抑制機(jī)理的研究[J].甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2008,43(3):107-110.

    [3]楊順義,郭東艷,沈慧敏,等.蒼耳等14種植物對植物病原菌的抑菌活性[J].植物保護(hù),2006,32(3):68-71.

    [4]劉愛群.番茄早疫病菌的室內(nèi)藥劑篩選 [J].遼寧農(nóng)業(yè)科學(xué),2004,(1):41.

    [5]李樹正.黃瓜子葉法篩選蔬菜灰霉病殺菌劑的研究[J].華北農(nóng)學(xué)報,1991,6(3):94-99.

    [6]農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所生測室.農(nóng)藥田間藥效試驗準(zhǔn)則(一)[M].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,1993.

    [7]王立君,陳 國,楊 挺,等.幾種殺菌劑防治番茄灰霉病試驗[J].浙江農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,(1):162-163.

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