P120 catenin和E-Cadherin聯(lián)合標記對乳腺小葉腫瘤性病變的診斷意義

劉玲莉，曠樂輝

（湖南師范大學附屬湘東醫(yī)院，湖南 醴陵412200）

隨著人們生活水平的提高、健康意識的增強，我們外檢中遇到的乳腺標本越來越多，一般情況下都是比較好診斷的，尤其在區(qū)分經(jīng)典的小葉性病變和導管性病變，但有時也很困難，并有相當大的主觀性，如已發(fā)表的研究資料已證實的那樣，浸潤性小葉癌(invasive lobular cancinoma ILC)的發(fā)生率變動范圍為0.7%～20%[1]。臨床上我們常用E-Cadherin作為鑒別兩者的輔助指標，但僅用E-Cadherin，少數(shù)病例結果并不理想[2]，P120是連環(huán)蛋白家族的新成員 與E-Cadherin有著密切的關系，所以我們嘗試了應用P120 catenin和 E-Cadherin聯(lián)合進行免疫組化標記，以期對小葉和導管腫瘤有更客觀準確的診斷。

1 材料與方法

1.1 材料 收集我院2008年1月～2009年12月間乳腺腫瘤標本64例作為研究對象，其中浸潤性導管癌(IDC)53例，浸潤性小葉癌(ILC)3例，導管原位癌(DCIS)3例，小葉原位癌 (LCIS)1例，導管不典型增生(ADH)3例，小葉不典型增生(ALH)1例，另選10例正常乳腺組織作為對照。

1.2 方法 所有組織均經(jīng)福爾馬林固定，常規(guī)脫水，石蠟包埋切片，HE染色，免疫組化采用SP法染色，DAB顯色，試劑P120和E-Cadherin均由福州邁新生物技術開發(fā)有限公司提供。

1.3 結果判斷 P120表達胞膜棕黃色顆粒為陽性，棕黃色顆粒沉積于胞漿內(nèi)為異位表達，E-Cadherin表達胞膜棕黃色顆粒為陽性。將陽性細胞按數(shù)量和強度分為4級，染色強度與背景無明顯差別為(-)，陽性細胞數(shù)≤10%，染色強度大部分較弱為 (+)：＞50%，染色強度為中至強染色者為(+++)，介于兩者之間為(++)。

1.4 統(tǒng)計學分析 采用SPSS10.0軟件，Spearman等級資料的相關性分析。

2 結果

2.1 P120 catenin 在正常乳腺、DCIS、IDC中，P120 catenin表達連續(xù)性的胞膜交界處陽性，胞漿少許陽性(圖1)。在LDIS和ILC卻出現(xiàn)異位表達表達，大量細胞出現(xiàn)胞漿陽性(圖2)。P120 catenin在正常乳腺與導管病變的表達無差異性，而在小葉腫瘤性病變中的異位表達與導管病變的表達差異極為顯著(P＜0.01)。

2.2 E-Cadherin E-Cadherin表達定位于胞膜，正常乳腺、DCIS、IDC表達連續(xù)性胞膜棕黃色，LCIS、ILC表達較弱甚至不表達(圖3)。E-Cadherin在正常乳腺與導管病變的表達無差異性，而在小葉腫瘤和導管腫瘤中的表達也極具差異性（P＜0.01)。

圖1.P120 catenin浸潤性導管癌細胞膜陽性

圖2..P120catenin小葉原位癌顯示明顯的胞漿陽性

圖3.E-Cadherin小葉原位癌瘤細胞不表達

2.3 P120 cateni和E-Cadherin異常表達的相關性

結果顯示，P120 catenin E-Cadherin的異常表達呈正相關性，即P120 catenin正常表達越強 ECadherin表達也越強，而P120 catenin正常表達越弱，異常表達越強，E-Cadherin表達也越弱。

2.4 經(jīng)免疫組化標記 在原診斷的5例DCIS中發(fā)現(xiàn)1例為LCIS，在原診斷的54例IDC中重新診斷了1例ILC，2例混合性導管-小葉癌。顯然小葉性腫瘤的診斷明顯偏低，對病人的治療和愈后有一定的影響。前后兩次診斷的兩次診斷的結果見表1。

表1 經(jīng)免疫組化標記后，前后兩次診斷的比較

3 討論

P120 catenin是連環(huán)蛋白家族的新成員，位于細胞膜旁的胞漿內(nèi)，參與細胞粘附和細胞內(nèi)信號傳導；E-Cadherin是介導細胞間粘連作用的跨膜糖蛋白，位于細胞膜；一旦其功能喪失可引起細胞-細胞連接的破壞。P120 catenin能直接與E-Cadherin結合形成連環(huán)蛋白-鈣粘連蛋白復合體 (catenin cadherin complex,CCC)。CCC中任何一個分子表達異常都可能反映其正常結構和(或)功能受到破壞并導致細胞惡性轉化[3]。正常情況下,P120 catenin表達于乳腺上皮的胞膜，只有在小葉腫瘤時卻異位表達于胞漿。其生物學機制可能為：當小葉腺泡上皮瘤變時，E-Cadherin的部分或完全性丟失使得CCC的形成減少甚至消失，導致P120 catenin在胞漿內(nèi)聚集[3]。小葉癌和導管癌有著明顯不同的臨床特征及愈后，前者多中心性比例高，對側發(fā)生的機率也高[4]，腫瘤的邊界較難界定，淋巴結轉移較少，約3%～10%，發(fā)生腹膜、腹膜后、腦膜、胃腸道、女性生殖器官轉移的幾率較高，肺和胸膜累及的幾率較低。且ALH和LCIS發(fā)展發(fā)展為雙向乳癌的風險是正常人的7～10倍，臨床治療和預后與導管原位癌不同，所以，作出正確的診斷是非常重要的。雙向乳癌的風險是正常人的7-10倍，臨床治療和愈后與導管原位癌不同，所以作出正確診斷是非常重要的。鏡下經(jīng)典型ILC瘤細胞小而較一致，成列兵樣、靶環(huán)狀、單個散在浸潤在間質(zhì)纖維組織中，并且還有腺泡型、實性型、多形型三個亞型。其形態(tài)特點的多樣性，無疑給我們的診斷帶來了一定的困難。結合實驗我們發(fā)現(xiàn)一些比較容易誤診的情況：①在不典型增生和原位癌，細胞并不一定很經(jīng)典，都是管腔內(nèi)上皮的實性或篩狀增生，并且周圍常有增生的導管，這時就很容易主觀性地診斷為導管病變；②多形性ILC細胞大而異形性明顯，同時纖維間質(zhì)高度增生，排列也不一定是列兵狀或靶環(huán)狀，形態(tài)學上很難與IDC鑒別；③在典型的IDC中有些區(qū)域細胞比較小，散在排列，我們常把它誤認為是分化比較差的區(qū)域；而遺漏了混合有小葉癌的可能。④IDC的周圍常可見小葉原位癌樣結構，究竟是導管小葉癌化還是合并小葉原位癌，有時很難斷定，這些情況下，通過P120 catenin和E-Cadherin聯(lián)合標記一般都給我們很大的幫助；即LCIS、ALH和ILC會出現(xiàn)E-Cadherin表達減弱或消失，P120 catenin出現(xiàn)異位的漿陽性。當然有時候也并不是我們想象的那么美好，在我們的實驗中還發(fā)現(xiàn)兩例形態(tài)上似小葉源性腫瘤，但ECadherin仍有一定程度的表達，而P120 catenin以漿陽性為主，綜合考慮，最終還是診斷小葉性腫瘤，故本人認為P120 catenin和E-Cadherin的聯(lián)合應用對于小葉腫瘤性病變很有幫助.比用單一抗體更準確可靠。

[1]Martinez V,Azzopardi JG.Invasive lobular carcinoma of the breast:incidence and variants[J].Histopathology,1979,3(6):467-488.

[2]Acs G,Lawton TJ,Rebbeck TR,et al.Differential expression of E-cadherin in lobular and ductal neoplasms of the breast and its biologic and diagnostic implications[J].Am J Clin Pathol,2001,115(1):85-98.

[3]張瓊,張昌菊.連環(huán)蛋白家族新成員-P120ctn[J].醫(yī)學分子生物學雜志,2006,3(6):450-452.

[4]WHO世界衛(wèi)生組織腫瘤分類及診斷標準系列.乳腺及女性生殖器官腫瘤病理學和遺傳學[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2006.19.