血管內(nèi)皮生長因子在多囊卵巢綜合征患者卵巢組織中的表達

周鳳珍，周霞平，柯瑋琳，羅 璐

（廣東省深圳市第二人民醫(yī)院婦科，廣東深圳 518035）

多囊卵巢綜合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）是育齡婦女常見的一種內(nèi)分泌及糖代謝異常所致的疾病[1-2]，以高雄激素血癥、高胰島素血癥及胰島素抵抗（IR）為重要特征。其遠(yuǎn)期并發(fā)癥如2型糖尿病、高血壓、心血管疾病等的發(fā)病風(fēng)險明顯增加，嚴(yán)重威脅女性的健康和生命質(zhì)量[2]。因此，關(guān)于PCOS的研究深受廣大學(xué)者關(guān)注。目前，PCOS的確切發(fā)病機制尚不清楚。研究表明，卵巢血管增生與擴張、血流豐富是PCOS的顯著特征[3-4]。本研究旨在探討PCOS患者卵巢組織中血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）的表達情況，并探討PCOS的發(fā)生機制。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機選取2007年10月~2009年2月在我院行腹腔鏡下雙側(cè)卵巢卵泡打孔術(shù)的PCOS患者40例，平均年齡（24.50±4.62）歲，PCOS 的診斷根據(jù)阿姆斯特丹標(biāo)準(zhǔn)（2003 年）[5]，并排除其他疾病，如先天性腎上腺皮質(zhì)增生、庫欣綜合征、分泌雄激素的腫瘤等。對照組為同期就診于我院，月經(jīng)規(guī)律、年齡與PCOS組相當(dāng)，術(shù)中發(fā)現(xiàn)單側(cè)卵巢冠囊腫，同側(cè)或?qū)?cè)卵巢可見數(shù)個卵泡發(fā)育的32例患者的卵巢組織，無不孕、糖尿病、甲狀腺疾病、骨病等疾病史及家族史。

1.2 方法

1.2.1 免疫組織化學(xué) 腹腔鏡下用活檢鉗在卵巢表面組織取活檢，取直徑約0.8 cm的卵泡周圍組織。將所取新鮮卵巢組織置于10%福爾馬林溶液內(nèi)固定，石蠟包埋制成蠟塊，4 μm連續(xù)切片備用。采用免疫組化鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連接法（SP法）測定VEGF的表達。免疫組化試劑盒及兔抗人VEGF抗體購自Santa Cruz公司，DAB顯色劑購自福建邁新公司。

1.2.2 判斷標(biāo)準(zhǔn) VEGF免疫組化結(jié)果判定：VEGF陽性染色呈棕黃色顆粒狀，定位于細(xì)胞質(zhì)。低倍鏡下（200倍）選取陽性細(xì)胞最密集區(qū)，計數(shù)5個視野中的1 000個腫瘤細(xì)胞，計算陽性細(xì)胞占腫瘤細(xì)胞的百分率，陽性細(xì)胞百分率≥10%為陽性表達，<10%為陰性表達。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

計數(shù)資料采用χ2檢驗，所有數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS 11.5軟件處理，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

兩組中VEGF表達均位于顆粒細(xì)胞、泡膜細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞。兩組VEGF在顆粒細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞中的表達強度差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

3 討論

PCOS是生育期婦女最常見的內(nèi)分泌問題，占育齡婦女的5%～10%[6]，占無排卵不孕的75%。此病發(fā)病年齡早，發(fā)病率高，以高雄激素血癥、高胰島素血癥及胰島素抵抗為重要特征。PCOS病因復(fù)雜，涉及神經(jīng)內(nèi)分泌、糖代謝、脂肪代謝、蛋白質(zhì)代謝以及卵巢局部調(diào)控因素等多方面的異常變化[7]。育齡婦女促排卵治療后受孕率低，目前尚無有效的治療方法，對其病因的進一步探討對提高育齡婦女的妊娠率非常重要。

表1 VEGF在卵巢組織中的表達（例）

卵巢是血管生成最活躍的器官，生殖周期中卵巢血管生成障礙或異常會導(dǎo)致PCOS、卵巢過度刺激綜合征、卵巢癌等病變。PCOS以卵巢間質(zhì)及卵泡囊的血管增生引起的卵巢增大為主要特征[8]。超聲檢查卵巢間質(zhì)血流情況是目前診斷PCOS的主要方法[9]。Resende等[10]對24例PCOS患者應(yīng)用經(jīng)陰道彩色多普勒超聲研究發(fā)現(xiàn)，與正常婦女比較，PCOS患者的卵巢間質(zhì)血管化明顯，數(shù)量豐富，卵巢間質(zhì)內(nèi)動脈阻力減小，血供增加?？梢娧苌稍赑COS的發(fā)生及發(fā)展中起重要作用。

血管生成是近幾年研究的熱點，其過程受多種因子的調(diào)控，其中VEGF是研究最早，也是關(guān)系最密切的血管生成因子之一。本研究結(jié)果表明，PCOS組卵巢顆粒細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞VEGF表達強，細(xì)胞間質(zhì)呈弱陽性表達。文獻報道PCOS患者血清中VEGF水平高于正常婦女[11]。VEGF在卵巢內(nèi)異常表達、分泌并釋放入血，可能是PCOS的發(fā)病機制之一，推測這些發(fā)現(xiàn)可能是卵巢間質(zhì)血管化增加的基礎(chǔ)[12-13]。

因此，進一步深入研究VEGF在PCOS發(fā)生及發(fā)展中的作用，將為探討PCOS病因提供新思路，也為探索PCOS靶基因治療奠定理論基礎(chǔ)。

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