改良型缺氧瓶與傳統(tǒng)型缺氧瓶實驗結(jié)果的對比研究

曹弟勇,周燕知,吳丹陽,鄭 倩

(1.川北醫(yī)學(xué)院機(jī)能實驗中心;2.川北醫(yī)學(xué)院 2007級護(hù)理學(xué)院;3.川北醫(yī)學(xué)院 2007級臨床學(xué)院,四川 南充 637000)

缺氧實驗是機(jī)能實驗學(xué)中一個重要的基礎(chǔ)性實驗,缺氧瓶是該實驗中關(guān)鍵儀器。傳統(tǒng)缺氧瓶將鈉石灰放入瓶底(如圖 1),與實驗動物直接接觸,易受動物分泌物污染,每使用一次就需重新更換,這不僅造成了實驗藥品浪費(fèi),也加大了實驗準(zhǔn)備人員的工作負(fù)擔(dān)。為此,本小組對缺氧瓶進(jìn)行了改良,將鈉石灰分別置于廣口瓶上部和中部,并用改良后的缺氧瓶與傳統(tǒng)型缺氧瓶進(jìn)行缺氧實驗,對實驗結(jié)果進(jìn)行了對比研究。

1 材料和方法

1.1 實驗動物:30只健康小白鼠由川北醫(yī)學(xué)院動物實驗中心提供,雌雄不限,體重 25g±0.5g。

1.2 藥品:鈉石灰(H3Ca2NaO4)購自上海順強(qiáng)生物科技有限公司。

1.3 改良型缺氧瓶的制作:將細(xì)金屬濾網(wǎng)固定于廣口瓶的上部,鈉石灰置于濾網(wǎng)中,即得到改良 A型缺氧瓶(如圖 2);將鈉石灰密封包裹于干燥紗布內(nèi),用細(xì)線將包裹懸吊于廣口瓶中部,即得到改良 B型缺氧瓶(如圖 3)。

1.4 小鼠存活時間的測定:30只小白鼠隨機(jī)分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組,每組 10。三種類型缺氧瓶編號為 1-10號。Ⅰ組小白鼠分別放入 1-10號傳統(tǒng)型缺氧瓶,Ⅱ組小白鼠分別放入 1-10號改良 A型缺氧瓶,Ⅲ組小白鼠分別放入 1-10號改良 B型缺氧瓶中,同時塞緊瓶塞,用秒表分別記錄每組中各小白鼠存活時間,即從塞緊瓶塞到小白鼠死亡的時間。

1.5 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計方法:數(shù)據(jù)處理采用 EXCEL2003統(tǒng)計軟件,小鼠平均存活時間的比較采用方差分析。

表1 各組小白鼠存活時間(分鐘)

2 結(jié) 果

傳統(tǒng)型缺氧瓶中小白鼠平均存活時間與改良 A型和 B型缺氧瓶無顯著差異(p＞0.05),改良 A型缺氧瓶小鼠平均存活時間與改良 B型缺氧瓶無顯著差異(p＞0.05),見表 1。

3 討 論

氧是維持生命活動所必需的物質(zhì),缺氧是存在于多種疾病中的基本病理過程之一,也是造成細(xì)胞損傷的重要原因,嚴(yán)重缺氧狀態(tài)下,機(jī)體可以在數(shù)分鐘內(nèi)死亡[1-4]。

缺氧實驗的開設(shè),在于幫助我們正確理解缺氧對機(jī)體的危害以及氧療在疾病治療中的重要意義[5]。缺氧瓶是缺氧實驗的關(guān)鍵儀器,動物在缺氧下的存活時間是實驗觀察的重要指標(biāo)。為了消除二氧化碳吸入對動物存活時間的影響,需在瓶中加入鈉石灰以吸收呼出氣中二氧化碳。傳統(tǒng)缺氧瓶將鈉石灰置于瓶底與動物直接接觸,這樣就存在兩個問題:一是易受動物分泌物污染,影響二氧化碳的吸收效果;二是部分動物舔食鈉石灰,易致氣道阻塞。這兩個因素都可能導(dǎo)致或者加速動物的死亡,使小鼠在缺氧下存活的時間出現(xiàn)較大偏差。另外,每用完一次就需廢棄更換新的鈉石灰,這不僅造成了藥品的較多浪費(fèi),而且增加了實驗準(zhǔn)備的工作量。

為了解決傳統(tǒng)缺氧瓶存在的弊病,降低儀器因素對實驗結(jié)果的影響,本小組對傳統(tǒng)缺氧瓶進(jìn)行了改良,將鈉石灰置于缺氧瓶上部(改良 A型)或中部(改良 B型),并用傳統(tǒng)型缺氧瓶和改良型缺氧瓶同時進(jìn)行缺氧實驗,對實驗結(jié)果進(jìn)行對比研究,結(jié)果顯示,改良型缺氧瓶內(nèi)小鼠平均存活時間與傳統(tǒng)型缺氧瓶無顯著差異(p＞0.05),改良 A型缺氧瓶內(nèi)小鼠平均存活時間與改良 B型缺氧瓶無顯著差異(p＞0.05)。標(biāo)準(zhǔn)差是反映所有觀察值與均數(shù)的平均離散程度的指標(biāo),其值越大,數(shù)據(jù)的離散程度就大[6]。本研究結(jié)果數(shù)據(jù)顯示,改良型缺氧瓶與傳統(tǒng)型缺氧瓶小鼠存活時間的標(biāo)準(zhǔn)差有明顯不同,前者較小(A型為 1.65,B型為 3.13),后者較大(為8.83),這說明改良型缺氧瓶對實驗結(jié)果的影響小,小鼠存活時間集中度好,實驗數(shù)據(jù)穩(wěn)定,而傳統(tǒng)型缺氧瓶相對較差。

綜上結(jié)果,改良后的缺氧瓶將鈉石灰與小鼠隔離,很好的解決了傳統(tǒng)型缺氧瓶實驗中存在的兩大主要問題,能有效地消除實驗的誤差,數(shù)據(jù)穩(wěn)定性好,而且不受動物分泌物的影響,勿需用一次換一次,在一定程度上減少了藥品的浪費(fèi)和實驗準(zhǔn)備的工作量。另外,改良型缺氧瓶僅將鈉石灰放置的位置加以變更,無需增加過多的實驗經(jīng)費(fèi)投入即可制作完成,在實驗中有重要的推廣價值。

[1] 王 晶,馮秀娟,張燕榮,等.急性缺氧對小鼠丘腦肥大細(xì)胞的影響[J].農(nóng)業(yè)科學(xué)研究,2008,29(4):55-58

[2] 劉淑英,梁西西,于洪川,等.小鼠急性缺氧后頸部淋巴結(jié)內(nèi)肥大細(xì)胞的變化[J].寧夏大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2009,30(1):69-71,80

[3] 于洪川,魏智清,張振漢,等.小鼠急性缺氧后肺內(nèi)肥大細(xì)胞的變化[J].寧夏大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2007,28(3):499-251

[4] 金惠銘,王建枝.病理生理學(xué)[M].第 6版,北京:人民衛(wèi)生出版社,2006.76-87

[5] 鄭 倩.醫(yī)學(xué)機(jī)能實驗學(xué)[M].北京:科學(xué)出版社,2009.112-115

[6] 顏 虹.醫(yī)學(xué)統(tǒng)計學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2005.40-41