腸道細(xì)菌鑒定中血清交叉凝集現(xiàn)象的探討

張啟友

(上海市徐匯區(qū)華涇社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心檢驗(yàn)科，上海 200231)

由非志賀菌沙門菌引起的急性感染性腹瀉，已引起了大家的關(guān)注，但與志賀菌存在相同抗原的細(xì)菌卻鮮見報(bào)道。本文報(bào)道了在檢測臨床腹瀉病原菌中發(fā)現(xiàn)了一株與志賀菌呈交叉凝集的陰溝腸桿菌，現(xiàn)將檢測結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 菌株來源 臨床從腹瀉病人大便中分離檢測到的一株疑似志賀菌。

1.2 檢測用儀器、培養(yǎng)基、及試劑 ATB細(xì)菌生化鑒定儀；SS瓊脂、TSI培養(yǎng)基、葡萄糖培養(yǎng)基均由杭州天和微生物試劑公司生產(chǎn)；志賀診斷血清、沙門氏診斷血清均由成都生物制品研究所生產(chǎn)；細(xì)菌鑒定板條由生物梅里埃公司生產(chǎn)，藥敏紙片由杭州微生物試劑有限公司生產(chǎn)；上述培養(yǎng)基試劑均在有效期內(nèi)用。

1.3 方法 劃線接種于SS瓊脂培養(yǎng)，挑取可疑菌落轉(zhuǎn)種于TSI瓊脂及葡萄糖半固體培養(yǎng)后，進(jìn)行進(jìn)一步生化試驗(yàn)、血清學(xué)凝集試驗(yàn)及藥物敏感試驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 生物學(xué)特性 在SS瓊脂平板上經(jīng)培養(yǎng)后，菌落形態(tài)呈中等大小、圓形、半透明、表面濕潤光滑；在TSI瓊脂斜面呈紅色、底層黃色、不產(chǎn)氣、H2S陰性；在葡萄糖半固體黃色、不產(chǎn)氣、有動力；革蘭染色鏡檢：革蘭陰性小桿菌、無芽胞、無莢膜。

2.2 生化特性 API鑒定結(jié)果：ID32E V2.0；ODC-ADHLDC+URE-LARL-GAT+5KG-LIP-RP+BGLU-MAN+MAL+IND？BNAG-BGAL+GLU+SAC-LARA+DARL-aglu-aGAL+tre-RHA–INO-ADO-PLE-BGUR+CELSOR-aMAL-MNT-AspA-鑒定結(jié)果：陰溝腸桿菌，鑒定率id%=99.9%，符合率T=0.69不符合試驗(yàn)數(shù)=1。

2.3 血清學(xué)凝集試驗(yàn) 生理鹽水對照：–，志賀四種多價(jià)血清：＋，福氏多價(jià)血清＋，福氏血清2型＋，痢疾志賀血清3-7型：＋，痢疾志賀氏 8-12型：＋，宋內(nèi)血清：＋，沙門 A-F多價(jià)血清-。

3 討論

表1 具有交叉抗原的相關(guān)細(xì)菌

3.1 志賀菌屬是由符合腸桿菌科定義的無動力的細(xì)菌組成[1]，其檢驗(yàn)應(yīng)嚴(yán)格按照國標(biāo)中規(guī)定的生化鑒定試驗(yàn)，否則易得出錯(cuò)誤的檢驗(yàn)結(jié)果。該菌與志賀相近，革蘭染色陰性桿菌，在鑒別培養(yǎng)基上菌落形態(tài)也相近，和志賀多種血清發(fā)生凝集，說明該株菌和志賀菌屬有相關(guān)抗原。但I(xiàn)D32E生化鑒定結(jié)果為陰溝腸桿菌，分解葡萄糖，有動力，即可排除志賀菌屬。而腸桿菌科細(xì)菌間存在很多血清交叉反應(yīng)[2]，為此，在臨床檢測病原菌時(shí)，不但診斷血清凝集試驗(yàn)相符，而且生化反應(yīng)也要符合才可作出正確診斷。

在日常鑒定腸道細(xì)菌感染中，不僅腸桿菌會和志賀氏菌會產(chǎn)生交叉抗原，其他一些腸道菌也會相互之間存在交叉抗原。由于腸道菌的一些特殊菌株或者是交叉抗原的存在，導(dǎo)致會產(chǎn)生一些不正確的鑒定結(jié)果，有許多需要注意的問題。

不少細(xì)菌雖然在選擇性培養(yǎng)基上會出現(xiàn)和目標(biāo)菌株相似的形態(tài)，但不是目標(biāo)菌，如一些腸桿菌科的細(xì)菌在SS平板上的生長形態(tài)和志賀菌，沙門菌極為相似，在KIA上也出現(xiàn)相似的結(jié)果，而且血清凝集試驗(yàn)還會出現(xiàn)多種或單一血清凝集現(xiàn)象，如果不做生化鑒定，僅靠形態(tài)和血清凝集就很容易出現(xiàn)誤報(bào)的情況。

本人根據(jù)國內(nèi)多人的報(bào)道對會產(chǎn)生誤報(bào)情況的腸道細(xì)菌進(jìn)行了歸納：見表1。

僅從個(gè)人歸納的這些報(bào)道即可看出，腸道菌的血清交叉凝集現(xiàn)象是比較多見的，所以在日常鑒定中一定要注意，在日常工作中對于腸道病原菌的報(bào)告一定要認(rèn)真仔細(xì)，要嚴(yán)格按照鑒定程序進(jìn)行，不可省略步驟，或者做先入為主的經(jīng)驗(yàn)性判定，生化反應(yīng)是鑒定腸道細(xì)菌不可缺少的步驟，血清鑒定結(jié)論必須有生化結(jié)果支持，而不能只通過形態(tài)和血清凝集試驗(yàn)形成結(jié)論。對于可疑的凝集情況，當(dāng)生化結(jié)果和血清凝集都不能確定結(jié)果，甚至要通過PCR確定細(xì)菌種類。

[1]徐建國等譯.臨床微生物學(xué)手冊[M].北京:科學(xué)出版社,2005:656.

[2]李新文,金健潮,曹春遠(yuǎn),等.與痢疾志賀菌8型交叉凝集的029:KEIEC的分離鑒定[J].疾病監(jiān)測,2003,18(9):338-339.

[3]郭維植,程法稷,林成水,等.能與大腸桿菌O157(H7)抗血清交叉凝集的5種細(xì)菌的分離和鑒定[J].海峽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志,2000,16(4):4-6.

[4]頓玉慧,劉飛蘭,徐建設(shè),等.一株與沙門菌F群交叉凝集的陰溝腸桿菌[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2007,17(8):1492-1493.