TPPA和 TRUST兩種檢查方法在梅毒血清學檢查中的應用

秦玲

梅毒是一種嚴重的性傳播疾病,它不僅引起全身性損害,同時還可以通過胎盤傳給胎兒,引起先天性梅毒[1]。近年來梅毒的發(fā)病率明顯上升,檢測方法的可靠性治療的準確性及血液制品使用的安全性[2],采取合適的檢查方法有利于指導臨床的診斷和治療。梅毒的實驗室檢測在梅毒診斷中占有非常重要的地位,是診斷梅毒的重要依據之一。目前甲苯胺紅不加熱血清試驗 (TRUST)和明膠顆粒凝集試驗 (TPPA)已廣泛應用于實驗室,作為檢查梅毒螺旋體的重要方法。本研究旨在探討分別采用 TPPA和 TRUST兩種檢查方法在梅毒血清學檢查中的應用,從而為臨床梅毒檢測方法的選擇提供進一步的指導。

1 資料與方法

1.1 標本來源 選擇我院 2005年 1月—2009年 12月 26例(份)梅毒血清標本作為研究對象,其中,男 19例,女 7例,年齡 18-67歲。根據梅毒的診斷標準[2]:其中Ⅰ期梅毒 10例,Ⅱ期梅毒 9例,Ⅲ期梅毒 4例,潛伏梅毒 3例;另選 10例經臨床確定為類風濕性關節(jié)炎、乙型肝炎、SLE、肺結核的作為對照組;以及 10例健康體檢者作為研究對象。

1.2 試劑與儀器 TRUST試劑由上海榮盛生物技術有限公司生產,TPPA試劑由日本富士株式會社生產提供。所用儀器為Biocell-2010酶標儀、Biocell-Fluido洗板機均由鄭州博賽生物工程有限公司提供。所有試劑盒 46例標本采用 TPPA和TRUST兩種檢查方法同時進行檢測,操作嚴格按照各廠家項目 SOP文件和儀器 SOP文件的要求進行均在有效期內按說明書嚴格操作。

1.3 檢測方法 46例標本采用 TPPA和 TRUST兩種檢查方法同時進行檢測,操作嚴格按照各廠家項目 SOP文件和儀器SOP文件的要求進行。TRUST結果判斷:以可見中等或較大的紅色凝聚物為陽性;可見較小的紅色凝聚物為弱陽性;可見均勻的抗原顆粒而無凝聚物為陰性。TPPA結果判斷:若粒子成紐扣狀凝集,呈現外周邊緣均勻且平滑的圓形為陰性;若粒子形成小環(huán)狀,呈現外周邊緣均勻平滑的圓形為可疑;若外周邊緣不均勻且雜亂的凝集在周圍為陽性。TRUST和 TPPA每次均作陰、陽性對照。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用 SPSS11.0軟件進行統(tǒng)計學分析。計數資料的比較用 χ2檢驗;以 P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。其中敏感性=陽性數 /檢測數 ×100%;特異性=TN/(FP+TN)×100%(其中:TP=真陽性,FN=假陰性,FP=假陽性,TN=真陰性)。

2 結果

2.1 兩種檢查方法法的檢測陽性率比較 兩組陽性率比較,TPPA檢測法對梅毒檢測的陽性率明顯高于 TRUST檢測法,差異有統(tǒng)計學意義 (P＜0.05,見表1)。

2.2 兩種檢測方法的敏感性和特異性比較 TPPA檢測梅毒的敏感性和特異性明顯高于 TRUST檢查法。且檢測Ⅲ期梅毒及潛伏梅毒的陽性率分別均高于 TRUST檢測的陽性率,兩組比較差異具有顯著性 (P＜0.05,見表2)。

表1 兩種檢查方法法的檢測陽性率比較Table1 Two inspection methods tested positie method

表2 兩種檢測方法的敏感性和特異性比較Tab le 2 Two detection method is the sensitivity and specificity

3 討論

梅毒是由于梅毒螺旋體感染引起的傳染性疾病,近年來,我國梅毒的發(fā)病率明顯呈現上升趨勢。因此對梅毒檢測的準確率及特異性對梅毒的診治具有重要的臨床意義。

目前用于梅毒血清學檢驗方法有性病研究實驗室試驗(VDRL)、不加熱血清反應素試驗 (USR)、快速血漿反應素試驗 (RPR)、甲苯胺紅不加熱血清試驗 (TRUST)、梅毒酶聯免疫吸附試驗 (TP-ELISA)、梅毒膠體金法 (SYP)、熒光密螺旋體抗體吸收試驗 (FTA-ABS)、梅毒螺旋體血凝試驗(TPHA)、梅毒螺旋體抗體 TPPA、梅毒螺旋體制動試驗(TPI)等 10種,但臨床檢驗室較常用的是 TRUST、TPPA[3]。

TRUST主要是測定血清中的心磷脂抗體。梅毒螺旋體內部具有類脂質抗原,在螺旋體屬中各群之間或同螺旋體以外均可出現交叉反應,而且采用肉眼觀測,其漏檢率較高,故特異性、敏感度較低,但其價格低廉、操作簡便。TRUST檢測在梅毒感染的不同時期檢出率差別較大。除Ⅱ期檢出率高外,其他各期極易漏檢出現假陰性結果。由于心磷脂存在其他組織中,自身免疫性疾病,如類風濕性關節(jié)炎、乙型肝炎患者、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、活動性肺結核等甚至正常人都能產生抗心磷脂抗體,導致生物性假陽性結果。在Ⅰ期、Ⅲ期和潛伏期梅毒時,可呈陰性反應,TRUST作為過篩試驗具有操作簡便、快速、價格低廉的特點,是其他方法替代不了的,但其靈敏度、特異性、符合率均低于 TPPA[4]。

梅毒螺旋體 TPPA是檢測梅毒特異性抗體,感染者一旦感染后,該抗體終身檢測為陽性。TPPA是在人工載體明膠粒子上包被純化后梅毒菌株成分,滴加樣本后樣本中的抗體與菌株結合,凝聚于明膠顆粒,用于梅毒抗體的檢測。明膠顆粒凝集試驗法能偶敏感的反應梅毒螺旋體抗體的滴度,但其在相鄰滴度的判斷常與檢測者的主觀感覺有關[5]。TPPA是將純化的致病性梅毒的精致菌株成分包被在人工載體明膠粒子上,檢測血清中相應的抗體。TPPA敏感性、特異性較高,但檢測時間較長,結果判定常有主觀色彩,不適于大批量的篩選試驗[6-8]。

以上研究說明,TPPA的敏感性和特異性優(yōu)于 TRUST檢測法,是臨床常用的梅毒確診試驗,但其不適合大量標本的篩查,更適合用于 TRUST測定陽性后的確診試驗,建議臨床檢驗醫(yī)師應予以注意。

1 吳志華.皮膚性病學第 3版 [M].廣州:廣東科學技術出版社,2001:132.

2 張學軍.皮膚性病學 [M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2003:486.

3 阮樂幸.TP-ELISA用于血清梅毒篩查的可行性評價 [J].中國輸血雜志,2002,15(6):413.

4 周渭珩,裘新民,洪為松,等.梅毒膠體金法和 TPPA診斷梅毒的比較研究 [J].浙江臨床醫(yī)學,2004,6(4):324-325.

5 李衛(wèi)紅,曹付群,張振武,等.駐馬店市 1997—2006年淋病、梅毒流行病學分析及預防策略 [J].現代預防醫(yī)學,2008,35(1):150-151.

6 曾英.梅毒血清學檢測方法比較及臨床應用探討 [J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2007,28(11):1054-1055.

7 孔麗蕊.3種梅毒血清學檢測方法的評價 [J].檢驗醫(yī)學與臨床,2008,5(18):1119-1120.

8 胡艷文,邢雙,于曉紅,等.梅毒血清學不同檢測方法的檢測結果評價 [J].山西醫(yī)學雜志,2009,10:942.