臨床標(biāo)本馬紅球菌的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)結(jié)果分析

閆文婧

筆者所在醫(yī)院于2002～2008年從標(biāo)本中分離到21株馬紅球菌，現(xiàn)就其分離鑒定、藥敏試驗(yàn)，以及在臨床標(biāo)本中的分布特點(diǎn)報(bào)告如下。

1 資料和方法

1.1 標(biāo)本來源 2002～2008年臨床科室送檢的標(biāo)本，包括痰液、尿液、血液、胸水和創(chuàng)面分泌物。

1.2 培養(yǎng)基及藥敏紙片 血平板、M-H瓊脂及藥敏紙片均有法國(guó)梅里埃公司生產(chǎn)，部分培養(yǎng)基醫(yī)院自備。

1.3 細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定 儀器法：用法國(guó)梅里埃公司生產(chǎn)的半自動(dòng)ATB expression鑒定；手工法：嚴(yán)格按文獻(xiàn)[1]操作，用杭州天和微生物有限公司生產(chǎn)的微量生化鑒定管進(jìn)行鑒定。兩種方法所測(cè)結(jié)果一致。藥敏試驗(yàn)用K-B法，并用金黃色葡萄球菌ATCC25923、糞腸球菌ATCC29212標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行質(zhì)量控制，判斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)NCCLS規(guī)定。

2 結(jié) 果

2.1 細(xì)菌鑒定 各種標(biāo)本均接種于血平板35℃培養(yǎng)18～24 h后，生長(zhǎng)出21株生物學(xué)性狀如下的細(xì)菌：菌落直徑0.5 mm左右，黏液狀，表面光滑、濕潤(rùn)，邊緣整齊，大部分菌落產(chǎn)生桔紅色或橙紅色色素。放置48～72 h后，菌落增大到1～2 mm，色素更加明顯。新鮮菌落涂片革蘭染色為陽性、卵圓形短桿菌，無鞭毛，無芽孢，抗酸染色部分陽性。陳舊培養(yǎng)物以球形為主。21株細(xì)菌經(jīng)ATB Expression系統(tǒng)鑒定全部為馬紅球菌。其鑒定百分率>99.99%的15株，百分率在97.30%～99.99%的4株，百分率在95.30%～97.29%的4株。手工法做21株細(xì)菌的生化反應(yīng)如下：觸酶陽性，硫化氫、七葉苷、動(dòng)力、肌醇、甘露醇、鼠李糖、山梨醇、蔗糖、枸櫞酸鹽、木糖、尿素、硝酸鹽還原均陰性。與質(zhì)控菌株ATCC25923，可形成CAMP樣反應(yīng)。

2.2 藥敏試驗(yàn) 用K-B法檢測(cè)，對(duì)萬古霉素、利福平、氧氟沙星和環(huán)丙沙星無耐藥菌株（0，0%）；對(duì)頭孢三嗪、頭孢他啶無耐藥各為1株占4.7%；另外，對(duì)氯霉素、阿米卡星、頭孢唑啉和青霉素G無耐藥分別為3株占14.2%、7株占33.3%、14株占66.7%、20株占95.2%。

2.3 菌種分布 21株馬紅球菌，來源于痰液10株，占47.61%；尿液6株，占28.57%；血液3株，占14.28%；創(chuàng)面分泌物1株，占4.7%；胸水1株，占4.7%。各種標(biāo)本均排除污染菌的可能。需要說明的是：21株馬紅球菌中，在2個(gè)月至10歲兒童有15株，占71.42%。

3 討 論

據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，馬紅球菌存在于土壤中，是馬、豬、牛等動(dòng)物的致病菌，曾從小馬肺部、馬生殖道及豬的次頜骨線中分離出。該菌引起人類致病較少見，易引起艾滋病、血液病、腎移植等患者的肺部感染。馬紅球菌感染的患者，臨床均有持續(xù)高熱，重度感染，免疫系統(tǒng)受損等特點(diǎn)[2]。

與其它菌的區(qū)別主要有，觸酶陽性、硫化氫陰性可與紅斑丹毒菌區(qū)別；不發(fā)酵糖醇類于棒狀桿菌屬區(qū)別；觸酶陽性、七葉苷陰性可與腸球菌屬區(qū)別；無動(dòng)力、不發(fā)酵糖醇類、不能水解七葉苷可與李斯特菌區(qū)別；細(xì)菌的菌落形態(tài)和菌體形態(tài)可與奴卡菌區(qū)別。

關(guān)于其耐藥性特點(diǎn)，臨床上馬紅球菌感染，環(huán)丙沙星、氧氟沙星、頭孢三嗪、氯霉素和利福平等抗生素具有高度敏感性。臨床常推薦聯(lián)合抗菌藥物治療，以產(chǎn)生協(xié)同作用。細(xì)菌耐藥性是一個(gè)全球性問題，國(guó)內(nèi)外報(bào)道均認(rèn)為，細(xì)菌耐藥性增加與抗生素應(yīng)用有關(guān)[2]。對(duì)臨床抗生素的應(yīng)用，應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果選用，同時(shí)加強(qiáng)抗生素使用的管理。可延緩細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生。

從本組臨床分布看，其感染可以是多部位的，如呼吸系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、傷口、胸腔等。其中呼吸系統(tǒng)感染占第一位為47.61%，其次是泌尿系統(tǒng)感染占28.57%。因此在進(jìn)行痰液、尿液標(biāo)本的細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)注意該菌的檢出。由于上述兩種標(biāo)本有時(shí)雜菌種類較多，可被誤導(dǎo)，尤其是該菌生長(zhǎng)緩慢，培養(yǎng)18～24 h后菌落較小，產(chǎn)生色素不明顯，故容易漏檢。因此，為了提高陽性率，筆者認(rèn)為，在對(duì)痰液、尿液標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)18～24 h，結(jié)果陰性者，應(yīng)將平板放置48～72 h后再觀察，以提高檢出率。另外，21株馬紅球菌來源于2個(gè)月至10歲兒童有15株，占71.42%。這可能與兒童的免疫系統(tǒng)還沒有發(fā)育完全，免疫力弱有關(guān)。

[1]葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學(xué)出版社，2006.789-791.

[2]張鳳凱，金少鴻，吳 銓，等.北京地區(qū)醫(yī)院細(xì)菌對(duì)常見抗生素耐藥性現(xiàn)狀及變遷[J].中華醫(yī)學(xué)雜志，1997，77(6)：327-328.