王剛,韓信昌(.長(zhǎng)春金融高等專(zhuān)科學(xué)校校醫(yī)院,吉林長(zhǎng)春300;.吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院中藥所,吉林長(zhǎng)春300)
洋參次苷膠囊對(duì)小鼠免疫功能的影響
王剛1,韓信昌2
(1.長(zhǎng)春金融高等專(zhuān)科學(xué)校校醫(yī)院,吉林長(zhǎng)春130022;2.吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院中藥所,吉林長(zhǎng)春130021)
洋參次苷膠囊;免疫功能;小鼠;實(shí)驗(yàn)研究
洋參次苷膠囊為純中藥有效部位制劑,系沈陽(yáng)毅隆制藥有限公司藥物研究所研制,經(jīng)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,該膠囊有明顯的增強(qiáng)機(jī)體體液免疫和細(xì)胞免疫功能。
1.1 材料與方法受試藥物:洋參次苷膠囊,由沈陽(yáng)毅隆制藥有限公司藥物研究所提供,批號(hào):000506,標(biāo)示量:0.25 g/膠囊,生藥量:26.8 g生藥/g藥粉。動(dòng)物:昆明種小白鼠,動(dòng)物合格證編號(hào):10-1023;C57BL/6純系小鼠,動(dòng)物合格證編號(hào):10-1025。由吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室提供,體重18~22 g,雌雄兼用。Alsever溶液(保存綿羊紅細(xì)胞用):葡萄糖20.5 g,檸檬酸鈉0.80 g,氯化鈉0.42 g,蒸餾水100 mL,G6漏斗無(wú)菌過(guò)濾。豚鼠血清用生理鹽水1∶10稀釋進(jìn)行試驗(yàn)用,原血清-20℃保存?zhèn)溆?。都氏試劑(測(cè)血紅蛋白用):碳酸氫鈉1.0 g,氰化鉀0.05 g,高鐵氰化鉀0.2 g,蒸餾水1 000 mL。綿羊紅細(xì)胞懸液的制備:在無(wú)菌條件下,采健康成年綿羊的頸靜脈血,去纖維蛋白,加入2倍的Alsever溶液,搖勻,置于4℃保存?zhèn)溆?。?shí)驗(yàn)設(shè)5組,每組10只。對(duì)照組,陽(yáng)性藥組為環(huán)磷酰胺20 mg/kg,洋參次苷囊3個(gè)劑量組(0.8,0.4,0.2 g/kg)。動(dòng)物每日灌胃給藥1次,連續(xù)給藥2周后,第15 d取上述保存的綿羊紅細(xì)胞,用生理鹽水洗滌3次,每次用2 000 r/min,離心5min,棄去上清液,洗滌后的紅細(xì)胞以3∶5(V/V)用生理鹽水稀釋?zhuān)辜t細(xì)胞濃度為20億個(gè)/mL,按每只鼠0.2 mL(約4億個(gè)紅細(xì)胞)小鼠腹腔注射,免疫4 d后,將小鼠處死進(jìn)行溶血實(shí)驗(yàn),具體方法參照文獻(xiàn)[1]進(jìn)行。于540 nm波長(zhǎng)下比色,測(cè)定試驗(yàn)用的綿羊紅血球半數(shù)溶血時(shí)的OD值,再計(jì)算樣品的半數(shù)溶血值(HC50)。
1.2 結(jié)果見(jiàn)表1。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,洋參次苷膠囊能明顯的增強(qiáng)小鼠體液免疫功能,而陽(yáng)性藥環(huán)磷酰胺組表現(xiàn)出明顯的體液免疫功能低下,低于正常對(duì)照組。
表1 洋參次苷膠囊對(duì)小鼠體液免疫功能的影響(ˉx±s)
2.1 材料與方法抗凝雞血,2%糖原水溶液,pH 6.4 PBS,生理鹽水,注射器,姬姆薩-瑞特氏染液,玻片等。實(shí)驗(yàn)設(shè)5組,每組10只小鼠。對(duì)照組,陽(yáng)性藥環(huán)磷酰胺20 mg/kg體重,洋參次苷膠囊3個(gè)劑量組分別為0.8,0.4,0.2 g/kg體重。動(dòng)物每日灌胃給藥1次,連續(xù)給藥2周,在做吞噬實(shí)驗(yàn)前1 d所有做實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物每只腹腔注射2%糖原1 mL,將注射過(guò)糖原的小鼠腹腔注射20%雞紅細(xì)胞懸液1 mL,然后輕柔腹部,30min后脫頸處死,立即開(kāi)腹吸取腹腔液滴在玻片上約0.2 mL,之后玻片置入37℃孵育30 min后,再用pH 6.4 PBS沖洗,吹干,姬姆薩-瑞特氏染色,顯微鏡下判定結(jié)果,算出吞噬百分率[6]。
2.2 結(jié)果見(jiàn)表2。
表2, 洋參次苷膠囊對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞功能的影響(ˉx±s)
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,洋參次苷膠囊能明顯提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能。
[1]徐淑云.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1982:400.
[2]徐學(xué)英.一個(gè)改進(jìn)的體液免疫測(cè)定方法:溶血素測(cè)定法[J].藥學(xué)學(xué)報(bào),1979,14(7):98.
R285.5
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