• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    農(nóng)藥和化肥對無尾兩棲類蝌蚪的毒性效應(yīng)研究進(jìn)展

    2010-04-14 23:03:53李貞李丕鵬徐齊艷陸宇燕
    生態(tài)毒理學(xué)報 2010年2期
    關(guān)鍵詞:蝌蚪化肥毒性

    李貞,李丕鵬,徐齊艷,陸宇燕,*

    1.沈陽師范大學(xué)中國兩棲爬行動物保護(hù)與繁育研究中心遼寧省生物進(jìn)化與生物多樣性重點實驗室,沈陽110034

    2.遼寧省腫瘤醫(yī)院,沈陽110042

    農(nóng)藥和化肥對無尾兩棲類蝌蚪的毒性效應(yīng)研究進(jìn)展

    李貞1,李丕鵬1,徐齊艷2,陸宇燕1,*

    1.沈陽師范大學(xué)中國兩棲爬行動物保護(hù)與繁育研究中心遼寧省生物進(jìn)化與生物多樣性重點實驗室,沈陽110034

    2.遼寧省腫瘤醫(yī)院,沈陽110042

    以兩棲動物研究環(huán)境污染物的毒性效應(yīng)進(jìn)而監(jiān)測環(huán)境的變化,已成為國內(nèi)外的研究熱點.兩棲類的胚胎發(fā)育和變態(tài)過程對水的依賴性極強(qiáng),而且鰓和皮膚有很強(qiáng)的滲透性,當(dāng)其受到污染脅迫時,在細(xì)胞、組織及生理生化水平上都會發(fā)生顯著變化,進(jìn)而會影響其存活和生長發(fā)育.在總結(jié)國內(nèi)外相關(guān)研究基礎(chǔ)上,綜述和分析了農(nóng)藥、化肥(氮肥)對無尾兩棲類蝌蚪的行為表現(xiàn)、生長發(fā)育、組織結(jié)構(gòu)和生理生化變化等方面的毒性效應(yīng),以期為農(nóng)藥、化肥的水環(huán)境監(jiān)測及合理使用提供全面的科學(xué)依據(jù).

    蝌蚪;化肥;農(nóng)藥;環(huán)境監(jiān)測

    近20年來,世界范圍內(nèi)兩棲動物種群數(shù)目急劇減少及畸形蛙大量出現(xiàn)的現(xiàn)象提示水環(huán)境污染已成為威脅其生存的主要因素之一(Blaustein et al.,1994;Wake,1991;牛海崗等,2009).水生毒理學(xué)的研究,以往主要集中在魚類和水生無脊椎動物,近年來的研究指出:無尾兩棲類的幼體——蝌蚪,由于其在變態(tài)前有外鰓暴露于水環(huán)境、其皮膚缺少保護(hù)結(jié)構(gòu)致使具有較高的滲透性,水環(huán)境中的污染物能較快地在其體內(nèi)大量富集,因此被廣泛用作指示生物進(jìn)行水體有害物質(zhì)及水質(zhì)的監(jiān)測,并取得了較好的效果(周景明等,2006;Stansley et al.,1992;Mann et al.,2009).

    近年來,隨著農(nóng)產(chǎn)品需求量的不斷增加,農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中各種農(nóng)藥和化肥的施用量也在不斷增加.由于產(chǎn)品劑型、施用方法及超量使用等原因,農(nóng)藥、化肥在增產(chǎn)的同時也對環(huán)境帶來了嚴(yán)重的負(fù)面效應(yīng).利用無尾兩棲類蝌蚪研究農(nóng)藥、化肥的毒性效應(yīng)進(jìn)而監(jiān)測其對環(huán)境的影響,已成為近年來國內(nèi)外研究的熱點(Hyaes et al.,2003;Ortiz-Santaliestra and Sparling,2007;De Wijer et al.,2003;呂秀芬,1989;南旭陽等,2000;苑宇哲等,2005;丁道韌等,1992;苗德志和李松梧,2007).

    本文以無尾兩棲類蝌蚪的活動行為、胚胎發(fā)育及生長發(fā)育、組織結(jié)構(gòu)和生理生化變化等作為生物學(xué)指標(biāo),對農(nóng)藥、化肥對其的毒性效應(yīng)進(jìn)行了綜述,以期為農(nóng)藥、化肥的水環(huán)境監(jiān)測及合理使用提供全面的科學(xué)依據(jù).

    1 農(nóng)藥污染及其對蝌蚪的毒性效應(yīng)

    1.1 農(nóng)藥污染源

    目前我國農(nóng)藥使用中存在的突出問題是使用不合理(王雪芳,2004),嚴(yán)重破壞了農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境,主要表現(xiàn)在:1)大多數(shù)農(nóng)藥直接噴灑于農(nóng)作物表面,其中僅有10%左右藥劑被吸收,而大部分農(nóng)藥則隨大氣流動或雨水流失.大氣中的農(nóng)藥分子與人體皮膚和眼睛粘膜等接觸,或通過呼吸道吸入可引起疾病,嚴(yán)重的會導(dǎo)致急性中毒、慢性中毒,甚至致癌;有些持續(xù)性有機(jī)污染物甚至已污染到了兩極地區(qū).2)農(nóng)藥噴施時,部分農(nóng)藥粗顆粒、粉粒落入土壤中,大氣中的農(nóng)藥顆粒也會沉降進(jìn)入土壤中,這些農(nóng)藥在土壤中的分解緩慢,而數(shù)量又在不斷增加,導(dǎo)致土壤物理化學(xué)性質(zhì)的改變,進(jìn)而直接影響作物的生長;3)土壤中農(nóng)藥殘留量及衍生物含量增加,對土壤中有益的動物及微生物具有明顯的危害,降低了土壤的生物活性,破壞了土壤的生態(tài)環(huán)境;4)土壤中的農(nóng)藥被灌溉水、雨水沖刷到江河湖海中,污染水源,造成水生生物的大量死亡,同時也使?jié)O業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)遭受到經(jīng)濟(jì)損失(邱小燕,2008).

    1.2 農(nóng)藥對無尾兩棲類蝌蚪的毒性效應(yīng)

    由于農(nóng)藥的有效成分均具有一定毒副作用,在無尾兩棲類的棲息地水域受農(nóng)藥污染后,必將導(dǎo)致在卵孵化及后期的發(fā)育和變態(tài)中出現(xiàn)不同程度的損傷,故表現(xiàn)出較高的死亡率和某些生理缺陷的發(fā)生.

    1.2.1 對蝌蚪的活動行為和存活率的影響

    在對有機(jī)磷農(nóng)藥(二嗪磷)染毒的卞氏皺蛙(Ptychadena bibroni)蝌蚪的觀察中發(fā)現(xiàn),隨著農(nóng)藥濃度的升高,蝌蚪表現(xiàn)出逐漸強(qiáng)烈的回避反應(yīng),即呈現(xiàn)不正常的游泳姿態(tài),軀體作劇烈的扭動;隨著染毒時間的延長,蝌蚪對觸動的反應(yīng)逐漸遲鈍.暴露于梯度濃度的二嗪磷溶液中兩周的蝌蚪,死亡率隨著濃度的升高而升高,在25μg·L-1中蝌蚪的死亡率高達(dá)75%(Ezemonye and Ilechie,2007);而與有機(jī)磷農(nóng)藥有相近作用的有機(jī)氯農(nóng)藥(DDT)對蝌蚪染毒情況的報道中,也指出其可以引起蝌蚪“多動癥”(Sparling et al.,2001).對于這兩種農(nóng)藥的作用機(jī)理,目前認(rèn)為:農(nóng)藥通過與蝌蚪乙酰膽堿酯酶的酯解部位結(jié)合,致使該酶失活,從而使乙酸膽堿積聚,引起膽堿能神經(jīng)先興奮后抑制的一系列神經(jīng)系統(tǒng)癥狀(黃伯俊,1993;Berrill et al.,1998;Broomhall,2005),神經(jīng)系統(tǒng)的紊亂直接導(dǎo)致蝌蚪運(yùn)動異常的發(fā)生,以及蝌蚪最后的死亡.

    1.2.2 對胚胎發(fā)育和胚后發(fā)育的影響

    在無尾兩棲類個體發(fā)育過程中,農(nóng)藥對其有顯著影響.首先,農(nóng)藥對蝌蚪有致死效應(yīng),但是致死率會受發(fā)育期的影響.通常孵化期、開口期對農(nóng)藥刺激的敏感性較強(qiáng),而孵化期之前、開口期之前及開口期之后的敏感程度均小于這兩個特殊時期,而在上述三者之間,孵化期的死亡率最低(盧祥云等,2002).此種情況與不同發(fā)育時期的特點有關(guān),孵化期胚胎脫離了卵膠膜的保護(hù)作用,致使農(nóng)藥成分可直接滲透進(jìn)入正在發(fā)育中的胚胎,故死亡率明顯提升;而到開口期后,蝌蚪開始了主動吞咽動作,農(nóng)藥溶液隨水流進(jìn)入蝌蚪消化道,又一次導(dǎo)致了死亡率的攀升.而經(jīng)過了孵化期與開口期的“選擇”存活下來的蝌蚪,可通過自身的應(yīng)激修復(fù)表現(xiàn)出一定的適應(yīng)性(Pilar Honrubia et al.,1993),這種能力存在著明顯的個體差異.其次,農(nóng)藥對蝌蚪具有顯著的致畸效應(yīng).如部分農(nóng)藥可引起蝌蚪代謝受阻導(dǎo)致其體內(nèi)的滲透壓改變,引起胚體水腫,表現(xiàn)在:蝌蚪尾部和軀體出現(xiàn)明顯扭曲,腹部膨大呈透明狀,四肢發(fā)育不健全(Bridges,2000);由于蝌蚪體壁結(jié)構(gòu)簡單,而其神經(jīng)系統(tǒng)及脊索(柱)又位于體背部的表層,故極易受到農(nóng)藥成分的浸蝕,進(jìn)而引起神經(jīng)系統(tǒng)及脊索(柱)發(fā)育的異常,導(dǎo)致蝌蚪出現(xiàn)扭曲(Bridges,2000;楊曉梅等,2001).最后,農(nóng)藥對蝌蚪的體重、體長也有顯著影響.如黑眶蟾蜍(Bufo melanostictus)蝌蚪在較高濃度的除草劑稻草隆溶液里,反應(yīng)敏感,攝食活動相對頻繁,在蝌蚪的體重、體長的數(shù)值上遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過對照組(劉木養(yǎng)等,2006);而斑腿泛樹蛙(Polypedates leucomystax)蝌蚪在較高濃度的農(nóng)藥溶液中卻表現(xiàn)出明顯的生長抑制現(xiàn)象(姚丹,2005;呂秀芬,1989),這種毒性效應(yīng)的差異可能是由農(nóng)藥種類及其毒性機(jī)制不同以及物種差異所致.

    1.2.3 對組織結(jié)構(gòu)的影響

    鰓是蝌蚪與外界進(jìn)行氣體交換的器官,由于鰓絲及其內(nèi)毛細(xì)血管的結(jié)構(gòu)相當(dāng)簡單,故其對水環(huán)境中毒物具有極強(qiáng)的敏感性.農(nóng)藥可導(dǎo)致蝌蚪鰓結(jié)構(gòu)損傷.如在對伊比利亞綠蛙(Rana perezi)蝌蚪的觀察中,發(fā)現(xiàn)氨基甲酸酯類殺蟲劑(ZZ-Aphox)染毒第1天的蝌蚪鰓上皮細(xì)胞部分萎縮退化呈不連續(xù)狀態(tài),但由于刺激了蝌蚪自身的應(yīng)激機(jī)制,使上皮細(xì)胞粘液分泌增多,故經(jīng)一段時間后結(jié)構(gòu)呈恢復(fù)趨勢(Pilar Honrubia et al.,1993).

    肝臟是蝌蚪重要的解毒器官,在農(nóng)藥作用下,蝌蚪肝臟結(jié)構(gòu)與功能受損.主要表現(xiàn)在:肝臟外觀顏色變淺、肝細(xì)胞排列緊密、肝血竇增大、可見局部區(qū)域出現(xiàn)壞死現(xiàn)象、脂滴及糖原堆積、線粒體數(shù)量減少等(Pilar Honrubia et al.,1993).農(nóng)藥在蝌蚪體內(nèi)代謝過程及蝌蚪的應(yīng)激過程中均會產(chǎn)生較多的活性氧自由基,其可引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)(主要的膜性結(jié)構(gòu))的損傷,同時也可激活肝臟內(nèi)有關(guān)抗氧化酶及一些代謝酶的活性,引起肝細(xì)胞代謝的異常(Pilar Honrubia et al.,1993;姚丹,2005;劉陽,2006).

    農(nóng)藥同樣可影響蝌蚪另一個與解毒排毒有關(guān)的器官——腎臟.如在經(jīng)敵敵畏染毒暴露10天后,斑腿泛樹蛙(Polypedates leucomystax)蝌蚪腎臟明顯萎縮,體積顯著縮?。╬<0.01)(姚丹,2005),蝌蚪腎臟受損進(jìn)而造成代謝廢物排泄障礙,死亡率上升.

    除此之外,水環(huán)境中的農(nóng)藥可通過蝌蚪皮膚的滲透,作用于分化中的生殖原基,導(dǎo)致蝌蚪性腺發(fā)育缺陷,嚴(yán)重影響兩棲類個體的正常繁殖功能,同時也導(dǎo)致畸形個體的增長,這是導(dǎo)致兩棲動物物種衰退的重要原因(Daughton and Tenres,1999;Hayes et al.,2003;Reeder et al.,1998;Sower et al.,2000).

    1.2.4 對抗氧化系統(tǒng)的影響

    生物體在長期進(jìn)化過程中,形成了一套完整的抗氧化系統(tǒng),用于清除體內(nèi)多余的活性氧.抗氧化酶作為抗氧化系統(tǒng)的重要組成,在診斷環(huán)境污染問題中發(fā)揮著重要的生物指示作用.動物體內(nèi)的抗氧化酶主要包括:超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、過氧化物酶(POD)、谷胱甘肽過氧化物(GSH-PX)和谷胱甘肽(GSH)等.當(dāng)生物體遭受氧化脅迫時,其抗氧化酶就會被誘導(dǎo)或抑制(劉碩和周啟星,2008).

    以不同濃度的阿特拉津、敵百蟲、敵敵畏等溶液對無尾兩棲類蝌蚪進(jìn)行染毒,其抗氧化系統(tǒng)變化均表現(xiàn)出相似規(guī)律:在較低濃度時抗氧化酶(SOD和CAT)作用不明顯,或具有一定的誘導(dǎo)作用,而在高濃度時卻表現(xiàn)出極顯著的抑制作用(謝文平和馬廣智,2003;楊麗華等,2003;苑宇哲等,2004;侯亞妮,2007;耿保榮等,2006).這種雙向作用的機(jī)理可能是當(dāng)蝌蚪機(jī)體中活性氧產(chǎn)生初期,誘導(dǎo)了機(jī)體應(yīng)激反應(yīng),抗氧化酶活性升高;而當(dāng)氧自由基大量產(chǎn)生并累積后,會導(dǎo)致抗氧化酶系的酶變性,從而降低了其活性,也有可能是通過使SOD合成酶失活或是酶的轉(zhuǎn)錄或翻譯途徑受阻所致,具體的作用機(jī)制有待于進(jìn)一步探討.

    1.2.5 對遺傳物質(zhì)的影響

    農(nóng)藥對無尾兩棲類蝌蚪的遺傳毒性已被大量實驗證實.由于蝌蚪的紅細(xì)胞較大且易于觀察,因此蝌蚪紅細(xì)胞微核被廣泛用于水環(huán)境中農(nóng)藥遺傳毒性的檢測,并獲得了較好的效果(Békaert et al.,1999;Hooftman and De Raat,1982;Grinfeld et al.,1986;Jaylet et al.,1986;湯新慧,1999;南旭陽,2000;周雪瑞等,2005;苑宇哲等,2005).研究表明:農(nóng)藥會誘導(dǎo)蝌蚪紅細(xì)胞微核及核異常產(chǎn)生,使微核率及核異常率顯著升高(封少龍等,2004).Feng等(2004)采用微核試驗及彗星試驗研究了兩種新型殺蟲劑(Imidaeloprid和RH-5849)對黑斑蛙(Rana nigronaculata)蝌蚪及成體血細(xì)胞的遺傳毒性,發(fā)現(xiàn)當(dāng)Imidaeloprid和RH-5849的濃度分別為8mg·L-1和40mg·L-1時,蝌蚪血細(xì)胞微核率比對照組有顯著提高;而濃度分別為0.05mg·L-1和5mg·L-1時,對黑斑蛙成體紅細(xì)胞DNA就有極顯著的損傷作用,且具有明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系.鐘碧瑾等(2009)采用微核試驗和單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)研究發(fā)現(xiàn)三唑磷暴露下沼水蛙(Hylarana guentheri)蝌蚪微核率和核異常率顯著升高.蝌蚪細(xì)胞微核率的高低與農(nóng)藥劑量、處理時間、細(xì)胞有絲分裂的速度等因素有關(guān)(王蕊芳等,1996;苑宇哲等,2005;樓允東和吳萍,1996;孟順龍等,1996).

    2 化肥污染及其對蝌蚪的毒性效應(yīng)

    2.1 化肥污染源

    化肥是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)最基礎(chǔ)且最重要的物質(zhì)投入,主要包括單元素化肥如氮肥、磷肥、鉀肥和由兩種至三種元素混合組成的復(fù)合肥.據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)統(tǒng)計,化肥在對農(nóng)作物增產(chǎn)的總份額中約占40%~60%.盡管化肥在農(nóng)業(yè)發(fā)展中有著不可替代的作用,但由于其使用量逐年增加,使土壤無機(jī)化現(xiàn)象愈加嚴(yán)重.據(jù)報導(dǎo)農(nóng)作物對氮肥的綜合利用率僅為20%~30%,其余部分則滲透到淺層地下水,或隨雨水、灌溉用水流入地表水體中溶解形成N,不斷的累積導(dǎo)致水體氮素含量過高,引起水體的富營養(yǎng)化.而N在生物體內(nèi)被還原成N,其可將血紅蛋白氧化為高鐵血紅蛋白,從而使血紅蛋白的載氧能力下降,誘發(fā)高鐵血紅蛋白血癥,嚴(yán)重時使生物窒息死亡;同時水體的富營養(yǎng)促進(jìn)了藻類的大量繁殖,致使水中的溶氧量降低,引起水質(zhì)惡化進(jìn)而也會威脅到其他水生生物的正常生存(苗德志和李松梧,2007).近年來兩棲類動物數(shù)量的大量衰退可能也與此原因有關(guān)(Watt and Jarvis,1997;Rouse et al.,1999).各種化肥中,氮肥用量最大,且對水體的污染最為嚴(yán)重,因此目前有關(guān)化肥對無尾兩棲類蝌蚪的毒性效應(yīng)研究主要以氮肥為主.

    2.2 氮肥對無尾兩棲類蝌蚪的毒性效應(yīng)

    2.2.1 對活動行為的影響

    硝酸鹽類化肥對蝌蚪的毒性效應(yīng)首先表現(xiàn)在行為異常方面(Baker and Waights,1993).歐洲蟾蜍(Bufo bufo)蝌蚪接觸硝酸銨化肥溶液初期表現(xiàn)出無方向性的劇烈游動,且身體扭曲,但放回清水活動異常的現(xiàn)象逐漸減輕甚至消失;染毒6天后,蝌蚪出現(xiàn)勾尾、打圈游動;隨著濃度升高或時間延長,出現(xiàn)攝食率降低、游動無力且不平衡、碰觸反應(yīng)遲鈍、體表黏液增多,最后蝌蚪活力明顯降低直至癱瘓而死.本實驗室對磷酸二銨染毒花背蟾蜍(Bufo raddei.)的觀察也證明了這一點,同時發(fā)現(xiàn)剛開始染毒的蝌蚪還有明顯的排便量增加的現(xiàn)象.造成這些現(xiàn)象的原因可能是多方面的,蝌蚪在主動吞咽作用時氮肥溶液進(jìn)入其消化道,影響了腸道中的有益共生菌群,導(dǎo)致其消化功能異常,而表現(xiàn)出攝食頻率的降低(Hecnar,1995);此外,氮肥可能通過滲透作用造成神經(jīng)系統(tǒng)的損傷,進(jìn)而引起了蝌蚪運(yùn)動方式的異常,并改變了蝌蚪對環(huán)境的敏感性(Xu and Oldham,1997);而蝌蚪體內(nèi)的NO2-引起的血紅蛋白攜氧能力快速降低,最終影響蝌蚪的各種生理功能,導(dǎo)致其死亡(Train,1979).

    2.2.2 對存活率的影響

    氮肥對蝌蚪的致死效應(yīng)較為復(fù)雜.首先,不同物種蝌蚪對化肥的敏感程度不同(Geiffis-Kyle and Ritchie,2007;Hecnar,1995;XuandOldham,1997).其次,不同化肥對同種蝌蚪的致死濃度也存在明顯差異,如碳酸氫銨對黑斑蛙(Rana nigronaculata)的致死濃度幾乎是尿素的48倍(丁道韌等,1992).最后,氮肥的致死效應(yīng)受蝌蚪發(fā)育期的顯著影響,如用同濃度的硝酸銨化肥溶液處理鋤足蟾(Pelobates cultripes)蝌蚪4天,新孵化的個體幾乎全部死亡,而發(fā)育期較晚的蝌蚪死亡率則不到40%(Ortiz-Santaliestra et al.,2006),此現(xiàn)象說明蝌蚪不同發(fā)育期可能對化肥的敏感程度存在顯著差異.現(xiàn)有實驗結(jié)果均提示由于蝌蚪在不同發(fā)育時期具有不同的形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理功能,導(dǎo)致其對外界環(huán)境因素刺激的反應(yīng)不同,在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中對化肥的使用,應(yīng)結(jié)合蝌蚪的發(fā)育時間合理安排,調(diào)整使用濃度、使用時間或種類,從而在保證農(nóng)作物對肥料需求基礎(chǔ)上,盡可能地避開在蝌蚪發(fā)育的“脆弱”階段使用對蝌蚪傷害大、或者超出蝌蚪最大耐受濃度的使用量.

    2.2.3 對生長發(fā)育和免疫系統(tǒng)的影響

    氮肥可引起蝌蚪發(fā)育畸形(Marco and Blaustein,1999).以硝酸鹽類化肥為例,當(dāng)濃度在100mg·L-1時即可導(dǎo)致歐洲蟾蜍(Bufo bufo)蝌蚪17%的畸形率,并呈現(xiàn)出隨濃度升高,畸形率升高的趨勢(Xu and Oldham,1997).畸形的類型有:蝌蚪頭、胸部發(fā)育不對稱、眼睛畸形、腹部水腫透明、尾部有水腫的瘤泡出現(xiàn)及勾尾等現(xiàn)象(Hecnar,1995).蝌蚪正常情況下,可以維持自身的滲透壓,但在化肥溶液中浸浴后,由于化肥的離子作用,破壞了蝌蚪正常的調(diào)節(jié)功能,失去了維護(hù)體內(nèi)正常滲透壓能力.而由于化肥對蝌蚪的損傷作用是一個由表及里的過程,因此,隨著染毒時間的延長,化肥對蝌蚪的作用勢必會深入至蝌蚪生理功能的調(diào)節(jié)方面,既影響到各種分泌腺的功能,甚至殃及蝌蚪的免疫調(diào)節(jié)方面.

    以化肥的降解副產(chǎn)物——高氯酸鹽處理南方豹蛙(Rana sphenocephala)蝌蚪,用硝酸鉀化肥浸染美洲林蛙(Rana sylvatica)蝌蚪均發(fā)現(xiàn)其變態(tài)發(fā)育時間延長,甚至有很大比例不能完成變態(tài)發(fā)育過程而死亡(Ortiz-Santaliestra and Sparling,2007;Greulich and Pflugmacher,2003;Geiffis-Kyle,2005).組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)蝌蚪的甲狀腺腺泡體積明顯縮小,進(jìn)而表現(xiàn)出對甲狀腺激素分泌的抑制(Ortiz-SantaliestraandSparling,2007;Greulichand Pflugmacher,2003;Geiffis-Kyle,2005).有實驗指出硝酸鹽化肥染毒3周后,蝌蚪體內(nèi)白細(xì)胞的數(shù)量和血紅蛋白的含量均明顯降低,即蝌蚪的免疫系統(tǒng)在化肥的作用下,也表現(xiàn)出了一定程度的損傷(Rouse et al.,1999;Dappen,1983).

    2.2.4 對組織結(jié)構(gòu)及遺傳物質(zhì)的影響

    有關(guān)化肥對蝌蚪組織結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)的影響尚鮮有報道.本實驗室初步觀察發(fā)現(xiàn),氮肥磷酸二銨可對花背蟾蜍(Bufo raddei.)肝臟組織造成明顯的損傷,其顯微及超微結(jié)構(gòu)變化表現(xiàn)在:肝細(xì)胞呈明顯的脂肪變性,出現(xiàn)由于淋巴細(xì)胞浸潤形成的斑塊狀壞死區(qū)域,核內(nèi)異染色質(zhì)濃縮,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張,部分細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)髓樣結(jié)構(gòu),且血竇內(nèi)的淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和枯否細(xì)胞逐漸增多;肝細(xì)胞糖原含量隨磷酸二銨作用時間延長而降低,隨化肥濃度升高而增多;蛋白含量和乳酸脫氫酶活性隨染毒濃度升高和時間延長有增加的趨勢;肝細(xì)胞內(nèi)不同類型的抗氧化酶活性雖然變化有所不同,但酶活性變化均有明顯的劑量-效應(yīng)和時間-效應(yīng).此外,還發(fā)現(xiàn)磷酸二銨對蝌蚪也具有遺傳毒性,可誘導(dǎo)蝌蚪紅細(xì)胞微核及核異常的產(chǎn)生,并且紅細(xì)胞微核率、核異常率與濃度、染毒時間呈現(xiàn)明顯的相關(guān)性;從實驗結(jié)果看,低于大田施肥量的磷酸二銨,已經(jīng)構(gòu)成了對蝌蚪組織結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)的毒性效應(yīng)(王銳等,2009).

    3 結(jié)語

    近幾十年來,全球范圍內(nèi)的兩棲類動物出現(xiàn)了較快的種群數(shù)量下降,其中一些物種已經(jīng)滅絕.由于兩棲類個體發(fā)育的特殊性,其對生境的島嶼化、水質(zhì)的污染、疾病、人為過度捕捉等多種因素表現(xiàn)出高度的敏感性(于鳳蘭和陸宇燕,2006).農(nóng)藥與化肥的不合理使用所引起的水體污染是造成這一現(xiàn)象的重要原因.

    農(nóng)藥可對無尾兩棲類蝌蚪的影響目前研究較為深入,其對蝌蚪活動行為、胚后發(fā)育、組織結(jié)構(gòu)、抗氧化系統(tǒng)、遺傳物質(zhì)等造成的損傷已有充分的實驗依據(jù),但是還有一些問題值得進(jìn)一步探討:1)蝌蚪通過體內(nèi)哪些途徑對農(nóng)藥的毒性產(chǎn)生抗性或適應(yīng)性,從而在低毒農(nóng)藥染毒下死亡率維持在較低水平?2)關(guān)于農(nóng)藥對蝌蚪組織器官的損傷研究較少,其中各器官組織產(chǎn)生功能損害的機(jī)制是否與細(xì)胞凋亡有關(guān)?3)農(nóng)藥的神經(jīng)毒性是否只與抑制乙酰膽堿酯酶活性有關(guān)?對于神經(jīng)沖動的傳入和傳出過程是否也會有影響?4)農(nóng)藥對蝌蚪生殖系統(tǒng)發(fā)育的影響有哪些具體途徑參與,目前國內(nèi)外缺乏此部分研究.5)農(nóng)藥對蝌蚪內(nèi)分泌和免疫系統(tǒng)的毒性研究相對不足.

    與農(nóng)藥相比,國內(nèi)外關(guān)于化肥對無尾兩棲類蝌蚪影響的研究相對較少,對化肥對蝌蚪的毒性研究主要集中在存活率、孵化率及畸形率變化等宏觀方面,對微觀方面的研究相對貧乏.建議進(jìn)一步的研究可從如下幾方面進(jìn)行:1)從分子(基因、蛋白)、細(xì)胞、器官和整體水平上,綜合探討化肥對蝌蚪產(chǎn)生損害的機(jī)制與規(guī)律.2)化肥污染是否會引起蝌蚪個體生殖系統(tǒng)的損傷,進(jìn)而影響其正常的繁殖,最終導(dǎo)致種群的衰減,還有待于證實.3)確定蝌蚪體內(nèi)對化肥污染較敏感的生物指標(biāo),將會為化肥污染的監(jiān)測提供極大的幫助.4)關(guān)于化肥對蝌蚪遺傳物質(zhì)的影響尚需進(jìn)一步研究.

    Baker J,Waights V.1993.The effect of sodium nitrate on the growth and survival of toad tadpoles(Bufo bufo)in the laboratory[J].Herpetological Journal,3:147-148

    Békaert C,Rast C,Ferrier V,Bispo A,Jourdain M J,Vasseur P.1999.Use of in vitro(Ames and Mutatox tests)and in vivo(Amphibian Micronucleus test)assays to assess the genotoxicity of leachates from a contaminated soil[J].Organic Geochemistry,30(2):953-962

    Berrill M,Coulson D,McGllivray L,Pauli B.1998.Toxicity of endosulfan to aquatic stages of anuran amphibians[J].Environmental Toxicology and Chemistry,17(9):1738-1744

    BlausteinAR,WakeDB,SousaWP.1994.Amphibian declines:Judgingstability,persistence,andsusceptibilityof populationstolocalandglobalextinctions[J].Conservation Biology,8(1):60-71

    Bridges C M.2000.Long-term effects of pesticides exposure at various life stages of the southern leopard frog(Rana sphenocephala)[J].Archives of Environmental Contamination and Toxicology,39(1):91-96

    Broomhall S D.2005.Measuring chemical impacts on amphibian ecotoxicologyandbehaviouraldataingovernmentalregulation[J].Applied Herpetology,2(3):259-285

    Dappen G E.1983.Effects of nitrates upon hemapoietic,lymphoid and vascular tissues of todpoles and frogs[J].Proceedings of the Nebraska Academy of Sciences and Affiliated Societies,92:23

    Daughton C G,Ternes T A.1999.Pharmaceuticals and personal care products in the environment:agents of subtle change?[J].Environmental Health Perspectives,107(S6):907-938

    De Wijer P,Watt P J,Oldham R S.2003.Amphibian decline and aquatic pollution:Effects of nitrogenous fertilizer on survival and development of larvae of the frog Rana temporaria[J].Applied Herpetology,1(1-2):3-12

    Ding D R,Luo C Q,Yang M,Zhang S Q,Fang J P,Liu S W.1992.Effect of several commonly used chemical fertilizers on the lethal ofRana nigronaculatatadpole[J].Journalof Huanggang Teachers College,12(3):65-66(in Chinese)

    Ezemonye L I N,Ilechie I.2007.Acute and chronic effects of organophosphatepesticides(Basudin)toamphibiantadpoles(Ptychadena bibroni)[J].African Journal of Biotechnology,6(13):1554-1558

    Feng S L,Kong Z M,Wang W X,Wang X M,Peng P A.2004.Genotoxicological studies of two pesticides to tadpoles and frogs of Rana nigrinaculata Hallowe II by micronuclei test and singlecellgelelectrophoresisassay[J].JournalofAquatic

    Biology,28(1):52-57(in Chinese)

    Feng S L,Kong Z M,Wang X M,Zhao L R,Peng P A.2004.Acute toxicity and genotoxicity of two novel pesticides on amphibian,Rana N.Hallowell[J].Chemosphere,56(5):457-463

    Geiffis-KyleKL,RitchieME.2007.Amphibiansurvival,growth and development in response to mineral nitrogen exposure and predator cues in the field:an experimental approach[J].Population Ecology,152(4):633-642

    Geiffis-Kyle K L.2005.Ontogenic delays in effects of nitrite exposure on tiger salamanders(Ambystoma tigrinum tigrinum)and wood frogs(Rana sylvatica)[J].Environmental Toxicity and Chemistry,24(6):1523-1527

    Geng B R,Xue Q Q,Lian Y,Yao D.2006.Comparison of sensitivity to Dichlorvos of Rhacophorus megacephalus tadpole at different developmental stages[J].Acta Zoologica Sinica,52(5):892-898(in Chinese)

    Greulich K,Pflugmacher S.2003.Differences in susceptibility of variouslifestagesofamphibianstopesticideexposure[J].Aquatic Toxicology,65(3):329-336

    Grinfeld S,Jaylet A,Siboulet R.1986.Micronuclei in red blood cells of the newt,Pleurodeles waltl after treatment with benzo[a]pyrene:dependence on dose,length of exposure,posttreatment time,and uptake of the drug[J].Environmental Mutagenesis,8(1):41-52

    Hecnar S J.1995.Acute and chronictoxicityofammonium nitratefertilizertoamphibiansfromsouthernOntario[J].Environmental Toxicity and Chemistry,14(12):2131-2137

    HooftmanRN,DeRaatWK.1982.Inductionofnuclear anomalies(micronuclei)in the peripheral blood erythrocytes of the eastern mudminnow Umbra pygmaea by rthyl methanesulphonate[J].Mutation Research,104(1-3):147-152

    Hou Y N.2007.The Toxic Effect of Insecticide Trichlorfon on the Tadpoles of Bufo[D].Lanzhou:Lanzhou University,28-29(in Chinese)

    Huang B J.1993.Manual of Pesticide Toxicity and Toxicology[M].Beijing:People’s Medical Publishing Press(in Chinese)

    Hyaes T,Haston K,Tsui M,Hoang A,Haeffle C,Vonk A.2003.Atrazine-induced hermaphroditism at 0.1ppb in American leopard frogs(Rana pipiens):laboratory and field evidence[J].Environmental Health Perspectives,111(4):568-575

    Jaylet A,Depaies P,Ferrier V,Grinfeld S,Siboulet R.1986.A new micronucleus test using peripheral blood erythrocytes of the newt Pleurodeles waltl to detect mutagens in fresh-water pollution[J].Mutation Research,164:245-257

    Liu M Y,Chen W T,Li D F.2006.Effects of herbicide-Daocaolong on growth and development of tadpoles of toad(Bufo melanosticus Schneider)[J].Sichuan Journal of Zoology,25(2):382-385(in Chinese)

    LiuS,ZhouQX.2008.Researchadvancesinantioxidant enzymes for diagnosing environmental contamination[J].Chinese Journal of Ecology,27(10):1791-1798(in Chinese)

    Liu Y.2006.The Effect and Mechanism of Herbicide Acetochlor on the Liver of Bufo[D].Lanzhou:Lanzhou University,41(in Chinese)

    Lou Y D,Wu P.1996.Induction of micronuclei and nuclear anomalies in erythrocytes of loach by N-methyl-N-nitrosoguanidine[J].China Environmental Science,16(4):275-278(in Chinese)

    LüXF.1989.Effectsofherbicides,pesticides,chemical fertilizers on the development of Rana nigromaculata Hallowell embryo[J].ChineseScienceBulletin,(24):1898-1900(in Chinese)

    Lu X Y,Chen H B,Han Y P.2002.Poisonous effect of some common pesticides on embryo and tadpole of Rana nigromaculata[J].Sichuan Journal of Zoology,21(2):84-85(in Chinese)

    Mann R M,Hyne R V,Choung C B,Wilson S P.2009.Amphibians and agricultural chemicals:Review of the risks in a complexenvironment[J].EnvironmentalPollution,157(11):2903-2927

    MarcoA,BlausteinAR.1999.Theeffectsofnitriteon behavior and metamorphosis in Cascades frogs(Rana cascadae)[J].Environmental Toxicology and Chemistry,18(5):946-949 Meng S L,Chen J Z,Leng C M.2006.Micronucleus test and itsapplicationinwaterpollutionmonitoring[J].Reservoir Fisheries,26(4):71-74(in Chinese)

    Miao D Z,Li S W.2007.Control and pollution of the waters induced by fertilizers[J].Agro-Environment&Development,(2):58-60(in Chinese)

    Nan X Y,Chen H,Zhang B S,Ye R,Zhang X F.2000.Effectsofherbicide(Glyphosate)onmicronucleiandnuclear anomalies in Erythrocyte of Bufo bufo gargarizans[J].Journal of Wenzhou Teachers College,21(6):57-58(in Chinese)

    Niu H G,Wang H Y,Zhang Y H.2009.Toxicity effects of bisphenol A on growth and development of Rana chensinensis tadpoles[J].Asian Journal of Ecotoxicology,4(3):408-414(in Chinese)

    Ortiz-Santaliestra M E,Marco A,Fernández M J,Lizana M.2006.Influence of developmental stage on sensitivity to ammonium nitrateofaquaticstagesofamphibians[J].Environmental Toxicology and Chemistry,25(1):105-111

    Ortiz-Santaliestra M E,Sparling D W.2007.Alteration of larval developmentandmetamorphosisbynitrateandperchloratein southern leopard frogs(Rana sphenocephala)[J].Archives of Environmental Contamination and Toxicology,53(4):639-646

    Pilar Honrubia M,Paz Herráez M P,Alvarez R.1993.The carbamate insecticide ZZ-AphoxRinduced structural changes of gills,liver,gall-bladder,heart and notochord ofRana perezi tadpoles[J].ArchivesofEnvironmentalContaminationand Toxicology,25(2):184-191

    Qiu X Y.2008.Pesticide pollution and ecological environment protection[J].Modern Agricultural Science,15(8):53-54(in Chinese)

    Reeder A L,Foley G L,Niehols D K,Hansen L Q,Wikoff B,FaehS,EisoldJ,WheelerMB,WanrerR,MurphyJE,Beasley V R.1998.Forms and prevalence of intersexuality and effects of environmental contaminants on sexuality in cricket frogs(Acriscrepitans)[J].EnvironmentalHealthPerspectives,106(5):261-266

    Rouse J D,Bishop C A,Struger J.1999.Nitrogen pollution:an assessment of its threat to amphibian survival[J].Environmental Health Perspectives,107(10):799-803

    Sower S A,Reed K L,Babbitt K J.2000.Limb malformations andabnormalsexhormoneconcentrationsinfrogs[J].Environmental Health Perspectives,108(11):1085-1090

    Sparling D W,Fellers G M,McConnell L L.2001.Pesticides andamphibianpopulationdeclinesinCalifornia,USA[J].Environmental Toxicity and Chemistry,20(7):1591-1595

    Stansley W,Widjeskog L,Roscoe D E.1992.Lead contamination andmobilityinsurfacewaterattrapandskeetranges[J].Bulletin of Environmental Contamination and Toxicology,49(5):640-647

    Tang X H.1999.Study on micronucleus in tadpole erythrocytes induced by shampoos[J].Shanghai Environmental Sciences,4(4):185-188(in Chinese)

    Train R E.1979.QualityCriteriaforWater[M].London:Castrle House Pub.

    Wake D B.1991.Declining amphibian populations[J].Science,253(5022):860

    Wang A M.1990.The toxicity of mercury on the tadpoles of Bufo viridis[J].Xinjiang University(Natural Science),7(3):82-87(in Chinese)

    Wang C,Li Z,Lu Y Y,Li P P.2009.The research of DAP onthegenetictoxicityandliverdamageofB.bufo[C].Academic Seminar of Amphibians and Reptiles Zoology Animals Branch of Chinese Society in 2009.Nanjing(in Chinese)

    Wang R F,He W S,Wu S F,Yuan T,Wang X,Yang Q Z,Li B Y,Xu H M.1996.Mutagencity and background content chemicals of water quality of source water and tap water in Kunming II.The micronucleus test of tadpole erythrocyte and chromosomalaberrationandSCEstestofCHOcell[J].Zoological Research,17(4):469-475(in Chinese)

    Wang X F.2004.The pollution of pesticide and the protection of ecological environment[J].Journal of Guangxi Agriculture,(2):21-24(in Chinese)

    Watt P J,Jarvis P.1997.Survival analysis in palmate newts exposedtoammoniumnitrateagriculturalfertilizer[J].Ecotoxicology,6(6):355-362

    Xie W P,Ma G Z.2003.Effects of Cypermethrin on superoxide dismutase(SOD)activities in gill and liver tissues of grass carp fingerlings[J].Fisheries Science,22(6):5-7(in Chinese)

    XuQ,OldhamRS.1997.Lethalandsublethaleffectsof nitrogen fertilizer ammonium nitrate on common toad(Bufo bufo)tadpoles[J].ArchivesofEnvironmentalContaminationand Toxicology,32(3):298-303

    Yang L H,Fang Z Q,Zheng W B,Wu Y Y,Ma G Z.2003.Experimentwitheffectofcadmiumonactivityofsuperoxide dismutase in gill and liver tissue of crucian[J].Journal of Safety and Environment,3(3):13-16(in Chinese)

    Yang X M,Tan Z J,Yuan Y,Zhai Y M.2001.Effects of acetochlorondevelopmentofearlyembryosofBofobobo gargarizans[J].Acta Zoologica Sinica,47(S1):125-130(in Chinese)

    Yao D.2005.The Toxic Effect of Dichlorvos and Butachlor on Tadpoles of Polypedates leucomystax[D].Xiamen:Fujian Normal University,42(in Chinese)

    Yu F L,Lu Y Y.2006.On the status of threatened Chinese endemic amphibians[J].Sichuan Journal of Zoology,25(2):323-325(in Chinese)

    Yuan Y Z,Xu S X,Yao C S,Liu Z J,Li X D,Wang Y Z.2005.Effect of atrazine on micronucleus and nucleus anomalies in erythrocytes of Rana adenopleura tadpoles[J].Chinese Journal of Applied and Environmental Biology,11(3):333-336(in Chinese)

    Zhong B J,Huang Z C,Lin L,Fang Z H,Geng Y,Geng B R.2009.Genotoxicity of the pesticide triazophos toHylarana guentheri tadpoles[J].Asian Journal of Ecotoxicology,4(2):244-250(in Chinese)

    Zhou J M,Qin Z F,Xu X B.2006.Application of amphibian inenvironmentaltoxicology[J].JournalofEnvironmentand Health,23(4):369-371(in Chinese)

    Zhou X R,Ding Y R,Zhuge Y,Zhu H,Zhang J,Chen L Y,Hu Y M.2005.The effects of Liyun River on the micronucleus andabnormalnucleusofredcelloftadpoles[J].Jiangsu Preventive Medicine,16(1):1-3(in Chinese)

    中文參考文獻(xiàn)

    丁道韌,羅初強(qiáng),楊敏,張樹青,方建平,劉世旺.1992.幾種常用化肥對黑斑蛙蝌蚪的致死作用[J].黃岡師專學(xué)報,12(3):65-66

    封少龍,孔志明,王五香,王新明,彭平安.2004.應(yīng)用微核試驗和單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)來檢測農(nóng)藥對青蛙蝌蚪及成體的遺傳毒性[J].水生生物學(xué)報,28(1):52-57

    耿保榮,薛清清,連迎,姚丹.2006.不同發(fā)育階段的斑腿樹蛙蝌蚪對敵敵畏遺傳毒性的敏感性[J].動物學(xué)報,52(5):892-898侯亞妮.2007.殺蟲劑敵百蟲對花背蟾蜍蝌蚪的毒性效應(yīng)研究[D].蘭州:蘭州大學(xué),28-29

    黃伯俊.1993.農(nóng)藥毒理-毒性手冊[M].北京:人民衛(wèi)生出版社劉木養(yǎng),陳偉庭,李東風(fēng).2006.除草劑稻草隆對蝌蚪生長發(fā)育的影響[J].四川動物,25(2):382-385

    劉碩,周啟星.2008.抗氧化酶診斷環(huán)境污染研究進(jìn)展[J].生態(tài)學(xué)雜志,27(10):1791-1798

    劉陽.2006.除草劑乙草胺對花背蟾蜍肝臟的影響及機(jī)理[D].蘭州:蘭州大學(xué),41

    樓允東,吳萍.1996.亞硝基胍對泥鰍紅細(xì)胞微核及核異常的誘發(fā)[J].中國環(huán)境科學(xué),16(4):275-278

    盧祥云,陳海波,韓曜平.2002.幾種農(nóng)藥對黑斑蛙胚胎及蝌蚪的毒性[J].四川動物,21(2):84-85

    呂秀芬.1989.除草劑、農(nóng)藥、化肥對黑斑蛙胚胎發(fā)育的影響[J].科學(xué)通報,(24):1898-1900

    孟順龍,陳家長,冷春梅.2006.微核試驗及其在水污染監(jiān)測中的應(yīng)用[J].水利漁業(yè),26(4):71-74

    苗德志,李松梧.2007.談?wù)劵蕦λ虻奈廴炯捌浞乐危跩].農(nóng)業(yè)環(huán)境與發(fā)展,(2):58-60

    南旭陽,陳浩,張碧雙,葉榮,張雪芬.2000.除草劑“甘草膦”對蟾蜍外周血紅細(xì)胞微核及核異常的影響[J].溫州師范學(xué)院學(xué)報,21(6):57-58

    牛海崗,王宏元,張育輝.2009.雙酚A對中國林蛙蝌蚪生長發(fā)育的毒性效應(yīng)[J].生態(tài)毒理學(xué)報,4(3):408-414

    邱小燕.2008.農(nóng)藥污染與生態(tài)環(huán)境保護(hù)[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科學(xué),15(8):53-54

    湯新慧.1999.洗發(fā)香波誘發(fā)蝌蚪紅細(xì)胞微核的研究[J].上海環(huán)境科學(xué),4(4):185-188

    王蕊芳,賀維順,吳世芳,袁棠,王欣,楊瓊芝,李寶云,許慧明.1996.昆明水源水和自來水水質(zhì)致突變性及化學(xué)背景值II:蝌蚪紅細(xì)胞微核和細(xì)胞染色體畸變及SCE實驗[J].動物學(xué)研究,17(4):469-475

    王銳,李貞,陸宇燕,李丕鵬.2009.化肥磷酸二銨對花背蟾蜍遺傳毒性和肝臟損傷的研究[C].中國動物學(xué)會兩棲爬行動物學(xué)分會2009年學(xué)術(shù)研討會.南京

    王雪芳.2004.農(nóng)藥污染與生態(tài)環(huán)境保護(hù)[J].廣西農(nóng)學(xué)報,(2):21-24

    謝文平,馬廣智.2003.氯氰菊酯對草魚鰓和肝組織超氧化物歧化酶(SOD)活性的影響[J].水產(chǎn)科學(xué),22(6):5-7

    楊麗華,方展強(qiáng),鄭文彪,伍育源,馬廣智.2003.鎘對鯽魚鰓和肝臟超氧化物歧化酶活性的影響[J].安全與環(huán)境學(xué)報,3(3):13-16

    楊曉梅,譚志軍,苑怡,翟玉梅.2001.乙草胺對中華大蟾蜍(Bufo bufo gargarizans)早期胚胎發(fā)育的影響[J].動物學(xué)報,47(S1):125-130

    姚丹.2005.敵敵畏和丁草胺對斑腿泛樹蛙蝌蚪的毒性影響研究[D].廈門:福建師范大學(xué),42

    于鳳蘭,陸宇燕.2006.中國特有兩棲類受脅現(xiàn)狀分析[J].四川動物,25(2):323-325

    苑宇哲,徐士霞,姚春生,劉志君,李旭東,王躍招.2005.阿特拉津?qū)椙偻埽≧ana adenopleura)蝌蚪微核和核異常的影響[J].應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報,11(3):333-336

    鐘碧瑾,黃增財,林玲,房振華,耿艷,耿寶榮.2009.殺蟲劑三唑磷對沼水蛙(Hylarana guentheri)蝌蚪的遺傳毒性研究[J].生態(tài)毒理學(xué)報,4(2):244-250

    周景明,秦占芬,徐曉白.2006.兩棲類動物在環(huán)境毒理學(xué)研究中的應(yīng)用[J].環(huán)境與健康雜志,23(4):369-371

    周雪瑞,丁月榮,諸葛瑩,朱慧,張婧,陳凌云,胡月梅.2005.里運(yùn)河水對蝌蚪紅細(xì)胞微核率及核異常的影響[J].江蘇預(yù)防醫(yī)學(xué),16(4):1-3◆

    Research Advances in Toxicological Effects of Pesticide and Fertilizer Pollutants on the Anuran Larvae

    LI Zhen1,LI Pi-peng1,XU Qi-yan2,LU Yu-yan1,*

    1.Center for China Herp-Breeding and Conservation Research,Key Laboratory of Evolution and Biodiversity in Liaoning,Shenyang Normal University,Shenyang 110034
    2.Liaoning Cancer Hospital&Institute,Shenyang 110042

    The amphibian is considered as a suitable animal model to determine the toxicity of polluted environmental and to monitor the environmental health.The embryonic development and metamorphosis of amphibians are highly dependent on the water,and the gill and skin are highly permeable.When exposed to pollutants,amphibians can be changed obviously on the level of the molecule expression,cellular and tissue structure,and physiology.The pollutants may affect the survival and growth of amphibians.In this paper,it was summarized and reviewed that the toxic effect of pesticides and fertilizers on the behavior,growth and development,structural,physiological and biochemical changes of amphibian larvae,in order to provide a comprehensive scientific basis for monitoring the environment of water and logical rational use of agricultural compounds.

    tadpole;fertilizer;pesticides;environmental monitoring

    12 October 2009accepted1 December 2009

    1673-5897(2010)2-287-08

    X171.5

    A

    2009-10-12錄用日期:2009-12-01

    國家自然科學(xué)基金項目(No.30470206;No.30870276);遼寧省優(yōu)秀人才支持計劃和省高校科研計劃項目

    李貞(1984—),女,碩士研究生;*通訊作者(Corresponding author),E-mail:luyuyan2001@yahoo.com

    陸宇燕(1962─),女,教授,研究方向:細(xì)胞生物學(xué);兩棲爬行動物生物學(xué)及其保護(hù)與繁育.

    猜你喜歡
    蝌蚪化肥毒性
    7月我國化肥進(jìn)口量增加
    海里的巨頭蝌蚪
    現(xiàn)代農(nóng)業(yè)離不開化肥
    化肥農(nóng)藥減量,怎么減?
    動物之最——毒性誰最強(qiáng)
    從蝌蚪到青蛙
    化肥需求增長不均 有人歡喜有人憂
    胖胖一家和瘦瘦一家(11)
    蝌蚪
    RGD肽段連接的近紅外量子點對小鼠的毒性作用
    日韩高清综合在线| 精品无人区乱码1区二区| 男人操女人黄网站| 国产精品日韩av在线免费观看 | 亚洲av片天天在线观看| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 成人永久免费在线观看视频| 岛国在线观看网站| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 一级a爱视频在线免费观看| 老司机靠b影院| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 日韩欧美免费精品| 国产成人av教育| 免费在线观看亚洲国产| www.精华液| 亚洲 欧美一区二区三区| 淫妇啪啪啪对白视频| 久久国产亚洲av麻豆专区| 99久久99久久久精品蜜桃| 悠悠久久av| 岛国视频午夜一区免费看| 又大又爽又粗| 国产精品一区二区在线不卡| 一二三四在线观看免费中文在| 亚洲国产看品久久| 夜夜爽天天搞| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 亚洲av五月六月丁香网| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 国产高清有码在线观看视频 | 欧美激情高清一区二区三区| 老司机福利观看| 国产成+人综合+亚洲专区| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 久久久水蜜桃国产精品网| 午夜福利欧美成人| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 欧美乱码精品一区二区三区| 亚洲中文字幕日韩| 丝袜在线中文字幕| 欧美在线黄色| cao死你这个sao货| 伦理电影免费视频| 国产成人欧美| 亚洲人成77777在线视频| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 国产成人免费无遮挡视频| 亚洲成人免费电影在线观看| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 老鸭窝网址在线观看| 色av中文字幕| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 99热只有精品国产| 又大又爽又粗| 欧美最黄视频在线播放免费| 国产av在哪里看| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 精品午夜福利视频在线观看一区| av免费在线观看网站| 日韩欧美一区视频在线观看| 高清毛片免费观看视频网站| 国内精品久久久久精免费| 免费在线观看影片大全网站| 国产一区二区在线av高清观看| 久久九九热精品免费| 欧美久久黑人一区二区| 在线观看www视频免费| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 久99久视频精品免费| 欧美最黄视频在线播放免费| 男女午夜视频在线观看| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 欧美黄色淫秽网站| 老司机在亚洲福利影院| 国产91精品成人一区二区三区| www.www免费av| 国产精品一区二区在线不卡| 国产高清视频在线播放一区| 大陆偷拍与自拍| 99久久精品国产亚洲精品| 一本综合久久免费| 丰满的人妻完整版| 一级作爱视频免费观看| 国产精品亚洲美女久久久| 无遮挡黄片免费观看| 精品免费久久久久久久清纯| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 激情视频va一区二区三区| 精品乱码久久久久久99久播| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 成年女人毛片免费观看观看9| 色综合站精品国产| 国产精品av久久久久免费| 这个男人来自地球电影免费观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 国产一区二区三区在线臀色熟女| 日韩av在线大香蕉| 久久午夜亚洲精品久久| 青草久久国产| 美女 人体艺术 gogo| 亚洲精品国产一区二区精华液| 欧美大码av| 亚洲国产精品久久男人天堂| 最近最新中文字幕大全电影3 | 亚洲精品国产一区二区精华液| 国内精品久久久久精免费| 麻豆一二三区av精品| 国产亚洲av高清不卡| 久久精品国产清高在天天线| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 色婷婷久久久亚洲欧美| 欧美黑人欧美精品刺激| 最新在线观看一区二区三区| 岛国在线观看网站| 日韩三级视频一区二区三区| 大码成人一级视频| 身体一侧抽搐| 亚洲av第一区精品v没综合| 午夜成年电影在线免费观看| 久久婷婷成人综合色麻豆| 成人亚洲精品一区在线观看| 精品久久久久久成人av| 国产高清视频在线播放一区| 满18在线观看网站| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 丝袜美腿诱惑在线| 欧美大码av| 日本免费一区二区三区高清不卡 | 亚洲国产欧美网| 精品不卡国产一区二区三区| 美女大奶头视频| а√天堂www在线а√下载| 国产精品久久电影中文字幕| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 大型av网站在线播放| 国产高清videossex| 999精品在线视频| 一个人免费在线观看的高清视频| 国产精品永久免费网站| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 最近最新免费中文字幕在线| 精品高清国产在线一区| 亚洲片人在线观看| 久久午夜亚洲精品久久| 欧美精品啪啪一区二区三区| 亚洲第一青青草原| 欧美中文日本在线观看视频| 欧美精品亚洲一区二区| 露出奶头的视频| 性少妇av在线| 精品国产乱子伦一区二区三区| 99国产精品一区二区三区| 国产亚洲av高清不卡| 国产成人系列免费观看| 亚洲人成电影观看| netflix在线观看网站| avwww免费| 91国产中文字幕| 91精品国产国语对白视频| 久久久国产欧美日韩av| aaaaa片日本免费| 一本综合久久免费| 91精品三级在线观看| 桃色一区二区三区在线观看| 少妇 在线观看| АⅤ资源中文在线天堂| 亚洲精品国产一区二区精华液| 国产一级毛片七仙女欲春2 | 成年女人毛片免费观看观看9| 少妇 在线观看| 久久久久久国产a免费观看| 亚洲一区高清亚洲精品| 亚洲中文字幕日韩| 欧美成人性av电影在线观看| 人人澡人人妻人| 精品人妻1区二区| 中亚洲国语对白在线视频| 日日爽夜夜爽网站| 国产精品久久久人人做人人爽| 亚洲人成电影免费在线| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产精品二区激情视频| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 亚洲精品在线美女| 69av精品久久久久久| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 午夜a级毛片| 午夜精品久久久久久毛片777| 成人永久免费在线观看视频| 亚洲成人国产一区在线观看| 久久久久国产一级毛片高清牌| 精品国产亚洲在线| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 欧美一级毛片孕妇| 亚洲专区中文字幕在线| a在线观看视频网站| 精品卡一卡二卡四卡免费| 午夜福利一区二区在线看| 国产成人av教育| 国产乱人伦免费视频| 国产精品日韩av在线免费观看 | АⅤ资源中文在线天堂| 国产高清videossex| 神马国产精品三级电影在线观看 | 51午夜福利影视在线观看| 两个人看的免费小视频| 午夜影院日韩av| 禁无遮挡网站| 国产精品98久久久久久宅男小说| 99国产综合亚洲精品| 国产精品一区二区在线不卡| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 日本一区二区免费在线视频| 亚洲熟女毛片儿| 叶爱在线成人免费视频播放| 看免费av毛片| av欧美777| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 精品国产乱子伦一区二区三区| 男人舔女人的私密视频| 免费高清在线观看日韩| 黑人欧美特级aaaaaa片| 精品一品国产午夜福利视频| 亚洲免费av在线视频| 日本黄色视频三级网站网址| 69av精品久久久久久| 久久 成人 亚洲| 精品一品国产午夜福利视频| 少妇的丰满在线观看| 欧美日韩黄片免| 搡老妇女老女人老熟妇| 看片在线看免费视频| 欧美黑人精品巨大| 最新在线观看一区二区三区| 午夜视频精品福利| 叶爱在线成人免费视频播放| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 成人特级黄色片久久久久久久| 久久精品影院6| 在线av久久热| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 免费av毛片视频| 国产欧美日韩一区二区精品| 99久久99久久久精品蜜桃| 日本欧美视频一区| 日本免费a在线| 日韩欧美在线二视频| 国产精品国产高清国产av| 男人舔女人下体高潮全视频| 狠狠狠狠99中文字幕| 午夜久久久久精精品| 午夜视频精品福利| 国产精品精品国产色婷婷| 欧美黄色淫秽网站| 亚洲国产精品合色在线| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 免费高清在线观看日韩| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 黄色a级毛片大全视频| 伦理电影免费视频| 亚洲精品国产区一区二| 国产av在哪里看| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 精品福利观看| 在线观看一区二区三区| 视频在线观看一区二区三区| √禁漫天堂资源中文www| 黄网站色视频无遮挡免费观看| av网站免费在线观看视频| 少妇的丰满在线观看| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 婷婷六月久久综合丁香| av网站免费在线观看视频| 成人18禁在线播放| 亚洲中文字幕日韩| 岛国视频午夜一区免费看| 精品欧美国产一区二区三| 精品一区二区三区av网在线观看| 九色亚洲精品在线播放| 免费高清视频大片| 精品熟女少妇八av免费久了| 最近最新中文字幕大全电影3 | 久久久国产精品麻豆| 成人手机av| 午夜久久久久精精品| 国产亚洲av高清不卡| 最好的美女福利视频网| 亚洲视频免费观看视频| 给我免费播放毛片高清在线观看| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 12—13女人毛片做爰片一| 嫩草影院精品99| 校园春色视频在线观看| 国产精品免费视频内射| 一二三四社区在线视频社区8| av片东京热男人的天堂| 久久国产精品影院| 国产精品一区二区三区四区久久 | 国产三级黄色录像| 老司机福利观看| 国产视频一区二区在线看| 黄色视频不卡| 成熟少妇高潮喷水视频| 麻豆久久精品国产亚洲av| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 老司机午夜十八禁免费视频| 国产免费男女视频| 亚洲片人在线观看| 制服诱惑二区| 亚洲在线自拍视频| 亚洲成人免费电影在线观看| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 亚洲中文av在线| 大香蕉久久成人网| 高清在线国产一区| 欧美乱色亚洲激情| 宅男免费午夜| 淫妇啪啪啪对白视频| 神马国产精品三级电影在线观看 | 亚洲成人久久性| 香蕉丝袜av| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 在线观看www视频免费| 淫秽高清视频在线观看| 丝袜美足系列| 嫩草影院精品99| 精品高清国产在线一区| 淫秽高清视频在线观看| 黑人操中国人逼视频| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 激情在线观看视频在线高清| 啪啪无遮挡十八禁网站| 国产精品一区二区精品视频观看| 大型av网站在线播放| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 色播亚洲综合网| 欧美精品啪啪一区二区三区| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 国产免费男女视频| 黄频高清免费视频| www日本在线高清视频| 大陆偷拍与自拍| 一区二区三区国产精品乱码| 女性生殖器流出的白浆| 国产1区2区3区精品| 日韩三级视频一区二区三区| 真人做人爱边吃奶动态| 成人免费观看视频高清| 国产熟女xx| 亚洲性夜色夜夜综合| 一级毛片精品| 日韩视频一区二区在线观看| 成人永久免费在线观看视频| 嫩草影院精品99| 国产成人精品久久二区二区免费| 一个人免费在线观看的高清视频| 亚洲一区二区三区不卡视频| 日韩欧美免费精品| 岛国在线观看网站| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 色老头精品视频在线观看| 亚洲av熟女| 亚洲av五月六月丁香网| 又大又爽又粗| 999精品在线视频| 一区在线观看完整版| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 999久久久国产精品视频| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | av超薄肉色丝袜交足视频| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 最近最新免费中文字幕在线| 亚洲中文字幕日韩| 中文字幕人妻熟女乱码| 此物有八面人人有两片| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 国产男靠女视频免费网站| 国产区一区二久久| 日本欧美视频一区| 色尼玛亚洲综合影院| 欧美午夜高清在线| 免费观看精品视频网站| 淫秽高清视频在线观看| 老司机深夜福利视频在线观看| 日本a在线网址| 激情在线观看视频在线高清| 国产成人影院久久av| 国产视频一区二区在线看| 91国产中文字幕| 国产一级毛片七仙女欲春2 | 色综合婷婷激情| 极品教师在线免费播放| 日韩精品中文字幕看吧| a在线观看视频网站| 国产午夜福利久久久久久| 一区在线观看完整版| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 国产亚洲欧美98| 亚洲第一av免费看| 久久久久精品国产欧美久久久| 精品国产美女av久久久久小说| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 国产成人精品久久二区二区免费| 性色av乱码一区二区三区2| 亚洲一区中文字幕在线| 日本 欧美在线| 亚洲熟女毛片儿| 国产欧美日韩一区二区精品| av天堂在线播放| 少妇的丰满在线观看| 美女午夜性视频免费| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 啦啦啦免费观看视频1| 日本三级黄在线观看| 亚洲第一青青草原| 真人做人爱边吃奶动态| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 成人国产综合亚洲| 青草久久国产| 国产精品影院久久| 精品久久蜜臀av无| 亚洲激情在线av| 免费观看精品视频网站| 国产精品精品国产色婷婷| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 国产高清视频在线播放一区| 国产亚洲欧美98| 精品国产一区二区三区四区第35| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 在线观看舔阴道视频| 狠狠狠狠99中文字幕| 亚洲专区国产一区二区| 在线观看日韩欧美| 嫩草影视91久久| 女人精品久久久久毛片| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 精品一区二区三区av网在线观看| 露出奶头的视频| 欧美性长视频在线观看| 久久久久九九精品影院| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 欧美中文日本在线观看视频| 免费av毛片视频| 看免费av毛片| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 国产精品一区二区三区四区久久 | 国产精品1区2区在线观看.| 成年人黄色毛片网站| 乱人伦中国视频| 成熟少妇高潮喷水视频| 深夜精品福利| 丝袜美足系列| av网站免费在线观看视频| 国产99白浆流出| 极品人妻少妇av视频| 美女免费视频网站| 国产在线精品亚洲第一网站| 国产成人精品在线电影| 午夜激情av网站| 真人一进一出gif抽搐免费| 国产精品影院久久| 亚洲国产精品久久男人天堂| 日韩三级视频一区二区三区| 欧美性长视频在线观看| 禁无遮挡网站| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 色尼玛亚洲综合影院| 99在线人妻在线中文字幕| 国产伦一二天堂av在线观看| 日韩高清综合在线| 中文亚洲av片在线观看爽| 日本 欧美在线| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 热99re8久久精品国产| 97碰自拍视频| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 久久人人精品亚洲av| www.熟女人妻精品国产| 女性生殖器流出的白浆| 激情在线观看视频在线高清| 欧美色视频一区免费| 精品久久久久久,| 久久久久精品国产欧美久久久| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 精品国产美女av久久久久小说| 窝窝影院91人妻| 久久人妻熟女aⅴ| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲成a人片在线一区二区| 两个人免费观看高清视频| 亚洲精品av麻豆狂野| 久久精品国产亚洲av高清一级| 亚洲国产高清在线一区二区三 | 伦理电影免费视频| 露出奶头的视频| 97人妻天天添夜夜摸| 精品熟女少妇八av免费久了| 久久狼人影院| 国产精品野战在线观看| 啪啪无遮挡十八禁网站| 亚洲 国产 在线| 成熟少妇高潮喷水视频| 在线天堂中文资源库| www日本在线高清视频| 精品欧美国产一区二区三| 欧美av亚洲av综合av国产av| 午夜久久久久精精品| 亚洲人成77777在线视频| 一二三四在线观看免费中文在| 国产国语露脸激情在线看| av欧美777| 国产成人免费无遮挡视频| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 黄网站色视频无遮挡免费观看| 性少妇av在线| 亚洲第一青青草原| 又黄又粗又硬又大视频| 久久九九热精品免费| 在线视频色国产色| 欧美久久黑人一区二区| 制服丝袜大香蕉在线| 精品国产亚洲在线| 老司机午夜福利在线观看视频| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 国产成人系列免费观看| 高潮久久久久久久久久久不卡| 久久人妻熟女aⅴ| 身体一侧抽搐| 亚洲avbb在线观看| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 在线观看免费午夜福利视频| 日本欧美视频一区| 国产激情欧美一区二区| 日韩av在线大香蕉| 嫩草影视91久久| 级片在线观看| 露出奶头的视频| 午夜两性在线视频| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 国产精品一区二区三区四区久久 | 久久婷婷成人综合色麻豆| 色综合欧美亚洲国产小说| 亚洲精品粉嫩美女一区| 一二三四在线观看免费中文在| 亚洲欧美激情综合另类| 午夜福利,免费看| 亚洲最大成人中文| 99在线视频只有这里精品首页| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 亚洲 欧美一区二区三区| 母亲3免费完整高清在线观看| 日韩免费av在线播放| 少妇的丰满在线观看| 天堂动漫精品| 亚洲国产精品合色在线| 三级毛片av免费| 国产91精品成人一区二区三区| 国产成+人综合+亚洲专区| 最近最新免费中文字幕在线| 最好的美女福利视频网| 久久热在线av| 国产高清有码在线观看视频 | 亚洲精品国产色婷婷电影| 久久中文字幕一级| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 人妻久久中文字幕网| 美女高潮到喷水免费观看| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 日本精品一区二区三区蜜桃| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 国产麻豆69| 国产成年人精品一区二区| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 精品无人区乱码1区二区| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 欧美激情久久久久久爽电影 | 日韩精品免费视频一区二区三区| 午夜日韩欧美国产| 亚洲成av人片免费观看| 在线观看免费视频网站a站| 黄色毛片三级朝国网站| www.www免费av| 啦啦啦免费观看视频1| 热re99久久国产66热| 国产成人影院久久av| 啦啦啦免费观看视频1| 在线国产一区二区在线| 午夜福利视频1000在线观看 | 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 电影成人av| 久久国产乱子伦精品免费另类| 99精品在免费线老司机午夜| 中国美女看黄片| 免费少妇av软件| 亚洲av成人一区二区三|