基質(zhì)分散固相萃取 GC/MS法檢測人體血液中去痛片的主要成分

王迎春, 韓 馳, 謝增瑞

(1.鐵道警官高等?？茖W(xué)校,河南鄭州 450053;2.河南省鄭州市公安局刑科所,河南鄭州 450004)

0 引言

去痛片(compound aminopyrine phenacetin tablets),又稱索米痛(Somedon),其主要成分為氨基比林、非那西丁、咖啡因和苯巴比妥,具有較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛、解熱及抗炎作用,常用于發(fā)熱、頭痛、神經(jīng)痛、牙痛、關(guān)節(jié)痛、肌肉痛、痛經(jīng)等癥[1-2]。由于其療效好、價格低、易于獲得,故每年因意外、自殺而造成中毒、死亡的案件時有發(fā)生,關(guān)于它的檢驗方法也屢見報道[3-4],但這些方法在藥物提取時不僅溶劑用量大、污染嚴(yán)重,而且費(fèi)時費(fèi)力。為了辦案需要我們采用基質(zhì)分散固相萃取法對人體血液中的去痛片成分進(jìn)行了檢驗研究,并取得了滿意的結(jié)果。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

儀器:Agilent 6890/5975i氣——質(zhì)聯(lián)用儀及化學(xué)工作站(美國安捷倫公司);TDL-40B離心機(jī)(湖南星科科學(xué)儀器有限公司);DSY-Ⅲ型濃縮儀(北京精華苑技術(shù)研究所)。試劑:乙腈、硫酸鎂、氯化鈉等(均為分析純);吸附劑:石墨化碳、PSA、C18(均為美國安捷倫公司提供);標(biāo)準(zhǔn)樣品:氨基比林、非那西丁、咖啡因、苯巴比妥、SKF525A(均為公安部物證鑒定中心提供,臨用時配制成濃度為 1mg/m L的標(biāo)準(zhǔn)溶液)。

1.2 儀器條件

色譜柱:J＆W 30m×0.25mm×0.25 um DB-5/MS柱;柱溫:50℃保持 1min,以 20℃/min升至 260℃,保持 5min;載氣:高純氦(1.0m L/min);電離方式:EI(70 eV);離子源溫度:230℃;四級桿溫度:130℃;質(zhì)量范圍:60～350 aum;定量離子(m/z):內(nèi)標(biāo)物 165、非那西丁 108、氨基比林 231、咖啡因 194、苯巴比妥 204。

1.3 樣品處理與檢驗

準(zhǔn)確量取待測血樣 5mL,置于一 50mL的具塞試管中。另取空白血樣 5mL,首先向其中添加氨基比林、非那西丁、咖啡因和苯巴比妥各 10 ug,然后向上述兩血樣中各加入 10mL乙腈,強(qiáng)力振搖 1min,再加入 4克無水 MgSO4及 1克 NaCl,振搖 1min后,加入 10 ug內(nèi)標(biāo)物,振搖 30 s,4 000 r/min離心 2 m in。將上清液移入另外兩支具塞試管中,各加入0.5克 MgSO4、0.1克 PSA和 0.1克 C18(色素過重時加 0.1克石墨化碳),振蕩 30 s離心,上清液置氮吹儀上在 60℃濃縮后定容至 1 mL,進(jìn)樣。用譜庫檢索進(jìn)行定性(結(jié)果見圖1),用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)樣定量。

圖1 去痛片中四種主要藥物的總離子流色譜圖

2 結(jié)果與討論

2.1 線性關(guān)系的測定

分別取非那西丁、氨基比林、咖啡因和苯巴比妥的標(biāo)準(zhǔn)液 ,均配制成濃度為 2、4、6、8、10 ug/m L的工作曲線測定液,按上述實驗條件進(jìn)行測定,以藥物與內(nèi)標(biāo)物的峰面積比為縱坐標(biāo),藥物濃度為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸,結(jié)果四種藥物的濃度與其對應(yīng)的峰面積比均呈良好的線性關(guān)系,其相關(guān)系數(shù)(r)分別為:0.9972、0.993 0、0.995 6和 0.991 3。

2.2 內(nèi)標(biāo)物回收率的測定

取空白血樣 5 mL,加入 1mg/mL的內(nèi)標(biāo)物 10 uL,按上述實驗方法進(jìn)行提取。用自動進(jìn)樣器分別抽取空白血樣添加內(nèi)標(biāo)物的提取液及用等量內(nèi)標(biāo)物配制的標(biāo)準(zhǔn)液,各進(jìn)樣三次,按下式計算:

結(jié)果內(nèi)標(biāo)物回收率三次測定的平均值為82.58%。

2.3 檢測限的測定

取空白血樣 5m L,添加 10 ug的氨基比林,按上述實驗條件提取凈化后定容至 10mL,在全掃描模式下進(jìn)樣 1 uL,以 3倍信噪比計算,氨基比林的檢出限為 0.21 ng。

3 結(jié)語

基質(zhì)分散固相萃取是近年來國際上新興的一種快速高效的多殘留檢測前處理技術(shù),該技術(shù)不僅能有效地消除基質(zhì)干擾,進(jìn)一步提高檢測的準(zhǔn)確度和靈敏度,而且摒棄了藥物提取時需調(diào)節(jié)樣品酸度的繁瑣,使不同極性的藥物提取、凈化一次完成,避免了藥物的漏檢,提高了分析速度、減少了試劑用量。因此,該方法對藥物盲測檢驗不失為一種簡便、快捷的理想方法。

[1] 龍焜,李萬亥.臨床藥物手冊(修訂版)[M].北京:金盾出版社,2002:529-530.

[2] 陳順綸.中國商品大辭典(藥品分冊)[M].北京;中國商業(yè)出版社,1992:147-148.

[3] 王皓玉,曹潔.血中去痛片有效成分的分析[J].山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2007,38(6):518-522.

[4] 范紅梅,李凌云.去痛片的薄層色譜鑒別[J].中國藥師,2003,6(4):252.