蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)及其在消化系統(tǒng)腫瘤中的應(yīng)用*

張 亞 王學(xué)春

(泰山醫(yī)學(xué)院，山東 泰安 271016)

蛋白質(zhì)組學(xué)是研究細(xì)胞內(nèi)所有蛋白質(zhì)及其動(dòng)態(tài)變化規(guī)律的科學(xué)[1],近年來它被廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域。蛋白質(zhì)組的研究不僅有助于揭示生命活動(dòng)規(guī)律，還能為眾多種疾病機(jī)理的闡明及攻克提供理論依據(jù)和解決途徑。通過對(duì)正常個(gè)體及病理個(gè)體間的蛋白質(zhì)組比較分析，可以找到某些“疾病特異性的蛋白質(zhì)分子”[2]，它們可能為疾病的早期診斷提供一些新的分子標(biāo)志。消化道腫瘤是我國(guó)死亡率最高的疾病之一。在過去30年中, 針對(duì)腫瘤的研究, 尤其是在致癌機(jī)制方面, 取得了顯著的進(jìn)展。然而, 臨床檢測(cè)及治療上的進(jìn)展卻相對(duì)緩慢。蛋白質(zhì)組學(xué)的引入, 通過提供大規(guī)模高通量的蛋白質(zhì)分析的技術(shù)手段, 為腫瘤蛋白質(zhì)標(biāo)志物的檢測(cè)提供了新方法, 為腫瘤的診斷及治療提供了新途徑。本文重點(diǎn)綜述了蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)在消化系統(tǒng)腫瘤中的應(yīng)用。

1 蛋白質(zhì)組學(xué)概述及其相關(guān)技術(shù)

1994年，澳大利亞科學(xué)家Wilkins和Williams首次提出了蛋白質(zhì)組學(xué)(proteomics)概念，蛋白質(zhì)組學(xué)主要是系統(tǒng)性研究一種基因組、一種生物，或者一種細(xì)胞(組織)所表達(dá)的全套蛋白質(zhì)[1]。其目的是從整體的角度分析細(xì)胞內(nèi)動(dòng)態(tài)變化的蛋白質(zhì)組成成分、表達(dá)水平與修飾狀態(tài)、了解蛋白質(zhì)之間的相互作用與聯(lián)系,揭示蛋白質(zhì)功能與細(xì)胞生命活動(dòng)規(guī)律。由于蛋白質(zhì)是組織、細(xì)胞功能的主要執(zhí)行者，是基因通往細(xì)胞功能的橋梁，因此蛋白質(zhì)組學(xué)能更真實(shí)、更直接地體現(xiàn)生命現(xiàn)象的本質(zhì)，能更深入地揭示各種復(fù)雜生命活動(dòng)的機(jī)制。蛋白質(zhì)組學(xué)的核心技術(shù)包括樣品制備、分離、鑒定和生物信息分析等。

1.1 樣品制備

樣品制備是蛋白質(zhì)組分析成功與否的關(guān)鍵,應(yīng)具有良好重復(fù)性,并與后續(xù)分離和鑒定方法相匹配。與核酸不同，目前沒有一種通用的方法適用于所有的蛋白質(zhì)，不同來源的樣本需要不同的提取和裂解技術(shù)。近幾年發(fā)展起來的激光捕獲顯微切割技術(shù)(laser capture microdissection，LCM)是一項(xiàng)可以直接從組織樣品中獲取特異細(xì)胞群的技術(shù)，該技術(shù)對(duì)雙向電泳的標(biāo)本制備具有重要作用，可以精確地從組織切片中取出研究者感興趣的細(xì)胞類型，從而獲得純凈的蛋白質(zhì)樣品，是目前解決組織異質(zhì)性操作中較理想的方法[3]。

1.2 蛋白質(zhì)分離技術(shù)

目前，由O’Farrell PH等人[4]發(fā)明的雙向電泳技術(shù)( Two-Dimensional Polyacrylamide Gel Electrophoresis, 2D-PAGE) 仍是獲得蛋白質(zhì)圖譜的主要手段，其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)等電點(diǎn)和分子量的不同將蛋白分離。2-DE的缺點(diǎn)是重復(fù)性差, 對(duì)膜蛋白兼容性差, 缺乏小分子量和大分子量的信息, 對(duì)于極端pH的蛋白也無法分辨檢測(cè)。針對(duì)重復(fù)性差的問題,產(chǎn)生了熒光標(biāo)記的2-DE, 也就是 DIGE(diferential in gel electrophoresis)技術(shù)[5]。該技術(shù)運(yùn)用不同的熒光染料分別標(biāo)記不同的蛋白質(zhì)樣品,然后將它們等量混合起來,在單一的雙向膠上進(jìn)行分離和檢測(cè),按照它們所發(fā)出熒光的不同,來比較在不同細(xì)胞狀態(tài)下蛋白質(zhì)量的變化。DIGE可對(duì)圖譜上蛋白質(zhì)點(diǎn)之間的差異表達(dá)進(jìn)行研究,進(jìn)一步提高2-DE的重復(fù)性及蛋白質(zhì)的真實(shí)改變程度,其不足主要在于樣本數(shù)量的局限性。

近年來新的分離蛋白質(zhì)的非凝膠技術(shù)得到發(fā)展，并在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中廣泛應(yīng)用，這些非凝膠技術(shù)的應(yīng)用簡(jiǎn)化了蛋白質(zhì)組研究步驟，又可與質(zhì)譜聯(lián)用實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，是2-DE技術(shù)的有效補(bǔ)充。液相色譜法/高效液相色譜(high performance liquid chromatography， HPLC)是近年來發(fā)展迅速的非凝膠的新方法，具有高分辨率，可直接用于高復(fù)雜性蛋白質(zhì)混合物的分析，對(duì)低豐度蛋白的檢測(cè)能力超過2D-PAGE[6]。毛細(xì)管電泳是目前對(duì)生物大分子分辨率很高的分離分析技術(shù)。即在高電場(chǎng)強(qiáng)度作用下,對(duì)毛細(xì)管(內(nèi)徑5～10 μm) 中的待測(cè)樣品按分子質(zhì)量、電荷、電泳遷移率等差異進(jìn)行有效分離。具有進(jìn)樣量小,可操作性強(qiáng),分離高效、快速的特點(diǎn),并且易于同其他監(jiān)測(cè)方法連用,是微分離分析中最有效的方法之一。該技術(shù)彌補(bǔ)了雙向凝膠電泳無法實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化分析的不足,并可用于分子量范圍不適用于雙向電泳樣品的檢測(cè),對(duì)單一樣品尤為適用,但對(duì)復(fù)雜樣品的分離尚不完全[7]。

1.3 蛋白質(zhì)鑒定技術(shù)

蛋白質(zhì)鑒定主要依靠質(zhì)譜技術(shù)(MS)分析。電噴霧質(zhì)譜(ESI - MS)和基質(zhì)輔助激光解吸飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF -MS)技術(shù)的發(fā)明及在蛋白質(zhì)分析中的成功應(yīng)用,使具有極高靈敏度的質(zhì)譜技術(shù)成為蛋白質(zhì)組研究的核心工具,其基本原理是通過電離源先將樣品分子離子化,再根據(jù)各離子間荷質(zhì)比(m/z)的差異分離蛋白質(zhì),并確定其分子量和PI等屬性參數(shù)[8]。表面增強(qiáng)激光解吸離子化飛行時(shí)間質(zhì)譜(SELDI - TOF - MS) 技術(shù)是近年出現(xiàn)的,是目前蛋白質(zhì)組學(xué)最常應(yīng)用的技術(shù),該技術(shù)是利用經(jīng)過特殊處理的固相支持物或芯片的基質(zhì)表面,制成蛋白質(zhì)芯片,根據(jù)蛋白質(zhì)生化特性不同,選擇性地從待測(cè)生物樣品中捕獲配體,將其結(jié)合在芯片的固相基質(zhì)表面上,利用激光脈沖輻射使芯片表面的待分析物解析成帶電離子,質(zhì)荷比不同的離子在電場(chǎng)中飛行時(shí)間不同,據(jù)此繪制出質(zhì)譜圖。檢測(cè)結(jié)果經(jīng)過軟件處理后可直接顯示樣品中各種蛋白質(zhì)的分子量、含量等信息[9]。 SELDI - TOF - MS 技術(shù)不需要雙向電泳預(yù)先分離蛋白質(zhì),可直接從各種體液和組織中找出疾病相關(guān)蛋白質(zhì),獲得樣品中目標(biāo)蛋白質(zhì)的分子量。此檢測(cè)技術(shù)靈敏度高,具有高通量、快速、操作簡(jiǎn)便、樣品用量少和對(duì)多種樣品平行分析檢測(cè)等特點(diǎn),具有很好的臨床應(yīng)用前景[10]。

1.4 生物信息分析

2-DE所得到的圖像可利用圖像分析軟件進(jìn)行分析, 通過數(shù)據(jù)庫(kù)查詢質(zhì)譜結(jié)果, 還可對(duì)感興趣的未知蛋白質(zhì)進(jìn)行結(jié)構(gòu)和功能方面的分析。

2 蛋白質(zhì)組學(xué)在消化系統(tǒng)腫瘤中的應(yīng)用

2.1 肝癌

近年來肝癌發(fā)病率在我國(guó)有上升趨勢(shì)，其死亡率占惡性腫瘤死亡率的前列。肝癌的預(yù)后極差，五年生存率低于5%[11]。Sun S等[12]應(yīng)用2-DE技術(shù)尋找肝細(xì)胞性肝癌中潛在的參數(shù)標(biāo)志物，他們對(duì)224例肝組織標(biāo)本(105例癌組織，103例癌旁組織和16例正常組織)進(jìn)行雙向電泳分析，發(fā)現(xiàn)β-actin(ACTB)、heat shock protein 60(HSP60)和protein disulphide isomerase(PDI)三種蛋白標(biāo)志物在不同組織中的變化比較穩(wěn)定。同時(shí)應(yīng)用Western blot、免疫組化、實(shí)時(shí)定量PCR進(jìn)行驗(yàn)證，證實(shí)ACTB和HSP60變化情況與2-DE結(jié)果基本一致。他們認(rèn)為ACTB和HSP60有望成為肝癌早期診斷的可靠蛋白參數(shù)標(biāo)志物。Codarin E等[13]應(yīng)用2-DE和MALDI-TOF-MS分析技術(shù)對(duì)20名肝癌患者的癌組織及配對(duì)癌旁組織進(jìn)行研究，得到包括200個(gè)普通蛋白點(diǎn)在內(nèi)的蛋白質(zhì)圖譜，其中證實(shí)含有52個(gè)差異基因相對(duì)應(yīng)的蛋白表達(dá)產(chǎn)物。通過蛋白差異分析發(fā)現(xiàn)16個(gè)明顯變化的蛋白點(diǎn)，這些蛋白與組成細(xì)胞骨架，應(yīng)激反應(yīng)和發(fā)揮代謝功能相關(guān)。本項(xiàng)研究可能為肝癌診斷提供新的蛋白標(biāo)記物并且為肝癌病理變化和轉(zhuǎn)移機(jī)制提供新的思路。Li N等[14]聯(lián)合應(yīng)用2-DE和MALDI-TOF質(zhì)譜技術(shù)比較分析了18例肝癌組織及癌旁組織(包括12例LC源性和6例慢性乙型肝炎源性肝細(xì)胞肝癌)之間蛋白質(zhì)表達(dá)譜的差異，鑒定了17 個(gè)具有顯著性表達(dá)差異的蛋白質(zhì)，其中十個(gè)蛋白點(diǎn)在癌組織中上調(diào)，其余7個(gè)蛋白點(diǎn)下調(diào)。而c-Jun N-terminal kinase 2 和 ADP/ATP carrier protein 僅在慢性乙型肝炎源性肝癌(CHB)組織中上調(diào)，nsulin-like growth factor binding protein 2和Rho-GTPase-activating protein 4分別只在LC源性和CHB源性肝癌組織中下調(diào)。另外該實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)在HBV源性肝癌組織中有6個(gè)新的差異表達(dá)蛋白。

2.2 胃癌

胃癌仍是全世界最常見的惡性腫瘤之一，也是惡性腫瘤患者最常見的死亡原因之一。胃癌目前在世界范圍內(nèi)癌癥相關(guān)死亡中列第二位，在我國(guó)居于首位。僅2002年全球范圍內(nèi)就有新增患者約90萬例，死亡人數(shù)超過70萬例。胃部腫瘤很少在臨床前期被發(fā)現(xiàn)或確診，從而導(dǎo)致預(yù)后普遍較差[15]。 2003年，Ryu JW等[16]比較胃癌與正常胃黏膜組織的蛋白組差異，得到1500個(gè)蛋白點(diǎn)，對(duì)140個(gè)蛋白點(diǎn)進(jìn)行鑒定，發(fā)現(xiàn)在胃癌組織中有7 個(gè)上調(diào)蛋白質(zhì)：NSP3、 Prohibitin 、Transgelin、熱休克蛋白27及其變異體、二硫化物異構(gòu)酶A3蛋白、葡萄糖相關(guān)蛋白等；7 個(gè)下調(diào)蛋白點(diǎn)：載脂蛋白A-1、P20、二磷酸核苷異構(gòu)酶A、α1-抗胰蛋白酶、支架蛋白、血漿白蛋白和血清轉(zhuǎn)鐵蛋白。2009年Mohri Y等[17]運(yùn)用SELDI技術(shù)檢測(cè)胃癌組織和血清：組織分析發(fā)現(xiàn)115個(gè)差異位點(diǎn)，其中包括HNPs1-3在內(nèi)的上調(diào)蛋白位點(diǎn)65個(gè)，下調(diào)蛋白位點(diǎn)50個(gè)；血清中發(fā)現(xiàn)MIF蛋白位點(diǎn)上調(diào)。2007年中科院張軍等[18]應(yīng)用2-DE和MALDI-TOF/TOF MS技術(shù)發(fā)現(xiàn)胃癌組織中12個(gè)上調(diào)和13個(gè)下調(diào)蛋白點(diǎn)；他們認(rèn)為MAWBP可能成為胃癌新的蛋白標(biāo)志物之一。2008年第二軍醫(yī)大學(xué)吳成等[19]應(yīng)用2-DE和MALDI-TOF MS方法研究胃癌標(biāo)志物，發(fā)現(xiàn)9個(gè)上調(diào)點(diǎn)：HSP60、肌間線蛋白、 效應(yīng)細(xì)胞蛋白酶受體1、 MnSOD 、plice form 1b、 hypothetical protein、 unnamed protein product；20個(gè)下調(diào)點(diǎn)：硒結(jié)合蛋白1、纖維蛋白原、HSP27、微管蛋白α6、鋅指蛋白160、前列腺合酶F、真核翻譯延伸因子-α1。他們認(rèn)為MnSOD有可能成為胃癌新的蛋白標(biāo)志物。

2.3 食管癌

食管癌在我國(guó)的發(fā)病率和死亡率均居于惡性腫瘤的前列，但病因?qū)W與發(fā)病機(jī)制至今不甚明了。食管癌的發(fā)生演進(jìn)是一個(gè)多層次、多因素導(dǎo)致的復(fù)雜過程，其產(chǎn)生發(fā)展涉及多種基因與蛋白的協(xié)同作用。近年來有關(guān)食管癌的研究主要集中在癌基因/抑癌基因的改變與食管癌的相互關(guān)系，如myc、ras、EGFR、Cyclin D1、p53、Rb等。蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)已越來越廣泛的應(yīng)用于致癌機(jī)制的研究以及腫瘤相關(guān)蛋白的鑒定。Xu SY等[20]采用SELDI-TOF-MS和CM10蛋白質(zhì)芯片技術(shù)分析了139例食管鱗狀細(xì)胞癌(ESCC)病人和49例正常對(duì)照者血清樣本,發(fā)現(xiàn)了283個(gè)血清蛋白峰(0～20kDa),其中140個(gè)蛋白峰在食管癌病人和正常對(duì)照者血清中出現(xiàn)顯著差異。該實(shí)驗(yàn)建立了一個(gè)由六個(gè)蛋白峰(m/z 5667, 5709, 5876, 5979, 6043，6102)組成的診斷模型，利用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件,診斷的敏感性達(dá)到97.12%,特異性達(dá)到83.87%,研究表明這是一項(xiàng)有前途的早期診斷ESCC準(zhǔn)確率高且無創(chuàng)的方法。Uemura N等[21]為尋找食管癌的預(yù)后標(biāo)記物，采用熒光差異顯示凝膠電泳(2D-DIGE)技術(shù)分離并篩選不同熒光素標(biāo)記的預(yù)后好(9例生存率超過5年且無復(fù)發(fā)跡象的患者)和預(yù)后差(24例術(shù)后2年死亡的患者)的食管癌組織的差異表達(dá)蛋白質(zhì)，用質(zhì)譜(MS)技術(shù)進(jìn)行鑒定并分析。結(jié)果共篩選出22個(gè)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異表達(dá)蛋白質(zhì)點(diǎn)。其中發(fā)現(xiàn)Transglutaminase 3(TGM3)與食管癌患者預(yù)后程度呈負(fù)相關(guān)。另外又對(duì)76名不同預(yù)后程度ESCC患者的TGM3水平進(jìn)一步進(jìn)行免疫組化檢測(cè)：TGM3陽性患者5年生存率為64.5%，TGM3陰性患者5年生存率為32.1%。這項(xiàng)研究首次表明TGM3可作為食管癌新的預(yù)后標(biāo)記物，TGM3表達(dá)水平的監(jiān)測(cè)有望為預(yù)防ESCC復(fù)發(fā)提供一種新的治療策略。Fu等[22]對(duì)分化程度不同的食管鱗狀上皮細(xì)胞癌所表達(dá)的蛋白質(zhì)組進(jìn)行研究。與正常食管組織相比,在食管鱗狀上皮細(xì)胞癌中有18個(gè)蛋白位點(diǎn)表達(dá)出現(xiàn)差異,其中alpha-actinin 4 (ACTN4) 和67 kD laminin receptor ( 67LR)的表達(dá)水平從腫瘤I期到III期漸升。用組織微陣列技術(shù)( tissue microarrays, TMA)研究其與臨床病理學(xué)的聯(lián)系,揭示了ACTN4過表達(dá)與腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移潛能有關(guān),但67LR的過表達(dá)則只與腫瘤的惡性程度有關(guān)。他們認(rèn)為該兩種蛋白可以成為食管鱗狀上皮細(xì)胞癌診斷和治療的靶點(diǎn)。

2.4 結(jié)直腸癌

結(jié)直腸癌是臨床常見的消化道腫瘤之一，在各種惡性腫瘤中居第3位,在癌癥導(dǎo)致死亡的病因中占第四位，其發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，且整體治療水平不盡人意。臨床上30 %～40 %的患者在就診時(shí)已屬中晚期,實(shí)施根治性切除術(shù)后腫瘤的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率仍高達(dá)40 %～70 %[23]。Kim等[24]運(yùn)用功能蛋白質(zhì)組學(xué)方法對(duì)結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移和侵襲潛能進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)N-乙酰葡糖胺基轉(zhuǎn)移酶v(GnT-V)能使金屬蛋白酶-1抑制因子(TMP-1)的糖基化過程發(fā)生異常改變，這種異常糖基化使TMP-1對(duì)基質(zhì)金屬酶-2，9的抑制作用減弱，從而間接地增強(qiáng)結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移和侵襲的潛能。盛新華等[25]收集結(jié)直腸癌(68例)、其他惡性腫瘤(乳腺癌、胃癌、食管癌、肝癌、肺癌及腎癌各25例)血清標(biāo)本共218份，應(yīng)用表面增強(qiáng)激光解吸/電離-飛行時(shí)間-質(zhì)譜檢測(cè)其蛋白質(zhì)指紋譜。用Biomarker Wizard軟件分析結(jié)直腸癌與其他惡性腫瘤患者血清中的低分子差異蛋白后，分別作出受試者工作特征(ROC)診斷曲線。再選取ROC曲線下面積(AUC)>0.8的蛋白，建立Fisher判別模型。結(jié)果顯示結(jié)直腸癌與其他惡性腫瘤相比，血清中有12種蛋白相對(duì)高表達(dá)，102種蛋白相對(duì)低表達(dá)。ROC曲線顯示，有75種蛋白AUC>0.5，其中8911、8919、8964、11726、14049、14139 M/Z的蛋白AUC>0.8。 用這6種蛋白建立的Fisher判別模型， 鑒別結(jié)直腸癌的敏感性88.2%，特異性93.3%，準(zhǔn)確率91.7%。他們認(rèn)為結(jié)直腸癌與其他惡性腫瘤相比，血清中存在明顯差異表達(dá)的低分子蛋白，對(duì)結(jié)直腸癌具有診斷特異性， 值得進(jìn)一步研究。

2.5 胰腺癌

胰腺癌是外科治療效果最差的腫瘤之一，其5年生存率不足3%[26]。Kakisak 等[27]研究了異常表達(dá)的胰腺癌患者的血漿蛋白質(zhì)。分別取胰腺癌病人與健康對(duì)照組的血漿，在去除高峰度蛋白后進(jìn)行熒光雙向差異凝膠電泳(2D-DIGE)。2D-DIGE 構(gòu)建的胰腺癌病人和健康對(duì)照組的血漿蛋白差異表達(dá)圖譜顯示：胰腺癌病人血漿33個(gè)差異表達(dá)的蛋白點(diǎn)，其中27個(gè)上調(diào)、6 個(gè)下調(diào)。經(jīng)質(zhì)譜鑒定和生物學(xué)分析，上調(diào)的亮氨酸富集α-2-糖蛋白(LRG)以前從未在胰腺癌蛋白質(zhì)研究文獻(xiàn)中涉及，而且通過了免疫組化驗(yàn)證，提示該檢測(cè)可作為胰腺癌診斷、鑒別診斷的重要指標(biāo)，此研究推進(jìn)了臨床LRG 血漿水平的測(cè)量。金紅等[28]采用雙向凝膠電泳和生物質(zhì)譜技術(shù)，對(duì)12對(duì)胰腺癌組織和癌旁組織樣品、3個(gè)胰腺良性疾病樣品、3個(gè)正常胰腺組織樣品的蛋白質(zhì)進(jìn)行了分離和鑒定, 獲得了重復(fù)性較好的雙向凝膠電泳圖譜；鑒定了胰腺癌和癌旁組織的差異表達(dá)蛋白質(zhì), 發(fā)現(xiàn)了30個(gè)差異表達(dá)蛋白質(zhì)；應(yīng)用MALD I-TOF-MS/MS技術(shù)對(duì)差異表達(dá)蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定, 共有24個(gè)蛋白質(zhì)得到鑒定, 其中15個(gè)蛋白質(zhì)在胰腺癌組織中表達(dá)上調(diào)， 9個(gè)蛋白質(zhì)表達(dá)下調(diào)。這些蛋白質(zhì)與胰腺癌的發(fā)生相關(guān)，可能成為胰腺癌的分子標(biāo)志物和藥物治療的靶蛋白。

3 不足和展望

由于蛋白質(zhì)組是一個(gè)動(dòng)態(tài)、變化的整體，生物體內(nèi)的蛋白質(zhì)不能像核酸一樣通過PCR擴(kuò)增來增加樣品量，因此其復(fù)雜性遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于基因組。而蛋白質(zhì)組學(xué)可以從整體、動(dòng)態(tài)、網(wǎng)絡(luò)水平上研究蛋白質(zhì),為詮釋復(fù)雜生命活動(dòng)提供新視角,有助于深入了解疾病過程中潛在的分子機(jī)制。目前，運(yùn)用蛋白質(zhì)組技術(shù)分離和鑒定腫瘤標(biāo)志物的研究還處在初級(jí)階段，那些被發(fā)現(xiàn)的新的腫瘤相關(guān)的蛋白標(biāo)志物還需進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量，通過嚴(yán)格的對(duì)照來評(píng)價(jià)其特異性。由于腫瘤的發(fā)生和發(fā)展是多步驟和多基因參與的十分復(fù)雜的過程，結(jié)合基因組所提供的大量信息，相信使用蛋自質(zhì)組技術(shù)將會(huì)大大加快對(duì)腫瘤標(biāo)志物的研究進(jìn)程。

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