ICU病房銅綠假單胞菌的耐藥性及其產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶的分析

張鳳華,王婷婷,王大利

(1.大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院檢驗科,遼寧大連116021;2.大連大學附屬新華醫(yī)院檢驗科,遼寧大連116021;3.大連機車醫(yī)院,遼寧 大連116021)

銅綠假單胞菌(PAE)是醫(yī)院感染的常見病原菌,尤其在ICU病房,可引起機體多系統(tǒng)、多臟器或多部位的嚴重感染[1],是ICU內(nèi)醫(yī)院感染的首要病原菌[2]。由于多種廣譜抗菌素的大量使用,并且隨著亞胺培南等碳青霉烯類抗生素在臨床的廣泛使用,細菌也逐漸獲得對此類藥物的耐藥性且耐藥性逐年升高。為了解本院ICU分離銅綠假單胞菌對抗菌藥物的耐藥性及性及其產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶的情況分析,我們進行了相關研究。

1 材料與方法

1.1菌株來源 2008-2009年大連醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院ICU分離鑒定的1 478株銅綠假單胞菌,質(zhì)控菌株為銅綠假單胞菌ATCC 27853,購自衛(wèi)生部臨床檢驗中心。

1.2鑒定與藥敏 采用德靈MicroscanWalkAway 96SI系統(tǒng)和與之配套的藥敏鑒定復合板鑒定細菌,用微量稀釋法讀取藥敏,按NCCLS2006年版標準判斷結果,分為敏感(S),中介(I),耐藥(R)。

1.3金屬β-內(nèi)酰胺酶檢測方法 根據(jù)付有榮等[3]報道,以0.1 mol/L EDTA及2-巰基丙酸為抑制劑,用雙紙片協(xié)同法篩檢金屬酶。

2 結果

2.1菌株分布 臨床標本分布構成比見表1。

2.2銅綠假單胞菌耐藥率 1 478株銅綠假單胞菌對12種抗菌藥物的耐藥率見表2。

2.3金屬β-內(nèi)酰胺酶篩查試驗結果 135株對亞胺培南耐藥的多重耐藥菌株中,用EDTA紙片復合法篩選出45株產(chǎn)金屬酶的菌株,產(chǎn)生率為33.3%,占總檢出株數(shù)的3.0%。

表1 銅綠假單胞菌在臨床標本中的分布構成比(%)

表2 1 478株銅綠假單胞菌對12種抗菌藥物的耐藥率(%)

3 討論

本實驗顯示,ICU病房中的銅綠假單胞菌主要分離自痰液,占所有分離標本的58.7%,考慮主要與ICU患者大都不能自主呼吸,應用呼吸機、氣管插管等侵入性操作較多有關。同時,由于ICU患者大多病情危重、免疫力低下、大量應用廣譜抗菌藥物等因素,ICU分離銅綠假單胞菌的耐藥率有逐年增長的趨勢,特別是多耐藥和泛耐藥株大量出現(xiàn)[4]。本實驗中多數(shù)抗菌藥物的耐藥率都大于50%,耐亞胺培南的菌株達到63.7%,銅綠假單胞菌只對阿米卡星較為敏感。氨基糖甙類藥由于藥物的副作用大,臨床使用相對減少,阿米卡星優(yōu)于妥布霉素和慶大霉素,且腎毒性低,常是首選氨基糖甙類藥物。因為銅綠假單胞菌的耐藥性強而復雜,若尚急需,可選氨基糖甙類或喹諾酮類藥物聯(lián)用加酶抑制劑藥物,同時應及時進行細菌培養(yǎng)和藥敏試驗。

近年來隨著碳青酶烯類藥物的使用,臨床上銅綠假單胞菌對碳青酶烯類藥物的耐藥率不斷增加,特別是耐碳青酶烯類藥物菌株的感染,常使臨床醫(yī)師抗感染治療面臨諸多困難。銅綠假單胞菌的耐藥機制包括產(chǎn)碳青霉烯酶、外膜孔蛋白丟失和多藥外排泵出系統(tǒng)的過度表達等。目前在銅綠假單胞菌中發(fā)現(xiàn)的碳青霉烯酶主要是金屬酶。金屬酶可以是質(zhì)粒介導的或染色體介導的,已在全球范圍內(nèi)廣泛播散。產(chǎn)金屬酶的銅綠假單胞菌能水解包括第三、第四代頭孢菌素及碳青霉烯類等廣譜抗生素,導致臨床抗感染治療失敗。本實驗中,135株對亞胺培南耐藥的菌株中,用EDTA紙片復合法篩選出45株產(chǎn)金屬酶的菌株,產(chǎn)生率為33.3%;金屬酶的總體產(chǎn)生率為3.0%,提示我院ICU病房有產(chǎn)金屬酶的銅綠假單胞流行,應予隔離治療。微生物室工作人員需定期總結耐藥監(jiān)測結果并反饋給臨床醫(yī)師參考,以便采取控制措施[5],防止耐藥菌株進一步的擴散流行。

[1]王中新,魏艷艷,熊自忠.重癥監(jiān)護病房分離銅綠假單胞菌的耐藥性及分子流行病學檢測[J].中華醫(yī)院感染學雜志,2009,19(4):463.

[2]居 峰,顧 兵,盛 敏.343例 ICU病原菌分布與耐藥性分析[J].南京醫(yī)科大學學報(自然科學版),2009,29(2):267.

[3]付有榮,周俊英,常 江,等.一種細菌金屬β-內(nèi)酰胺酶篩查方法的建立[J].醫(yī)學新知雜志,2005,15(1):43.

[4]孫景勇,倪語星,汪 復,等.2007年中國CHINET銅綠假單胞菌耐藥性監(jiān)測[J].中國感染與化療志,2009,9(3):192.

[5]朱德妹.進一步加強細菌耐藥監(jiān)測[J].中華檢驗醫(yī)學雜志,2006,29(10):865.