動脈粥樣硬化中醫(yī)痰濁血瘀證候的現(xiàn)代生物學(xué)基礎(chǔ)研究1)

賈連群,楊關(guān)林

動脈粥樣硬化(AS)是導(dǎo)致中風(fēng)和冠心病最重要的原因,隨著生活水平提高、膳食結(jié)構(gòu)改變、人口老齡化程度的進一步加重,AS發(fā)病率呈現(xiàn)上升趨勢,成為威脅人類健康的殺手,是當(dāng)前醫(yī)學(xué)研究的焦點內(nèi)容之一。祖國醫(yī)學(xué)雖然沒有“動脈硬化”這一病名,但根據(jù)受累部位的不同以及所出現(xiàn)的各種癥狀,散在于“頭痛”“眩暈”“癡呆”“健忘”“中風(fēng)”“真心痛”“脈痹”“胸痹”“脫疽”等各篇中。究其發(fā)病機制,則由多種病因所致臟腑功能失調(diào),氣、血、津液運行、代謝發(fā)生障礙,產(chǎn)生痰、瘀等內(nèi)生之邪,痹阻血脈,膠結(jié)凝聚,形成粥樣斑塊。近年來,諸學(xué)者運用現(xiàn)代生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)手段,圍繞AS中醫(yī)痰濁血瘀證候機制進行了大量的研究。

1 動脈粥樣硬化中醫(yī)痰濁證候的生物學(xué)基礎(chǔ)

痰濁屬于繼發(fā)性致病因素,是人體臟腑氣血功能異常、津液代謝障礙所形成的病理產(chǎn)物。痰的形成與五臟三焦等臟腑有關(guān),各臟腑氣化功能失常、水液代謝障礙,均可產(chǎn)生痰。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明血脂增高和代謝異常與中醫(yī)學(xué)之痰濁密切相關(guān)。痰為水飲之厚濁者,當(dāng)水液中濁脂增加聚而成痰。痰濁黏滯于血脈之內(nèi),留而不去,凝聚成塊的過程也可以認(rèn)為是AS的發(fā)生過程。孫建芝等[1]對120例痰濁證患者血脂水平的研究顯示,血清總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)含量均明顯高于非痰濁證組和正常人組,并指出此3項指標(biāo)的改變可作為痰證微觀辨證的指標(biāo),即高血脂為血中之痰濁。熊尚全等[2]對96例冠心病患者的研究表明,痰證組血清載脂蛋白A-1(ApoA-1)含量下降,載脂蛋白B100(apoB100)含量及ApoB100/ApoA-1值升高。沈禮勇等[3]研究了冠心病痰濁型與血清載脂蛋白、脂蛋白組分的關(guān)系,結(jié)果表明痰濁型冠心病與脂代謝紊亂密切相關(guān)。以上研究均說明脂代謝紊亂是產(chǎn)生中醫(yī)痰濁的重要生物學(xué)基礎(chǔ)。

脂質(zhì)代謝紊亂與AS關(guān)系密切,大量流行病學(xué)調(diào)查和實驗研究結(jié)果顯示,TC、TG、LDL-C均是導(dǎo)致AS及冠心病發(fā)生的獨立危險因素;而高密度脂蛋白(HDL-C)可以通過參與膽固醇逆向轉(zhuǎn)運發(fā)揮抗AS和冠心病的作用。膽固醇逆向轉(zhuǎn)運的初始步驟是外周細胞內(nèi)游離膽固醇和磷脂經(jīng)ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運子A1(ABCA1)轉(zhuǎn)運至細胞外,與貧脂或無脂的apoA-1結(jié)合,組裝成新生圓盤形的前β-HDL。新生HDL不斷接受周圍細胞移出的游離膽固醇,在HDL分子內(nèi)膽固醇經(jīng)卵磷脂膽固醇?；D(zhuǎn)移酶(LCAT)酯化為膽固醇酯(CE)。CE轉(zhuǎn)移到HDL顆粒內(nèi)部后,逐漸形成成熟球形HDL。CE在膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白(CETP)的作用下,從HDL轉(zhuǎn)運至LDL、極低密度脂蛋白(VLDL)和中間密度脂蛋白(IDL),通過低密度脂蛋白受體(LDL-R)進入肝臟代謝,與此同時,VLDL、IDL、LDL中的TG也轉(zhuǎn)移到HDL中[4,5]。HDL內(nèi)剩余的CE則被肝細胞表面存在的HDL受體-B類Ⅰ型清道夫受體(SR-BⅠ)選擇性攝取,在肝臟內(nèi)代謝后經(jīng)膽汁排出體外。膽固醇逆向轉(zhuǎn)運促進外周組織和巨噬細胞等細胞內(nèi)膽固醇的清除,降低血漿膽固醇水平,有利于延緩AS的發(fā)生和發(fā)展。

從痰證論治AS是具有中醫(yī)特色的一種方法,筆者認(rèn)為更多結(jié)合脂質(zhì)代謝紊亂,尤其是HDL-C的膽固醇逆向轉(zhuǎn)運作用,從細胞和分子水平對痰濁型AS的發(fā)病機制進行更深入的研究,將有助于揭示AS痰濁證候的微觀生物學(xué)基礎(chǔ)。

2 動脈粥樣硬化中醫(yī)血瘀證候的生物學(xué)基礎(chǔ)

中醫(yī)學(xué)描述血瘀證為“血凝而不行”“血泣則不通”“凝血蘊里而不散”等,都說明血在脈中不能“如水之流”而發(fā)生瘀滯的狀態(tài)。“血行失度”或“血脈不通”皆是產(chǎn)生AS血瘀證候根本原因?，F(xiàn)代研究表明,血液流變學(xué)異常、血小板活化及血管內(nèi)皮損傷是AS血瘀證候的重要生物學(xué)表現(xiàn)。

血管內(nèi)皮細胞不僅是血液和血管平滑肌的屏障,而且是高度活躍的代謝庫,能合成多種血管活性物質(zhì),調(diào)節(jié)血管的舒縮功能與血液的流動性。內(nèi)皮細胞損傷是血管病變的始動因素,內(nèi)皮素(ET)是反映血管內(nèi)皮細胞損傷特異性指標(biāo)之一。ET、NO及二者的平衡,血栓素(TXA2)、前列腺素(PGI2)及二者間的平衡(TXA2/PGI2),組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)、組織型纖溶酶原激活劑抑制物(PAI)及二者的比值等是目前最常用的觀察指標(biāo)。王春喜等[6]檢測98例血瘀證患者體內(nèi)NO及ET水平,結(jié)果發(fā)現(xiàn)患者血漿NO水平及NO/ET比值較正常受試者均明顯減低,提示血管內(nèi)皮細胞內(nèi)分泌功能異常可能是血瘀證發(fā)病的病理基礎(chǔ)之一。翁維良[7]測定259例冠心病血瘀證患者血液流變學(xué)指標(biāo),結(jié)果顯示全血比黏度、血漿比黏度、紅細胞比容、血小板聚集性和纖維蛋白原均明顯升高,紅細胞沉降率加快,體外血栓的長度、干重、濕重均顯著高于健康人。

各種致病因素常導(dǎo)致炎癥細胞的激活和滲出,炎癥細胞(如中性粒細胞、單核-吞噬細胞)和血管內(nèi)皮細胞的激活可產(chǎn)生和釋放大量的氧自由基,刺激單核-吞噬細胞產(chǎn)生和分泌大量的細胞因子,在炎癥病理和纖維化發(fā)生發(fā)展中起重要作用。這可揭示血瘀證的部分病理生理機制。研究證實在AS從早期內(nèi)皮被修飾的脂質(zhì)活化到最終的斑塊破裂都有炎性反應(yīng)的參與[8]。目前認(rèn)為AS發(fā)生時諸多細胞炎癥因子的表達與核因子-κB(NF-κB)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的開放有關(guān)。NF-κB信號通路活化與AS發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān),以該信號通路為切入點,深入探討AS血瘀證候的分子生物學(xué)基礎(chǔ)將對揭示AS機制提供有意義的線索。

3 動脈粥樣硬化中醫(yī)痰濁血瘀證候與組學(xué)技術(shù)

中醫(yī)理論認(rèn)為,疾病的發(fā)生主要是機體整體功能的失調(diào),證候是疾病在發(fā)生發(fā)展過程中某一階段的病理變化實質(zhì)的概括,是機體內(nèi)因和環(huán)境外因綜合作用的機體反應(yīng)狀態(tài),可見證候有著明顯的整體性。近年來隨著人類基因組計劃的進行,生命科學(xué)領(lǐng)域中新的生物學(xué)技術(shù)不斷出現(xiàn),后基因組時代出現(xiàn)的“組學(xué)技術(shù)”,即基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)及代謝組學(xué)技術(shù)均以高通量、大規(guī)模實驗方法和計算機統(tǒng)計分析為特征,同時還具有“整體性研究”和“多靶點研究”的特點,這為從整體的角度,全面探討AS痰濁血瘀的分子生物學(xué)機制提供了可能。

趙慧輝等[9]利用二維凝膠電泳和質(zhì)譜分析技術(shù),探討了12例冠心病不穩(wěn)定型心絞痛血瘀證患者和12例正常對照者血漿蛋白表達,急性時相反應(yīng)負相蛋白、載脂蛋白、凝血相關(guān)蛋白差異表達,提示冠心病不穩(wěn)定型心絞痛血瘀證可能與炎癥反應(yīng)、脂代謝紊亂以及凝血功能異常相關(guān)。宋劍南等[10]運用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù),分析了高脂血癥及AS不同痰瘀證候患者血漿特異性蛋白質(zhì)群與臟腑功能之間的相關(guān)性,結(jié)果發(fā)現(xiàn)高脂血癥及AS不同痰瘀證候可能的血漿標(biāo)志蛋白與不同的臟腑功能之間存在不同的關(guān)聯(lián)組合。劉衛(wèi)紅等[11]采用代謝組學(xué)技術(shù),探討痰瘀證候的動態(tài)演變、時相特點和由痰致瘀在代謝方面的變化,取得了有意義的結(jié)果,發(fā)現(xiàn)高脂血癥前期以脂質(zhì)代謝紊亂為特點,隨著病程進展,參與血液凝固過程的乙酰糖蛋白的出現(xiàn),同時酮體及乳酸的升高。代謝組學(xué)等系統(tǒng)生物學(xué)技術(shù)手段為高脂血癥及AS痰瘀證候物質(zhì)基礎(chǔ)研究提供了嶄新而可靠的技術(shù)平臺,人們可能從代謝組學(xué)分析中找出痰瘀演變過程特異的標(biāo)志性代謝產(chǎn)物,以闡釋中醫(yī)痰瘀證候的生物學(xué)本質(zhì)。

近年來,對AS痰濁血瘀證候研究取得了很大進展,各位學(xué)者從生物化學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)等諸多方面對痰濁血瘀證形成機制進行綜合的研究,尤其是基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)技術(shù)的引入,有力推動了中醫(yī)痰濁血瘀理論研究的進程。AS痰濁血瘀證候基礎(chǔ)的研究應(yīng)該在結(jié)合臨床的基礎(chǔ)上,盡可能保留痰濁血瘀證的中醫(yī)特色、遵循中醫(yī)自身特點,更充分地運用組學(xué)技術(shù)方法,從基因、蛋白和小分子代謝物水平及進行深入研究,以豐富和發(fā)展中醫(yī)基礎(chǔ)理論并為中醫(yī)臨床治療學(xué)提供客觀的分子生物學(xué)依據(jù)。

[1] 孫建芝,牛曉亞,韓麗華,等.痰濁證微觀辨證指標(biāo)的實驗研究[J].河南中醫(yī),1996,16(2):21-22.

[2] 熊尚全,林如風(fēng),許少鋒,等.冠心病中醫(yī)辨證與載脂蛋白關(guān)系的初步研究[J].福建中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,1994,4(3):7-9.

[3] 沈禮勇.冠心病痰濁型與血清載脂蛋白、脂蛋白組分的關(guān)系[J].中國醫(yī)藥學(xué)報,1991,6(1):36.

[4] LewisGF,Rader DJ.New insights in to the regulation of HDLmetabolism and reverse cholesterol transport[J].Circ Res,2005,96(2):1221-1232.

[5] Rye KA,Clay MA,Barter PJ.Remodelling of high density lipoprotein by plasma factors[J].Atherosclerosis,1999,145(2):227-238.

[6] 王春喜,齊清會,吳咸中.內(nèi)皮素、一氧化氮等內(nèi)皮細胞活性因子與動脈硬化閉塞癥血瘀證關(guān)系的研究[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志,1999,19(8):463-464.

[7] 翁維良,崔晶,王怡.冠心病心絞痛患者259例血液粘度測定[J].中華心血管病雜志,1984,12(3):183.

[8] Libby P.Inflammation in atherosclerosis[J].Nature,2002,420(6917):868-874.

[9] 趙慧輝,王偉.不穩(wěn)定性心絞痛血瘀證的血漿蛋白質(zhì)組學(xué)研究[J].化學(xué)學(xué)報,2009,67(2):167-173.

[10] 宋劍南,劉軍蓮,房祥忠,等.高脂血癥和動脈粥樣硬化不同痰瘀證候患者血漿蛋白質(zhì)差異表達譜與臟腑功能的關(guān)系[J].中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報,6(12):1233-1237.

[11] 劉衛(wèi)紅,張琪,顏賢忠,等.高脂血癥及動脈粥樣硬化痰瘀演變的代謝組學(xué)研究[J].中醫(yī)雜志,2008,49(8):738-741.