杜仲雄花茶對小鼠抗應(yīng)激作用的實(shí)驗(yàn)

陳百泉,婁麗杰,杜紅巖,付建敏,杜蘭英,李 欽

(1.河南大學(xué)中藥研究所,河南 開封 475004;2.中國林業(yè)科學(xué)研究院經(jīng)濟(jì)林研究開發(fā)中心,河南 鄭州 450003)

杜仲雄花茶對小鼠抗應(yīng)激作用的實(shí)驗(yàn)

陳百泉1*,婁麗杰1,杜紅巖2,付建敏2,杜蘭英2,李 欽1

(1.河南大學(xué)中藥研究所,河南 開封 475004;2.中國林業(yè)科學(xué)研究院經(jīng)濟(jì)林研究開發(fā)中心,河南 鄭州 450003)

目的:研究杜仲雄花茶對小鼠的抗應(yīng)激作用。方法:昆明種小鼠隨機(jī)分為4組,空白對照組、杜仲皮對照組、杜仲雄花給藥高劑量組和杜仲雄花給藥低劑量組,各組按設(shè)計劑量灌胃給藥,連續(xù)14 d;末次給藥1 h后進(jìn)行耐低溫、耐高溫、負(fù)重游泳及耐缺氧的應(yīng)激實(shí)驗(yàn),并記錄其存活時間。結(jié)果:不同劑量的杜仲雄花茶均有明顯的抗應(yīng)激作用,能有效延長小鼠的耐低溫、耐高溫、負(fù)重游泳及耐缺氧的時間。結(jié)論:杜仲雄花茶具有明顯的抗應(yīng)激作用。

杜仲雄花茶;耐低溫;耐高溫;游泳;耐缺氧

杜仲(Eucommia ulmoides Oliv.)是我國特產(chǎn)的名貴中藥材。我國杜仲資源約占世界杜仲資源總量的99%以上[1]。杜仲皮、莖、葉均可入藥,主要產(chǎn)于貴州、四川、湖北、浙江等省。杜仲皮具有補(bǔ)肝腎,強(qiáng)筋骨,安胎,抗衰老的功效,但對于杜仲雄花的藥用卻報道很少。杜仲為雌雄異株樹種,其中雄株占40%～60%[2]。近年來研究發(fā)現(xiàn),杜仲雄花與葉,皮含有相類似的有效成分,富含總黃酮,桃葉珊瑚甙,綠原酸等,其中黃酮類化合物的含量高于皮和葉[3]。杜仲雄花茶形狀與普通茶葉十分相似,不需要和其他茶種配合,具有湯色黃綠透亮,滋味濃而爽口,香氣獨(dú)特而持久,回味甜的特點(diǎn),它充分利用了杜仲雄花資源,開拓了杜仲綜合利用的新途徑。本試驗(yàn)研究了杜仲雄花茶對小鼠耐低溫、耐高溫、負(fù)重游泳及耐缺氧能力的影響。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 動物

昆明種小白鼠160只,雌雄兼有,體重20 g±2 g,由河南省實(shí)驗(yàn)動物中心提供,購進(jìn)適應(yīng)3 d。

1.2 藥品

杜仲雄花茶(由靈寶市天地科技生態(tài)有限責(zé)任公司)。

1.3 儀器

電子天平(JY10001上皿電子天平,上海精密科技儀器有限公司);250mL磨口廣口瓶;250mL錐形瓶;電熱恒溫水浴鍋(上海博迅醫(yī)療器械廠,型號:HHS-11-2);溫度計;秒表(上海星鉆秒表有限公司)。

1.4 藥材的處理

取杜仲雄花茶200 g,加一定量的清水浸泡30min,加水沒過藥面1 cm,煎煮3次,時間分別為60、40、20min,合并3次濾液蒸發(fā)濃縮至 200mL(1mL含生藥1 g),裝瓶備用[4]。用同樣的方法制備杜仲皮水煎液。

2 試驗(yàn)方法

2.1 耐低溫試驗(yàn)[5]

取小鼠40只,雌雄各半,隨機(jī)分為 4組,每組10只,分別為空白對照組,杜仲皮對照組,杜仲雄花高劑量組,杜仲雄花低劑量組。每天空白對照組灌胃生理鹽水20mL/kg,杜仲皮對照組灌胃杜仲皮水煎液20mL/kg,杜仲雄花高低劑量組分別灌胃杜仲雄花茶水煎液20mL/kg,5mL/kg,連續(xù)給藥14 d。于末次給藥1 h后,將小鼠放入-25℃的低溫冰箱中,記錄其存活時間。結(jié)果見表1。

2.2 耐高溫試驗(yàn)[5]

取小鼠40只,雌雄各半,分組與給藥劑量同2.1。末次給藥1 h后,將小鼠置于250mL的錐形瓶中,然后將錐形瓶放入溫度為42℃±0.5℃的恒溫水浴鍋中,并用紗布封住瓶口。記錄小鼠在此條件下的存活時間。結(jié)果見表1,說明杜仲雄花茶能延長小鼠在高溫條件下的存活時間。

2.3 負(fù)重游泳試驗(yàn)[5]

取小鼠40只,分組與給藥劑量同2.1。末次給藥1h后,隨機(jī)抽取小鼠,每只負(fù)重(5%體重重量),然后放入深23 cm、溫度為25℃±1℃的水中游泳。以小鼠游泳至頭部深入水中15 s不再浮起為結(jié)束,記錄小鼠游泳持續(xù)時間。結(jié)果見表1。

2.4 耐缺氧試驗(yàn)[5]

取小鼠40只,分組與給藥劑量同2.1。末次給藥1 h后,將小鼠放入盛有10 g鈉石灰的磨口廣口瓶中(鈉石灰上墊濾紙用以吸收尿液),每瓶1只,瓶口涂凡士林,密封容器,擰緊瓶塞,以最后一次呼吸為指標(biāo),記錄小鼠在缺氧條件下的存活時間。結(jié)果見表1。

2.5 數(shù)據(jù)處理

所有數(shù)據(jù)用計算機(jī)SPSS 10.0軟件進(jìn)行處理,均數(shù)以表示。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,與空白對照組相比,杜仲雄花茶高、低劑量組都能顯著的延長小鼠的低溫、高溫存活時間,負(fù)重游泳時間和缺氧存活時間(P ＜0.05)。

表1 杜仲雄花茶對小鼠耐低溫,耐高溫,耐疲勞,耐缺氧能力的影響

4 討論

應(yīng)激是機(jī)體在受到各種內(nèi)外環(huán)境因素刺激時出現(xiàn)的非特異性全身反應(yīng)。外界環(huán)境的不良刺激如過度疲勞、過冷或過熱、缺氧等以及人體自身過度的憂、思、恐、怒等情感刺激,均可構(gòu)成應(yīng)激原,使機(jī)體處于應(yīng)激狀態(tài)[6]。過量或長期的有害刺激可引起機(jī)體的代謝紊亂,免疫力下降,進(jìn)而引起一系列的疾病。有多種疾病的發(fā)病均與慢性應(yīng)激有關(guān),如原發(fā)性消化性潰瘍、甲亢、高血壓、冠心病、支氣管哮喘等。慢性應(yīng)激所造成的脂質(zhì)過氧化物的長期積蓄還可損害生物膜,促使細(xì)胞發(fā)生退行性變化,加速機(jī)體器官的老化[7]。而抗應(yīng)激就是要減輕,抵抗這種應(yīng)激反應(yīng)對機(jī)體造成的不良影響。

本實(shí)驗(yàn)證實(shí)杜仲雄花茶水煎液可以延長小鼠的低溫存活時間,高溫存活時間,負(fù)重游泳時間和缺氧存活時間,有效提高小鼠的抗應(yīng)激能力,使機(jī)體對環(huán)境變化的適應(yīng)性增強(qiáng),對應(yīng)激因子引起的機(jī)體損傷具有保護(hù)作用。杜仲入藥雖已有2000多年的歷史,但是對杜仲雄花的研究卻很少,對抗應(yīng)激的報道也很少,其抗應(yīng)激機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。

[1]杜紅巖.杜仲優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)栽培[M].北京:中國林業(yè)出版社,1996:143.

[2]王丙武,王雅清,莫 華,等.杜仲雌雄株細(xì)胞學(xué)、頂芽及葉含膠量的比較[J].植物學(xué)報,1999,41(1):11-15.

[3]張康健,董娟娥,馬柏林,等.杜仲次生代謝物部位差異性的研究[J].林業(yè)科學(xué),2002,38(6):12-16.

[4]程郁昕,寧康健,呂錦芳,等.杜仲葉對小鼠中樞鎮(zhèn)靜作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國中醫(yī)藥科技,2007,14(2):98-99.

[5]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2006:778.

[6]張雪琳.關(guān)于運(yùn)動性疲勞的氧自由基-脂質(zhì)[J].河北體育學(xué)院學(xué)報,2000,14(3):67.

[7]蔡晶,王萬山,雷林生.鉤吻素子對小鼠抗應(yīng)激作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2007,24(4):317-319.

[責(zé)任編輯 李武營]

Anti-stimulation effects of Eucommia ulmoides male flower tea on mice

CHEN Bai-uan1*,LOU Li-jie1,DU Hong-yan2,FU Jian-min2,DU Lan-ying2,LI Qin1(1.Institute of Chinese Materia Medica,Henan University,Kaifeng,Henan 475004,China;2.Economic Forestry Research and Development Center,Chinese Academy of Forestry,Zhengzhou,Henan 450003,China)

Objective:To study the effects of Eucommia ulmoides male flower on the mice s ability of antistimulation.Methods:The mice were divided into four groups at random,the control group,the Eucommia fur control group,high dose group and low dose group,After the mice were administrated by gastric perfusion on design dose for 14 days,the impact on anti-stimulation action by mice s common lower temperature resistant test,higher temperature resistant test,swimming test and anti-anoxia test were conduceted,and the alive time was recorded.Results:The remarkable anti-stimulation action could be found in the different dosages of Eucommia ulmoides male flower,and could effectively extend the time of mice s lower and higher temperature resistant,loaded swimming capacity and anti-anoxia time.Conclusion:Eucommia ulmoides male flower tea has significant antistimulation action.

Eucommia ulmoides malef lower;Lower temperature-resistant;Higher tem perature resistant swimming;anti-anoxia

R285.5

A

1672-7606(2010)03-0197-03

2010-05-25

國家“十一五”科技支撐項(xiàng)目(2006BAD18B0303);國家林業(yè)局重點(diǎn)攻關(guān)項(xiàng)目(2006-61);國家“948”項(xiàng)目(2008-4-66);河南省教育廳自然科學(xué)基金(2008A360003)。

陳百泉(1962-),男,河南長垣人,副教授,碩士生導(dǎo)師,從事藥理學(xué)的教學(xué)及科研工作。