拉莫三嗪對(duì)腦出血大鼠腦組織含水量的影響

郭志松 邵換璋

河南省人民醫(yī)院中心ICU 鄭州 450003

1 資料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和分組 健康成年雄性 Wistar大鼠72只,體質(zhì)量220～250 g,由鄭州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,合格證號(hào):SYK2006-11。隨機(jī)分為對(duì)照組 8只,手術(shù)組 32只,治療組32只。后2組又分為12 h、1 d、3 d、7 d四個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行腦組織含水量檢測(cè),每組每個(gè)時(shí)間點(diǎn)為8只大鼠。

1.2 腦出血模型的制作和成功的標(biāo)志 大鼠經(jīng)10%水合氯醛(400mg/kg)腹腔注射麻醉后,俯臥位固定于立體定位儀上,用微量進(jìn)樣器由股動(dòng)脈抽取血液 50μl緩慢注入尾狀核位置,留針15min。對(duì)照組注入等量生理鹽水。動(dòng)物麻醉清醒后,參照Z(yǔ)ea Longa等評(píng)分標(biāo)準(zhǔn),累積1分以上為成功模型。

1.3 腦組織含水量的測(cè)定 實(shí)驗(yàn)大鼠斷頭取腦后,取進(jìn)針道前約3 mm厚的腦組織。用電子天平先稱取濕重,電熱恒溫培養(yǎng)干燥兩用箱100℃烘烤48 h,再稱取干重。利用腦組織含水量=(鮮質(zhì)量-干質(zhì)量)/鮮質(zhì)量×100%進(jìn)行計(jì)算。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示組間比較用方差分析,數(shù)據(jù)處理采用SPSS 12.0軟件進(jìn)行分析。α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的一般情況 在腦出血模型中,有3只大鼠死亡,其中4只死于麻醉意外,2只死于出血波及顱底,由備用動(dòng)物補(bǔ)充。腦出血組動(dòng)物麻醉清醒后均出現(xiàn)不同程度的精神萎靡,反應(yīng)遲鈍,自潔能力下降,進(jìn)食減少。對(duì)照組大鼠精神恢復(fù),反應(yīng)及進(jìn)食正常。腦出血大鼠于術(shù)后6 h即可觀察到其行為學(xué)改變,均出現(xiàn)較明顯左側(cè)肢體偏癱、旋轉(zhuǎn)爬行或拖步行走,神經(jīng)缺損體征以造模后12～24 h最為明顯,72 h后分別出現(xiàn)不同程度的改善。對(duì)照組未出現(xiàn)上述神經(jīng)缺損癥狀。

2.2 腦組織含水量變化 手術(shù)組腦組織含水量在出血后12 h開始增加,3 d時(shí)水腫達(dá)到峰值,7 d有所減輕,治療組與手術(shù)組比較各時(shí)間點(diǎn)的腦組織含水量均相應(yīng)降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。對(duì)照組在12 h～7 d變化不明顯。詳見表1。

表1 各時(shí)間點(diǎn)大鼠腦組織含水量的變化 (%)

3 討論

拉莫三嗪的化學(xué)結(jié)構(gòu)為3,5-二氨基-6-(2,3-二氯苯基)-1,2,4-三丫嗪,目前主要用于難治性癲的治療。其作用環(huán)節(jié)是抑制突觸前膜興奮性氨基酸谷氨酸的釋放,抑制鈉通道開放,穩(wěn)定過度興奮的神經(jīng)元膜,減少Cl-和H2O被動(dòng)進(jìn)人細(xì)胞內(nèi)達(dá)到減輕腦水腫的作用[1]。

國(guó)內(nèi)有報(bào)道LTG可通過降低神經(jīng)細(xì)胞外液谷氨酸的濃度,減輕腦外傷后急性腦水腫[2],但對(duì)腦出血后腦水腫的治療作用未見報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn)腦出血后手術(shù)組腦組織含水量在出血后12 h開始增加,3 d時(shí)水腫達(dá)到峰值,7 d有所減輕,治療組與手術(shù)組比較各時(shí)間點(diǎn)的腦組織含水量均相應(yīng)降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。對(duì)照組在12 h～7 d變化不明顯。認(rèn)為其可能機(jī)制是:(1)作用于電壓依賴鈉通道,抑制突觸前膜谷氨酸的釋放,從而使NR1激活減少,細(xì)胞損害減輕。本實(shí)驗(yàn)中可見 NR1在治療組的陽(yáng)性表達(dá)明顯減少,細(xì)胞損害減輕,與Bather[3],Pisani[4]的研究一致。(2)作用于電壓門控性鈣通道(VGCCs)參與神經(jīng)元興奮性和傳導(dǎo)性的調(diào)節(jié),并通過鈣離子濃度的變化影響第二信使系統(tǒng)。VGCCs還參與細(xì)胞毒性作用,通過激活一系列酶活動(dòng),產(chǎn)生細(xì)胞損害。LTG可作用于VGCCs調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)釋放,降低鈣調(diào)性細(xì)胞毒性而發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。此外對(duì)離體腦皮層突觸小體的研究中,發(fā)現(xiàn)LTG通過減少突觸前膜鈣離子內(nèi)流,以濃度依賴的方式,抑制由4-AP誘導(dǎo)的皮質(zhì),紋狀體谷氨酸鹽的釋放。還能減少因膜去極化產(chǎn)生的細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度升高[5]。

該研究提示拉莫三嗪可以減輕實(shí)驗(yàn)?zāi)X出血大鼠腦組織含水量,早期應(yīng)用拉莫三嗪進(jìn)行治療可能作為預(yù)防和減輕腦損傷的有效途徑。

[1]Peck AW.Clinical pharmacology of lamotrigine[J].Epilepsia,1991,32:9-l2.

[2]程員.拉莫三嗪治療腦外傷后腦水腫的實(shí)驗(yàn)研究[J].中華創(chuàng)傷志,1998,14:209-211.

[3]Pisani F,Pedale S,Macaione V.Neuroprotective effect of lamotrigine and remacemide on excitotoxicity induced by giutamate againist in isolated chick retina[J].Exp Neurol,2001,170:162-170.

[4]Wang SJ,Tsai JJ,Gean PW.Lamotrigine inhibits tetruethylammonium induced synaptic plasticity in the rat amygdala[J].Neuroscience,1997,81:667-671.

[5]Wang SJ,Sihra TS,Gean PW.Lamotrigine inhibition of glutamate release from isolated cerebrocotical nerve teminals by amppression of voltage-activated calcium channel activity[J].Neuroreport,2001,12:2255-2258.