當歸精油香薰療法對大鼠痛經(jīng)模型的影響1)

殷 玲,徐 瑩,葉 紅,沈升萬,應立英

原發(fā)性痛經(jīng)是青年女性常見病之一,嚴重影響正常生活和工作質量。其病因復雜,前列腺素合成酶抑制劑為目前的常用治療藥物,但存在惡心、胃腸黏膜潰瘍、腹痛、粒細胞減少等副反應。中醫(yī)認為痛經(jīng)是因血液淤阻而致。當歸(angelica sinensis diels)作為婦科常用藥,具有補血活血、調(diào)經(jīng)止痛等功效,它的化學成分主要為當歸精油和水溶性物質。本研究擬采用當歸精油對大鼠痛經(jīng)模型進行香薰,旨在探討通過香薰這種無明顯副反應的護理干預途徑,了解當歸精油對痛經(jīng)的影響,以期為此療法的臨床應用提供更多的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 Wistar雌性大鼠 24只,體重(225.0±13.7)g。由浙江中醫(yī)藥大學動物實驗研究中心提供[合格證號:SCXK(滬)2008—0016],實驗前適應環(huán)境飼養(yǎng)1周。本實驗于浙江中醫(yī)藥大學動物實驗中心清潔級動物實驗室完成。

1.1.2 藥物和試劑 ①縮宮素注射液:由上海禾豐制藥有限公司生產(chǎn),每支10 IU/mL,批號 090506。②苯甲酸雌二醇注射液:由上海通用藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn),每支 2 mg/mL,批號 090502。③當歸精油:由江西省吉安市天玉天然香料油有限公司提供,是自新鮮當歸中分離提取而來,精油含蒿苯內(nèi)酯 50%以上,相對密度0.908～0.932,折光 1.448～1.476。④β-內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒(編號E02E0214)、血栓素B2(TXB2)試劑盒(編號E02T0003)、6酮前列腺素F1a(6-K-PGF1a)試劑盒(編號E02K0012),均由上海藍基生物科技有限公司提供。

1.1.3 裝置和儀器 香薰裝置為1個68 cm×50 cm×42 cm塑料箱子,中間用鐵絲網(wǎng)隔開放置插電式香薰燈(廣州鴻盛電子科技有限公司),周圍飼養(yǎng)大鼠,箱子兩側壁留下直徑為1.5 cm的圓孔各3個,頂部為塑料蓋板以便操作和觀察。采血玻璃管、離心機、離心管、血清冷凍冰箱由浙江中醫(yī)藥大學動物實驗研究中心提供。大鼠β-內(nèi)啡肽、血栓素B2、6酮前列腺素 F1a的檢測儀器由上海藍基生物科技有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1 造模方法 大鼠痛經(jīng)模型按文獻[1]方法制備。在大鼠股部皮下注射苯甲酸雌二醇 10 d,每日1次,第1日、第10日每只0.5 mg,第2日～第9日每只0.2 mg,第11日腹腔注射縮宮素每只2 IU。

1.2.2 實驗方法 取同批Wistar雌性大鼠24只,測量體重,按體重編號后隨機分為香薰組和病理模型組,每組12只。香薰組和病理模型組依法造模。造模同時,香薰組開始進行香薰,取當歸精油按1滴精油加30 mL溫開水的比例配制成香薰液,每天08:00～16:00進行香薰(中途添加 1次現(xiàn)配香薰液),連續(xù)10 d。病理模型組則不香薰。其余飼養(yǎng)、環(huán)境等條件兩組均相同。實驗結束后再次測量體重,大鼠體重在實驗前后組間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

1.2.3 觀察指標 ①大鼠扭體反應:第11日在腹腔注射縮宮素后30 min內(nèi),觀察記錄大鼠扭體反應(大鼠腹部收縮內(nèi)凹,軀干與后肢伸展,臀部與一側肢體內(nèi)旋)發(fā)生的次數(shù)。②大鼠血清β-EP、TXB2、6-K-PGF1a:實驗第 11天觀察大鼠扭體反應次數(shù)后,香薰組和病理模型組分別從眼眶取血1.5 mL,離心后取血清并置于-60℃冰箱冷藏后送檢。應用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)定量檢測大鼠血清中各項指標,方法嚴格遵照說明書進行。③大鼠免疫器官的病理觀察:取血后隨機抽取香薰組和病理模型組各1只大鼠,解剖后分離胸腺、脾臟,放入10%甲醛中浸泡,常規(guī)病理切片鏡下觀察。此項實驗在浙江中醫(yī)藥大學病理實驗室完成。

1.3 實驗人員培訓 參與實驗人員均接受過常規(guī)的動物實驗培訓。

1.4 統(tǒng)計學分析 采用SPSS13.0軟件包進行數(shù)據(jù)處理,各組數(shù)據(jù)用均值和標準差-±s)表示,符合正態(tài)分布的計量資料采用t檢驗,不符合正態(tài)分布的采用秩和檢驗,計數(shù)資料采用 χ2檢驗。

2 結果

2.1 香薰療法對痛經(jīng)大鼠扭體次數(shù)的影響 香薰組大鼠30 min內(nèi)發(fā)生扭體次數(shù)明顯低于模型組(t=3.838,P<0.01)。扭體發(fā)生率兩組間差異無統(tǒng)計 學意義(P>0.05),詳見表1。

表1 兩組痛經(jīng)大鼠扭體次數(shù)及扭體發(fā)生率比較

2.2 香薰療法對痛經(jīng)大鼠血清β-EP、6-K-PGF1a、TXB2含量的影響 與病理模型組比較,香薰組大鼠血清中β-EP、6-K-PGF1a含量明顯升高(P<0.01),TXB2含量明顯降低(P<0.01),詳見表2。

表2 兩組痛經(jīng)大鼠血清β-EP、6-K-PGF1a、TXB2的變化

2.3 香薰療法對痛經(jīng)大鼠胸腺、脾臟病理變化的影響 大鼠胸腺、脾臟的病理切片經(jīng)HE染色后顯示:兩組胸腺結構存在,部分區(qū)皮質萎縮,髓質區(qū)增寬,皮、髓質分界尚清。脾臟結構存在,白髓、紅髓、邊緣區(qū)分界清,脾血竇可見大量含鐵血黃素沉著。兩組鏡檢結果未見明顯區(qū)別。

3 討論

香薰療法是指將植物中萃取的具有特定療效的精油,借助薰香器具擴散,經(jīng)呼吸道吸收后,作用于機體大腦邊緣系統(tǒng)和全身各器官,從而達到預防和治療身心疾病的功效[2]。相對于藥物而言,精油的優(yōu)勢主要體現(xiàn)在高滲透性、代謝快、不滯留、毒性小、容易透過血-腦屏障等特點[2]。國外護理界已有許多學者將香薰療法應用于疼痛、焦慮、抑郁等的干預,取得良好效果[3-5]。

關于痛經(jīng)的發(fā)病機制,中醫(yī)學認為是因沖任氣血運行不暢、胞宮經(jīng)血流通受阻所致。西醫(yī)認為由于月經(jīng)期子宮內(nèi)膜釋放前列腺素,誘發(fā)子宮肌痙攣性收縮,導致組織缺血而引起的。這一觀點正與中醫(yī)學“不通則痛”的病機相吻合。痛經(jīng)的中醫(yī)治療原則以調(diào)理沖任氣血為主,而當歸具有補血、調(diào)經(jīng)、止痛等功效。近年來又有藥理研究表明[6],當歸精油對正常和病理性的離體子宮平滑肌均有抑制作用,有較強的抗子宮平滑肌痙攣作用?；谏鲜隼碚摵脱芯炕A,本實驗將當歸精油以香薰的形式作用于縮宮素所致大鼠痛經(jīng)模型,探討其有效性和作用機制。

實驗結果顯示,模型大鼠注射縮宮素后的扭體發(fā)生率是100.0%,且出現(xiàn)磨牙、舔腹部、弓背行走等現(xiàn)象,說明造模成功。香薰組痛經(jīng)大鼠模型的扭體次數(shù)明顯減少,與病理模型組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01),而且有3只大鼠未出現(xiàn)明顯的扭體現(xiàn)象,說明當歸精油經(jīng)香薰途徑對子宮平滑肌也具有較好的抑制作用,從而緩解痛經(jīng)。本試驗中大鼠主要是通過被動吸入精油蒸氣而產(chǎn)生相應的療效。若是人體則可配合主動地深呼吸增加藥物吸入量,治療時間可相應縮短。

β-內(nèi)啡肽是一種具有內(nèi)源性鎮(zhèn)痛作用的神經(jīng)內(nèi)分泌激素,且以子宮為靶器官,參與其功能活動的調(diào)節(jié)[7]。本次研究結果表明,香薰組大鼠血清中β-EP含量高于病理模型組(P<0.01),從而起到內(nèi)源性鎮(zhèn)痛作用。TXB2、6-K-PGF1a是 TXA2、PGI2的代謝產(chǎn)物,TXA2具有強有力的收縮血管的作用,并能促進血小板凝集而導致血栓形成。PGI2具有明顯的擴血管和抑制血小板聚集的作用。痛經(jīng)時TXA2產(chǎn)生增多,而缺血子宮肌肉內(nèi)產(chǎn)生的大量氧自由基又抑制PGI2合成,形成惡性循環(huán)。本研究中,通過當歸精油香薰對大鼠痛經(jīng)模型血清中TXB2和6-K-PGF1a調(diào)節(jié)結果可看出,當歸精油香薰可以明顯增加血漿中6-K-PGF1a含量和降低TXB2含量,使子宮組織細胞功能趨于正?；?從而緩解痛經(jīng)的臨床表現(xiàn)。

病理結果顯示,大鼠的免疫器官胸腺和脾臟均出現(xiàn)一些病理改變,說明痛經(jīng)的發(fā)生與免疫系統(tǒng)的變化密切相關。但病理模型組和香薰組的鏡檢結果未見明顯區(qū)別,考慮是否與當歸精油香薰的干預時間過短有關,有待進一步的深入研究。

3 小結

當歸精油香薰療法對縮宮素所致大鼠痛經(jīng)模型具有良好的鎮(zhèn)痛作用,其作用機制可能與神經(jīng)內(nèi)分泌激素的綜合性調(diào)節(jié)作用相關。該研究為當歸精油香薰療法的臨床護理應用提供了一定的理論和實驗依據(jù)。

(感謝馬小琴教授對本課題的悉心指導。)

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