明膠顆粒凝集(PA)法檢測(cè)HIV抗體假陽(yáng)性因素分析

周志軍，豐 亮，王潤(rùn)貴，喻 娜，高 慶

(江西省皮膚病專(zhuān)科醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西 南昌 330001)

艾滋病病毒(HIV)及其相關(guān)標(biāo)志物的檢測(cè)是預(yù)防HIV感染和艾滋病臨床治療中重要的環(huán)節(jié)，在艾滋病的防治工作中具有重要作用。目前作為診斷手段使用的檢測(cè)主要包括抗HIV病毒抗體檢測(cè)、病毒培養(yǎng)、核酸檢測(cè)和抗原檢測(cè)，其中對(duì)病毒抗體的檢測(cè)是常規(guī)使用的方法。因HIV感染機(jī)體后，HIV抗體是最易檢出且持續(xù)時(shí)間最長(zhǎng)的免疫標(biāo)志物，而且這類(lèi)檢測(cè)特異性、敏感性較高，方法相對(duì)簡(jiǎn)便、成熟。鑒于本實(shí)驗(yàn)室日常標(biāo)本量少，檢測(cè)周期短的情況，我們將明膠顆粒凝集(PA)法作為HIV抗體檢測(cè)首選初篩法，對(duì)于陽(yáng)性標(biāo)本再用ELISA法進(jìn)行檢測(cè)，并送省疾控中心進(jìn)行確證，結(jié)果如下。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 所有血清標(biāo)本均來(lái)自我院2007年1月～2009年11月性病門(mén)診患者，共1680例。

1.2 方法 所有標(biāo)本均使用日本富士瑞必歐生產(chǎn)的人類(lèi)免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒(PA法)進(jìn)行HIV抗體初篩檢測(cè)，陽(yáng)性結(jié)果的標(biāo)本再用萬(wàn)泰生物公司生產(chǎn)的酶聯(lián)免疫試劑盒(ELISA)進(jìn)行檢測(cè)，最后送省疾病預(yù)防控制中心采用蛋白印跡法進(jìn)行確證。標(biāo)本檢測(cè)均嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作和判斷結(jié)果，且同時(shí)測(cè)定陰性和陽(yáng)性對(duì)照血清。

2 結(jié)果 1680份血清標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 1680例血清標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果

3 討論

1680 例血清標(biāo)本采用PA法檢測(cè)出12例陽(yáng)性結(jié)果，采用ELISA法檢測(cè)后9例呈陽(yáng)性，經(jīng)省疾病預(yù)防控制中心確證8例血清標(biāo)本陽(yáng)性，采用PA法檢測(cè)有4例血清標(biāo)本出現(xiàn)假陽(yáng)性，ELISA法1例假陽(yáng)性。PA為迅速、簡(jiǎn)便、敏感度高的一種篩選辦法，適合于標(biāo)本量少，不能批量檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室，且不需要任何特殊儀器，其結(jié)果用肉眼可判別，但多種因素可導(dǎo)致HIV結(jié)果呈假陽(yáng)性：①試劑敏感度高：初篩所使用的試劑敏感度都比較高，但是特異性差一些，這樣雖然防止了“漏檢”，但卻不可避免地出現(xiàn)較多“可疑”樣本，據(jù)報(bào)道，目前醫(yī)院所使用的試劑在國(guó)家疾控中心指定的十余種試劑中，最高一種出現(xiàn)了6%的“誤差”，假陽(yáng)性率很高；②實(shí)驗(yàn)室人員操作方面，比如未嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作(反應(yīng)時(shí)間、加液量，孔間污染等)；③檢測(cè)環(huán)境等，如檢測(cè)溫度，PA法試驗(yàn)反應(yīng)板所處空間的溫度是一個(gè)重要的實(shí)驗(yàn)影響因素,所以，試驗(yàn)檢測(cè)時(shí)應(yīng)注意調(diào)節(jié)溫度,保證反應(yīng)板所處空間的溫度達(dá)到室溫(15～30℃)[1]。PA法4例陽(yáng)性結(jié)果的標(biāo)本經(jīng)WB法確證，結(jié)果為陰性，其中有兩例梅毒血清學(xué)反應(yīng)陽(yáng)性，且TRUST低度超過(guò)了1:32，說(shuō)明了高低度的梅毒血清有可能是引起PA實(shí)驗(yàn)呈假陽(yáng)性的一個(gè)重要因素，這方面也有相關(guān)報(bào)道[2-3]。眾多因素能引起PA法檢測(cè)HIV抗體出現(xiàn)假陽(yáng)性，這就要求實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)人員嚴(yán)格操作，避免可能影響結(jié)果的因素，將假陽(yáng)性率減到最低。采用PA法檢測(cè)HIV抗體適合標(biāo)本量少，檢測(cè)周期短的實(shí)驗(yàn)室，但要強(qiáng)調(diào)的是PA法不能單獨(dú)作為常規(guī)使用，必須聯(lián)合其他方法如ELISA法進(jìn)行檢測(cè)，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

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