氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)甜菜夜蛾敏感基線(xiàn)的測(cè)定和幼蟲(chóng)體重的影響

張琴，王少麗，楊愿愿，董鈞鋒

（1.河南科技大學(xué)植物保護(hù)系，洛陽(yáng)，471003；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所）

氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)甜菜夜蛾敏感基線(xiàn)的測(cè)定和幼蟲(chóng)體重的影響

張琴1，王少麗2，楊愿愿1，董鈞鋒1

（1.河南科技大學(xué)植物保護(hù)系，洛陽(yáng)，471003；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所）

田間采集的甜菜夜蛾室內(nèi)飼養(yǎng)20代后，以飼料混毒法測(cè)定了氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)其3齡幼蟲(chóng)的毒力。結(jié)果表明，藥劑處理 48 h 和 72 h 后，LC50值分別為 0.747 5 mg/L 和 0.218 2 mg/L。 藥后 48 h，在最低濃度（0.004 3 mg/L）處理下，甜菜夜蛾幼蟲(chóng)體重略高于對(duì)照，但未差異顯著水平，隨著處理濃度的提高，幼蟲(chóng)體重顯著降低。本研究為氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)甜菜夜蛾的毒力提供了可參考的敏感基線(xiàn)，同時(shí)表明其對(duì)甜菜夜蛾具有較高的殺蟲(chóng)活性。

氯蟲(chóng)苯甲酰胺；甜菜夜蛾；敏感基線(xiàn)；幼蟲(chóng)體重

氯蟲(chóng)苯甲酰胺是美國(guó)杜邦公司開(kāi)發(fā)上市的一種鄰甲酰胺基苯甲酰胺類(lèi)高效廣譜殺蟲(chóng)劑，可防治常見(jiàn)的鱗翅目害蟲(chóng)和部分其他害蟲(chóng)[6,7]。其作用機(jī)理是激活害蟲(chóng)魚(yú)尼丁受體，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)源鈣離子釋放失控，使肌肉細(xì)胞的收縮功能難以為繼[8]。經(jīng)氯蟲(chóng)苯甲酰胺處理后的害蟲(chóng)表現(xiàn)為進(jìn)食迅速停止、反胃和肌肉癱瘓，直至死亡。氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)非靶標(biāo)節(jié)肢動(dòng)物具有良好的選擇性，對(duì)哺乳動(dòng)物、魚(yú)類(lèi)和鳥(niǎo)類(lèi)的毒性極低，對(duì)作物也十分安全，是一種環(huán)境友好、作用機(jī)理獨(dú)特的新型殺蟲(chóng)劑。

對(duì)害蟲(chóng)進(jìn)行化學(xué)防治之前，需要監(jiān)測(cè)害蟲(chóng)對(duì)特定殺蟲(chóng)劑的抗藥性程度，這是指導(dǎo)殺蟲(chóng)藥劑合理使用的重要依據(jù)，但任何一種抗性監(jiān)測(cè)方法都必須首先建立敏感毒力基線(xiàn)，將其作為參比的標(biāo)準(zhǔn)[9]。氯蟲(chóng)苯甲酰胺作用機(jī)制獨(dú)特，因此在大田應(yīng)用初期，害蟲(chóng)對(duì)其應(yīng)該均處于敏感狀態(tài)。本研究于2009年度采集田間甜菜夜蛾的自然種群，室內(nèi)飼養(yǎng)20代后，測(cè)定了氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)其幼蟲(chóng)的毒力活性，建立了甜菜夜蛾對(duì)該藥劑的敏感基線(xiàn)，同時(shí)測(cè)定了經(jīng)氯蟲(chóng)苯甲酰胺處理后，甜菜夜蛾幼蟲(chóng)體重的變化，以期為以后甜菜夜蛾對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺的抗性監(jiān)測(cè)和抗性治理工作提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試藥劑為20%氯蟲(chóng)苯甲酰胺懸浮劑，美國(guó)杜邦公司生產(chǎn)。

甜菜夜蛾試蟲(chóng)采自河南洛陽(yáng)郊區(qū)大蔥田，室內(nèi)連續(xù)飼養(yǎng)20代以上。養(yǎng)蟲(chóng)室內(nèi)溫度為25～28℃，相對(duì)濕度為 60%～70%，光周期為 L∶D＝18 h∶6 h。 初孵幼蟲(chóng)在塑料養(yǎng)蟲(chóng)盒（直徑10 cm，高2.3 cm）內(nèi)群體飼養(yǎng)，每盒100頭左右，3齡后單獨(dú)飼養(yǎng)于平底指形管內(nèi)。甜菜夜蛾幼蟲(chóng)飼養(yǎng)以人工飼料，主要成分為熟大豆粉、麥胚粉和抗壞血酸等。化蛹后第3天把蛹從指形管內(nèi)取出，經(jīng)4%甲醛水溶液消毒15 min，用自來(lái)水沖洗并晾干后放入羽化籠內(nèi)待羽化。成蟲(chóng)羽化后轉(zhuǎn)入交配籠內(nèi)，籠內(nèi)懸掛塑料紙供成蟲(chóng)產(chǎn)卵，以10%的蜂蜜水補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)。

1.2 室內(nèi)毒力測(cè)定

采用飼料混毒法。按照常規(guī)方法制作甜菜夜蛾幼蟲(chóng)人工飼料，待飼料溫度降至40℃時(shí)，分別加入不同濃度的氯蟲(chóng)苯甲酰胺水溶液，用電動(dòng)九陽(yáng)料理機(jī)攪拌60 s后迅速倒入無(wú)菌培養(yǎng)皿內(nèi)，制成不同濃度的混毒飼料，冷卻后放入4℃冰箱內(nèi)備用。

甜菜夜蛾初孵幼蟲(chóng)在常規(guī)人工飼料上飼養(yǎng)至2齡末，挑選生長(zhǎng)一致的試蟲(chóng)單獨(dú)置于空的指形管內(nèi)，塞緊棉塞以防逃逸。待幼蟲(chóng)蛻皮進(jìn)入3齡后饑餓3～6 h，然后飼以系列濃度的混毒飼料。共設(shè)置5個(gè)濃度，每個(gè)濃度設(shè)置3次重復(fù)，每次重復(fù)處理試蟲(chóng)30頭，以飼喂常規(guī)人工飼料為空白對(duì)照，試驗(yàn)條件同飼養(yǎng)條件。以試蟲(chóng)身體明顯縮短、用毛筆尖輕觸不能協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)為死亡標(biāo)準(zhǔn)，處理48 h和72 h時(shí)檢查幼蟲(chóng)死亡情況，計(jì)算死亡率。

1.3 藥劑處理后幼蟲(chóng)體重的測(cè)定

氯蟲(chóng)苯甲酰胺處理甜菜夜蛾試蟲(chóng)的方法同室內(nèi)毒力測(cè)定方法。處理48 h和72 h后，在電子天平上分別稱(chēng)取各系列藥劑濃度下存活的全部幼蟲(chóng)體重。

1.4 數(shù)據(jù)分析

幼蟲(chóng)死亡率數(shù)據(jù)經(jīng)Probit軟件處理，求出藥劑毒力回歸曲線(xiàn)、計(jì)算LC50值及95%置信限等。幼蟲(chóng)體重?cái)?shù)據(jù)經(jīng)SPSS13.0軟件進(jìn)行方差分析，并用 Duncan’s的新復(fù)極差法 （P=0.05）檢驗(yàn)其差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)毒力測(cè)定

氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)甜菜夜蛾3齡幼蟲(chóng)有較高的殺蟲(chóng)活性，在2.666 7 mg/L濃度下，處理10～30 min即停止取食，并伴有嘔吐現(xiàn)象。由表1可以看出，處理48 h后，氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)甜菜夜蛾3齡幼蟲(chóng)的LC50為0.747 5 mg/L，處理72 h后，藥劑毒力顯著增加，LC50降為0.218 2 mg/L，比48 h時(shí)的LC50值下降了70.8%。

2.2 不同濃度氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)甜菜夜蛾3齡幼蟲(chóng)體重的影響

不同濃度氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)甜菜夜蛾3齡幼蟲(chóng)體重的影響見(jiàn)表2。從表2可以看出，藥后48 h，在最低藥劑濃度（0.004 3 mg/L）處理下，幼蟲(chóng)體重略高于對(duì)照，但未達(dá)到顯著水平；隨著處理濃度的提高，幼蟲(chóng)體重顯著降低。最高濃度（2.666 7 mg/L）處理下，存活的甜菜夜蛾幼蟲(chóng)體重僅為1.16 mg，而空白對(duì)照處理下，體重為6.36 mg。藥后72 h，不同濃度氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)甜菜夜蛾3齡幼蟲(chóng)的體重均有顯著的影響，幼蟲(chóng)體重隨藥劑濃度的提高呈下降趨勢(shì)，最高濃度處理下，幼蟲(chóng)體重僅為1 mg。取食對(duì)照飼料48 h至72 h，甜菜夜蛾3齡幼蟲(chóng)生長(zhǎng)迅速，24 h內(nèi)體重由6.36 mg增長(zhǎng)到了 8.92 mg，增加了40.3%。取食混毒飼料48 h至72 h，僅在0.106 7 mg/L濃度下，甜菜夜蛾幼蟲(chóng)體重增加了5.6%，在其他濃度下，均保持不變或略有降低。

3 結(jié)論與討論

氯蟲(chóng)苯甲酰胺作用于害蟲(chóng)的肌肉組織，見(jiàn)效快，高濃度下10～20 min甜菜夜蛾幼蟲(chóng)即停止取食并伴有嘔吐、身體卷曲縮短等中毒癥狀，但死亡過(guò)程較為緩慢，低濃度下，從出現(xiàn)中毒癥狀到徹底死亡可持續(xù)5～10 d，所以在試驗(yàn)過(guò)程中，判斷害蟲(chóng)的死亡標(biāo)準(zhǔn)尤為關(guān)鍵。陳煥瑜等[10]以輕觸蟲(chóng)體不能協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)為小菜蛾幼蟲(chóng)死亡標(biāo)準(zhǔn)，測(cè)出氯蟲(chóng)苯甲酰胺處理48 h后對(duì)小菜蛾3齡幼蟲(chóng)的LC50為0.808 mg/L；而程?hào)|美等[11]以輕觸蟲(chóng)體不動(dòng)作為判斷小菜蛾幼蟲(chóng)死亡標(biāo)準(zhǔn)，測(cè)出氯蟲(chóng)苯甲酰胺處理48 h后對(duì)小菜蛾 3齡幼蟲(chóng)的LC50為 13.90 mg/L，兩者相差 16.2倍。經(jīng)過(guò)多次觀(guān)察比較，作者以甜菜夜蛾幼蟲(chóng)身體明顯縮短、輕觸不能協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)為幼蟲(chóng)死亡標(biāo)準(zhǔn)。按照這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)判定死亡的甜菜夜蛾幼蟲(chóng)即使轉(zhuǎn)移到寄主葉片或者對(duì)照人工飼料上也不能存活，因此這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)適合作為死亡判斷標(biāo)準(zhǔn)，但需要研究者細(xì)心觀(guān)察、謹(jǐn)慎判定。

表1 氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)甜菜夜蛾3齡幼蟲(chóng)的室內(nèi)毒力測(cè)定

表2 不同濃度氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)甜菜夜蛾3齡幼蟲(chóng)體重的影響

室內(nèi)毒力測(cè)定選用的甜菜夜蛾3齡初幼蟲(chóng)均進(jìn)行了饑餓處理。研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加高濃度的氯蟲(chóng)苯甲酰胺時(shí)，甜菜夜蛾幼蟲(chóng)很快停止取食并出現(xiàn)中毒癥狀，而藥劑含量較低時(shí)幼蟲(chóng)取食量較大，生長(zhǎng)發(fā)育較快，但取食一段時(shí)間后絕大部分幼蟲(chóng)停止取食，個(gè)別幼蟲(chóng)可以繼續(xù)取食而存活下來(lái)。所以在田間進(jìn)行防治時(shí)要選用較高濃度藥劑進(jìn)行噴施，防止害蟲(chóng)對(duì)葉片過(guò)多取食，造成品質(zhì)下降和產(chǎn)量損失。

本研究測(cè)定了氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)甜菜夜蛾3齡幼蟲(chóng)的敏感度，可作為以后進(jìn)行抗性監(jiān)測(cè)時(shí)的參考敏感基線(xiàn)。氯蟲(chóng)苯甲酰胺是一種作用機(jī)理獨(dú)特的新型殺蟲(chóng)劑，在實(shí)驗(yàn)室條件下對(duì)甜菜夜蛾3齡幼蟲(chóng)表現(xiàn)出較高的殺蟲(chóng)活性，而且使幼蟲(chóng)身體縮短，體重降低，極大地減弱了其幼蟲(chóng)的生長(zhǎng)，是防治甜菜夜蛾的理想殺蟲(chóng)劑，但其在田間的實(shí)際防治效果尚需進(jìn)一步試驗(yàn)研究。

[1]張彬，劉懷，王進(jìn)軍，等.甜菜夜蛾研究進(jìn)展[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2008，24（10）：427-433.

[2]王開(kāi)運(yùn)，姜興印，儀美芹，等.甜菜夜蛾的抗藥性變化及治理對(duì)策的研究[J].農(nóng)藥，2001，40（6）：29-32.

[3]蘭亦全，趙士熙，吳剛.甜菜夜蛾對(duì)三種擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)殺蟲(chóng)劑的抗性遺傳力及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估 [J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，2006，17（3）：468-471.

[4]黃琳瑞，王成菊，鄭明奇，等.甜菜夜娥對(duì)蟲(chóng)酰肼的抗藥性研究初報(bào)[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)，2005，7（4）：376-378.

[5]Mou1ton J K,Pepper D A,Jansson R J,et a1.Pro-active management of beet-armyworm(Lepidoptera:Noctuidae)resistance to tebufenozide and methoxyfenozide base1ine monitoring,risk assessment,and iso1ation of resistance[J].J E-con Entomo1,2002,95:414-424.

[6]Tohnishi M,Nakao K,Furuya T,et a1.F1ubendiamide,a nove1 c1ass insecticide with high activity againstLepidoptera[J].J Pestic Sci,2005,30:354-360.

[7]徐尚成，俞幼芬，王曉軍，等.新殺蟲(chóng)劑氯蟲(chóng)苯甲酰胺及其研究開(kāi)發(fā)進(jìn)展[J].現(xiàn)代農(nóng)藥，2008，7（5）：8-11.

[8]閆瀟敏，寧斌科，王列平，等.新型鄰酰胺基苯甲酰胺類(lèi)殺蟲(chóng)劑氯蟲(chóng)苯甲酰胺的合成與應(yīng)用[J].世界農(nóng)藥，2009，31（6）：20-23.

[9]吳益東，陳松，凈新娟，等.棉鈴蟲(chóng)抗藥性監(jiān)測(cè)方法——浸葉法敏感毒力基線(xiàn)的建立及其應(yīng)用 [J].昆蟲(chóng)學(xué)報(bào)，2001，44（1）：56-61.

[10]陳煥瑜，張德雍，黃華，等.氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)廣東小菜蛾殺蟲(chóng)活性和田間藥效評(píng)價(jià) [J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，37（2）：96-98

[11]程?hào)|美，何龍鳳，張志祥.6種殺蟲(chóng)劑對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)的室內(nèi)毒力活性比較[J].長(zhǎng)江蔬菜（學(xué)術(shù)版），2010（2）：68-70.

Effects of Chlorantraniliprole on Baseline Sensitivity and Weight of Larval ofSpodoptera exigua

ZHANG Qin1,WANG Shao1i2,YANG Yuanyuan1,DONG Junfeng1
(1.Department of P1ant Protection,Henan University of Science and Techno1ogy,Luoyang 471003;2.Institute of Vegetab1es and F1owers,Chinese Academy of Agricu1tura1 Sciences)

Beet armyworm,Spodoptera exigua,were co11ected from the fie1d and reared in 1aboratory for 20 generations,and the sensitivity of 3th 1arvae ofS.exiguato ch1orantrani1ipro1e was investigated.The resu1ts showed that LC50va1ues were 0.747 5 mg/L and 0.218 2 mg/L after insecticide treatment for 48 h and 72 h.The 1arva1 weight ofS.exiguais a 1itt1e higher than the contro1 after ch1orantrani1ipro1e treatment with the 1owest concentration (0.004 3 mg/L)for 48 h.However,there was significant difference between treatment and contro1 with the increase of ch1orantrani1ipro1e concentration.This study provided base1ine for the susceptibi1ity of S.exigua to ch1orantrani1ipro1e and revea1ed its higher toxicity to this insect.

Ch1orantrani1ipro1e;Spodoptera exigua;Base1ine sensitivity;Weight of 1arva1

10.3865/j.issn.1001-3547.2010.18.028

公益性行業(yè)科研專(zhuān)項(xiàng)（200803007）和北京市自然科學(xué)基金項(xiàng)目（6102021）

張琴（1985-），女，碩士研究生，研究方向?yàn)槭卟撕οx(chóng)防治

2010-06-22