2型糖尿病大鼠應(yīng)用土鱉蟲(chóng)與黃芪對(duì)體液免疫及補(bǔ)體的影響①

楊耀芳 錢(qián) 巍 金 蕾 （復(fù)旦大學(xué)附屬上海市第五人民醫(yī)院,上海 200240）

2型糖尿病大鼠應(yīng)用土鱉蟲(chóng)與黃芪對(duì)體液免疫及補(bǔ)體的影響①

楊耀芳 錢(qián) 巍 金 蕾 （復(fù)旦大學(xué)附屬上海市第五人民醫(yī)院,上海 200240）

目的:研究土鱉蟲(chóng)與黃芪合用對(duì)2型糖尿病大鼠體液免疫系統(tǒng)及補(bǔ)體的影響。方法:采用灌胃高脂乳劑加腹腔注射小劑量鏈脲佐菌素建立大鼠糖尿病動(dòng)物模型,觀察土鱉蟲(chóng)與黃芪合用對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血糖、血脂及免疫指標(biāo)的影響。造模前后稱體重,解剖分離心、肝、脾、肺、腎、胸腺各臟器稱重,計(jì)算臟器系數(shù)。結(jié)果:隨著糖尿病模型的形成,大鼠的血糖升高,膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白升高;免疫球蛋白（Ig）:IgG含量下降,IgA含量升高,補(bǔ)體（CH 50）水平下降,補(bǔ)體 C3、C4水平升高。體重下降,心、肝、肺增重,胸腺重量減輕。土鱉蟲(chóng)與黃芪合用能降低糖尿病大鼠的血糖、膽固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白,升高高密度脂蛋白,提高IgA含量、補(bǔ)體CH50水平,降低補(bǔ)體C3水平;能改善糖尿病大鼠的體重下降,糾正增重的心臟,緩解脾臟的萎縮,但不能糾正胸腺免疫器官重量的減輕。結(jié)論:土鱉蟲(chóng)與黃芪合用能降低2型糖尿病大鼠的血糖,可能與提高IgA含量、補(bǔ)體CH 50水平、降低C3水平,對(duì)免疫系統(tǒng)及補(bǔ)體系統(tǒng)有一定的免疫調(diào)節(jié)作用有關(guān)。

土鱉蟲(chóng);黃芪;免疫;補(bǔ)體;2型糖尿病

糖尿病（Diabetesmellitus DM）是一種遺傳和環(huán)境因素相互作用所致的慢性高血糖為主要特征,同時(shí)伴有脂肪和蛋白質(zhì)代謝紊亂的一組代謝性疾病。其病因復(fù)雜,病情多樣,常引起心腦血管、腎、眼、足及神經(jīng)等臟器的并發(fā)癥,嚴(yán)重危害著人類(lèi)的健康。根據(jù)發(fā)病機(jī)制不同,分為1型糖尿?。ㄒ葝u素依賴型）和2型糖尿病（非胰島素依賴型）,后者約占糖尿病總數(shù)的85%以上。2型糖尿病屬中醫(yī)消渴病癥范疇,其公認(rèn)的主要病理機(jī)制及辯證分型為陰虛燥熱,氣陰兩虛及陰陽(yáng)兩虛三型,并且認(rèn)為消渴日久,氣陰必虧,氣虛陰虛是血瘀的病理基礎(chǔ)。本研究旨在以活血化瘀和補(bǔ)虛滋陰治療糖尿病為切入點(diǎn),觀察對(duì)體液免疫及補(bǔ)體的影響,從一個(gè)新的角度為2型糖尿病治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SD大鼠,清潔級(jí),體重160～180克。雌、雄兼用。由上海西普爾-必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供（SCXK滬2008-0016）。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器 YB201電子天平,上海?？惦娮觾x器廠;MA110型電子分析天平,上海第三天平儀器廠;羅康全活力型血糖檢測(cè)儀,德國(guó)羅氏診斷公司;TDL-5型高速離心機(jī),上海安亭科學(xué)儀器廠。

1.3 藥品與試劑 土鱉蟲(chóng)口服液和黃芪口服液均由本院藥劑科提供;二甲雙胍（批號(hào):061208）,上海醫(yī)藥股份有限公司;丙基硫氧嘧啶原料（批號(hào):070102）,上海復(fù)星朝暉藥業(yè)有限公司;膽固醇（分析純,批號(hào):F20061011）、膽酸鈉（批號(hào):F20040625）、吐溫80（化學(xué)純,批號(hào):F20061121）、1.2-丙二醇（分析純,批號(hào):T20060317）,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 2型糖尿病模型大鼠的建立與分組 60只SD大鼠雌雄兼有,普食適應(yīng)性喂養(yǎng)2周后隨機(jī)分為6組,選取10只作為正常對(duì)照組,其余各組灌胃（ig）高脂肪乳劑（配方:膽固醇20克、豬油40克、膽酸鈉4克、丙基硫氧嘧啶2克,加吐溫80至40m l,丙二醇60m l,蒸餾水加至200ml）,以上述高脂肪乳劑灌胃飼養(yǎng),10天后再以STZ（50mg/kg,ip）誘發(fā)糖尿病。注射后3～7天檢測(cè)血糖,血糖值大于 11 mmol/L者納入實(shí)驗(yàn),分為6組,每組10只:①正常對(duì)照組（NormalⅠ）:ig蒸餾水（1ml/100克體重）每日1次,連續(xù)4周。②土鱉蟲(chóng)對(duì)照組（NormalⅡ,未造模僅用藥）:ig土鱉蟲(chóng)（10 g/kg）每日1次,連續(xù)4周。③模型對(duì)照組（ModelⅢ）:ig高脂乳劑每日1次,連續(xù)10日,ip STZ（50mg/kg）,ig蒸餾水（1 ml/100mg體重）每日1次,連續(xù)4周。④二甲雙胍治療對(duì)照組（TreatⅠ）:ig高脂乳劑每日 1次,連續(xù)10日,ip STZ（50 mg/kg）,ig二甲雙胍（156mg/kg體重）,每日1次,連續(xù)4周。⑤土鱉蟲(chóng)治療組（TreatⅡ）:ig高脂乳劑每日1次,連續(xù)10日,ip STZ（50mg/kg）,ig土鱉蟲(chóng)（10 g/kg）每日1次,連續(xù)4周。⑥土鱉蟲(chóng) +黃芪治療組（TreatⅢ）:ig高脂乳劑每日1次,連續(xù)10日,ig土鱉蟲(chóng)（10 g/kg）+黃芪（3.5 g/kg）。4周后分別采血檢測(cè)血漿中 C3、C4、CH50、IgG 、IgA 和 IgM,均同時(shí)觀察正常對(duì)照組（包括土鱉蟲(chóng)對(duì)組織即未造模僅用藥）及各治療組（土鱉蟲(chóng)組;土鱉蟲(chóng)+黃芪組及二甲雙胍組）體重及其臟器的變化,計(jì)算臟器系數(shù)。

1.4.2 指標(biāo)的檢測(cè)及方法

1.4.2.1 血糖用干式分析法 儀器:德國(guó)羅氏診斷公司羅康全活力型血糖檢測(cè)儀,操作步驟:①75%酒精消毒后,大鼠尾尖取血;②用血糖測(cè)試紙蘸取血液,放入血糖儀,記錄血糖值。

1.4.2.2 血脂4項(xiàng) 甘油三酯（TG）、總膽固醇（CHO）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL）。儀器:美國(guó)羅氏MODULARP800全自動(dòng)生化分析儀。各指標(biāo)參數(shù)按羅氏公司說(shuō)明書(shū)設(shè)定,包括:甘油三酯（TG）氧化酶法;總膽固醇（CHO）氧化酶法;低密度脂蛋白膽固醇（LDL）氧化酶法;高密度脂蛋白膽固醇氧化酶法（HDL）。腹腔注射200 g/L烏拉坦（1.5/kg）麻醉后從腹主動(dòng)脈取血[1]。

1.4.2.3 免疫指標(biāo)6項(xiàng) 免疫球蛋白（Ig）是檢查體液免疫功能最常用的方法,通常檢測(cè)IgG、IgM、IgA這三類(lèi)Ig。總補(bǔ)體活性（CH50）以及補(bǔ)體成分C3、C4可以反映補(bǔ)體功能。用免疫透射比濁法檢測(cè)。

1.4.2.4 觀察體質(zhì)量變化 SD大鼠,雌雄兼有,分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組及治療組,除正常對(duì)照組外,均給予高脂乳劑及STZ誘發(fā)2型糖尿病,治療組分為土鱉蟲(chóng)組及土鱉蟲(chóng)+黃芪組,陽(yáng)性對(duì)照組給予二甲雙胍,第2、4周分別稱體質(zhì)量。

1.4.2.5 觀察臟器重量變化 SD大鼠,雌雄兼有,分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組及治療組,除正常對(duì)照組外,均給予高脂乳劑及STZ誘發(fā)2型糖尿病,治療組分為土鱉蟲(chóng)組及土鱉蟲(chóng)+黃芪組,陽(yáng)性對(duì)照組給予二甲雙胍,4周后實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),各組大鼠,分別解剖,分離臟器,用分析天平稱重,計(jì)算臟器系數(shù)（mg/100 g體重）。

1.4.2.6 觀察一般狀態(tài) SD大鼠,雌雄兼有,分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組及治療組,除正常對(duì)照組外,均給予高脂乳劑及STZ誘發(fā)2型糖尿病,治療組分為土鱉蟲(chóng)組及土鱉蟲(chóng)+黃芪組,陽(yáng)性對(duì)照組給予二甲雙胍。給藥期間供各組大鼠足量食水,觀察動(dòng)物的體重、活動(dòng)、攝食、飲水及排泄等情況。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)2型糖尿病模型大鼠血糖的影響 表1的結(jié)果顯示,造模前各組之間的血糖無(wú)明顯差異,用高脂乳劑加STZ誘發(fā)2型糖尿病模型的各組血糖明顯高于正常對(duì)照組（NormalⅠ）,在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中模型組血糖值明顯高于正常對(duì)照組,而土鱉蟲(chóng)、土鱉蟲(chóng)+黃芪組及二甲雙胍組治療4周,有不同程度降低,1周表現(xiàn)出降糖的趨勢(shì)與模型對(duì)照組相比有顯著差異,但用藥各組的血糖值均未恢復(fù)正常,與正常對(duì)照組也有差異。與正常對(duì)照組相比,土鱉蟲(chóng)對(duì)照組（NormalⅡ）對(duì)正常大鼠血糖無(wú)明顯影響。

2.2 對(duì)2型糖尿病模型大鼠血脂的影響 由表2可見(jiàn),用高脂乳劑及STZ誘發(fā)2型糖尿病模型檢測(cè)HDL 、LDL 、TG 、CHO,糖尿病模型組與正常對(duì)照組比較,CHO、TG、LDL均高于正常對(duì)照組,HDL低于正常對(duì)照組,表明模型復(fù)制成功。用藥4周后,土鱉蟲(chóng)組、土鱉蟲(chóng)+黃芪組和二甲雙胍組的CHO、TG和LDH均低于模型對(duì)照組,HDL高于模型對(duì)照組。土鱉蟲(chóng)對(duì)正常大鼠血脂影響不明顯。

12月7日1版《經(jīng)濟(jì)學(xué)者產(chǎn)業(yè)鏈》，其“只要是到了某個(gè)級(jí)別的學(xué)者講座的入場(chǎng)券，有的高達(dá)數(shù)萬(wàn)元”，用“只要到了某個(gè)級(jí)別，學(xué)者講座的入場(chǎng)券……”為宜。

表1 對(duì)2型糖尿病模型大鼠血糖的影響（±s,n=10）Tab.1 Influence on the levelof blood glucose in rat with type2 diabetes（±s,n=10）

表1 對(duì)2型糖尿病模型大鼠血糖的影響（±s,n=10）Tab.1 Influence on the levelof blood glucose in rat with type2 diabetes（±s,n=10）

Note:Treatgroups compared with ModelⅢ,1）P＜0.05,2）P＜0.01;NormalⅡ comparedwith NormalⅠ ,3）P＞0.05.

Blood glucose value Blood glucose value aftermodel（mmol/L）Blood glucose value aftermedication（mmol/L）Groups n Beforemodel（mmol/L）High fatmodel（before STZ）Hyperglycem iamodel（after STZ）Firstweek Fourth week NormalⅠ 10 6.01±0.36 5.72±0.57 5.41±0.43 5.04±0.72 5.11±0.68 NormalⅡ 10 6.19±0.713） 5.43±0.913） 5.35±0.493） 5.50±0.633） 4.93±0.683）ModelⅢ 10 6.05±0.59 5.75±0.39 21.01±3.51 23.79±6.91 22.80±9.49 TreatⅠ 10 5.98±0.42 5.98±0.41 22.56±5.15 16.83±6.391） 10.30±9.961）TreatⅡ 10 5.76±0.44 5.72±0.67 21.62±5.56 19.55±8.01 13.08±6.261）TreatⅢ 10 5.73±0.57 5.85±0.29 20.83±4.32 17.34±7.25 9.70±6.862）

表2 對(duì)2型糖尿病模型大鼠血脂的影響（±s,n=10）Tab.2 Influence on the level of b lood fats in rat with type2 diabetes（±s,n=10）

表2 對(duì)2型糖尿病模型大鼠血脂的影響（±s,n=10）Tab.2 Influence on the level of b lood fats in rat with type2 diabetes（±s,n=10）

Note:Treatgroups compared with ModelⅢ,1）P＜0.05,2）P＜0.01;NormalⅡ comparedwith NormalⅠ ,3）P＞0.05.

Groups n Monitor value of blood fatsaftermedication（mmol/L）CHO TG HDL LDL NormalⅠ 10 1.33±0.37 0.52±0.06 2.47±0.2 0.21±0.04 NormalⅡ 10 1.21±0.303） 0.51±0.043） 2.40±0.143） 0.26±0.033）ModelⅢ 10 1.83±0.47 0.84±0.30 1.07±0.5 1.26±0.06 TreatⅠ 10 1.46±0.281） 0.56±0.111） 1.70±0.61） 0.25±0.052）TreatⅡ 10 1.47±0.131） 0.62±0.131） 1.92±0.81） 0.28±0.072）TreatⅢ 10 1.50±0.161） 0.59±0.121） 1.90±0.42） 0.27±0.062）

表3 對(duì)2型糖尿病模型大鼠補(bǔ)體含量的影響（±s,n=10）Tab.3 In fluence on the content of complement in rat withtype 2 diabetes（±s,n=10）

表3 對(duì)2型糖尿病模型大鼠補(bǔ)體含量的影響（±s,n=10）Tab.3 In fluence on the content of complement in rat withtype 2 diabetes（±s,n=10）

Note:Treat groups compared with ModelⅢ,1）P＜0.05,2）P＜0.01;NormalⅡ compared with NormalⅠ,3）P＞0.05,4）P＜0.01.

Groups n Monitor value of the complement aftermedication（mmol/L）CH50（KU/L） C3（mg/L） C4（mg/L）NormalⅠ 10 36.70±4.79 0.44±0.06 0.06±0.02 NormalⅡ 10 34.00±3.673） 0.53±0.054） 0.07±0.023）ModelⅢ 10 16.50±9.09 0.57±0.04 0.09±0.03 TreatⅠ 10 28.00±3.462） 0.45±0.042） 0.07±0.01 TreatⅡ 10 26.33±5.122） 0.52±0.061） 0.07±0.03 TreatⅢ 10 28.50±5.972） 0.48±0.082） 0.07±0.02

2.3 對(duì)2型糖尿病模型大鼠補(bǔ)體含量的影響 由表3結(jié)果可以看出,用藥各組及正常對(duì)照組補(bǔ)體CH50的水平均高于模型對(duì)照組,土鱉蟲(chóng)不影響正常大鼠補(bǔ)體CH50水平;用藥各組及正常對(duì)照組補(bǔ)體C3水平均低于模型對(duì)照組,土鱉蟲(chóng)能提高正常大鼠的C3水平,與正常對(duì)照組比較,差異顯著（P＜0.01）;用藥各組及正常對(duì)照組補(bǔ)體C4水平與模型對(duì)照組相比,有下降趨勢(shì),但用藥各組與模型組相比差異不顯著（P＞0.05）。表明土鱉蟲(chóng)組和土鱉蟲(chóng)+黃芪組能提高補(bǔ)體CH50水平,降低補(bǔ)體C3水平;土鱉蟲(chóng)不影響正常大鼠補(bǔ)體CH50、C4水平,但能提高補(bǔ)體C3水平。

表4 對(duì)2型糖尿病模型大鼠免疫球蛋白含量的影響（±s,n=10）Tab.4 Influence on the contentof immunoglobulin in ratwith type 2 diabetes（±s,n=10）

Note:Treat grops compared with ModelⅢ,1）P＜0.05,2）P＜0.01;Compared with NormalⅠ ,3）P＜0.05.

Groups n Monitor value of immunoglobulin aftermedication（mmol/L）IgG（g/L） IgA（g/L） IgM（g/L）NormalⅠ 10 1.12±0.70 0.02±0.01 0.14±0.06 NormalⅡ 10 0.68±0.343） 0.02±0.01 0.16±0.03 ModelⅢ 10 0.60±0.013） 0.05±0.01 0.16±0.06 TreatⅠ 10 0.57±0.063） 0.03±0.012） 0.18±0.04 TreatⅡ 10 0.70±0.233） 0.03±0.021） 0.19±0.05 TreatⅢ 10 0.52±0.043） 0.02±0.012） 0.21±0.05

2.4 對(duì)2型糖尿病模型大鼠免疫球蛋白含量的影響 由表4結(jié)果可以看出,高脂乳劑及STZ誘發(fā)2型糖尿病模型,檢測(cè)免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）,可見(jiàn)糖尿病模型組及用藥各組IgG低于正常對(duì)照組。糖尿病模型組IgA水平高于正常對(duì)照組,三個(gè)用藥組的IgA均明顯低于糖尿病模型對(duì)照組,差異顯著;至于IgM水平,除了正常對(duì)照組外,其余各組呈上升趨勢(shì)。表明建立2型糖尿病模型大鼠檢測(cè)其IgG、IgA及IgM水平與正常對(duì)照組比較,IgG是降低的,IgA及IgM是升高的。土鱉蟲(chóng)、土鱉蟲(chóng)+黃芪能糾正升高的IgA水平,但不能糾正升高IgM水平。土鱉蟲(chóng)能降低正常大鼠IgG水平。

表5 對(duì)2型糖尿病模型大鼠體質(zhì)量的影響（±s,n=10）Tab.5 Influence on body weight inm ice with type2 diabetes（±s,n=10）

表5 對(duì)2型糖尿病模型大鼠體質(zhì)量的影響（±s,n=10）Tab.5 Influence on body weight inm ice with type2 diabetes（±s,n=10）

Note:Treatgroups compared with ModelⅢ,1）P＜0.05,2）P＜0.01.

Groups n Beforemodel（g）Duringmodel（g）Weight aftermedication（g）High fatmodel Hyperglycem iamodel Second week Fourth week NormalⅠ 10 179.76±4.66 248.34±32.30 306.72±26.74 364.38±33.99 396.56±38.92 NormalⅡ 10 178.88±4.29 254.70±23.43 311.75±30.31 363.67±38.31 374.85±44.66 ModelⅢ 10 181.63±5.56 252.93±18.39 244.60±24.93 221.70±5.65 222.65±7.71 TreatⅠ 10 173.38±2.93 264.94±10.00 253.92±16.43 282.60±56.042） 337.00±37.242）TreatⅡ 10 175.68±6.89 250.98±12.00 252.72±14.57 268.70±52.501） 275.43±365.461）TreatⅢ 10 179.66±4.51 236.62±12.66 245.46±11.48 260.06±52.282） 279.04±63.631）

表6 對(duì)2型糖尿病模型大鼠臟器質(zhì)量的影響（±s,n=10,mg/100 g體質(zhì)量）Tab.6 Influence on organ weight in ratwith type 2 diabetes（±s,n=10,mg/100 g weight）

表6 對(duì)2型糖尿病模型大鼠臟器質(zhì)量的影響（±s,n=10,mg/100 g體質(zhì)量）Tab.6 Influence on organ weight in ratwith type 2 diabetes（±s,n=10,mg/100 g weight）

Note:Treatgroups compared with ModelⅢ,1）P＜0.05,2）P＜0.01;NormalⅡ compared with NormalⅠ ,3）P＞0.05,4）P＜0.05.

Groups n Organweight and bodyweight ratio（mg/100 g weight）Heart Liver Spleen Lungs Kidney Thymus NormalⅠ 10 36.13±2.97 350.78±47.50 22.40±3.75 46.86±10.68 72.35±7.52 1.31±0.34 NormalⅡ 10 36.87±4.653） 325.60±26.953） 20.34±3.133） 47.28±6.043） 69.72±7.743） 0.57±0.364）ModelⅢ 10 42.06±5.97 399.04±61.46 18.48±2.97 63.77±10.92 109.50±31.37 0.96±0.35 TreatⅠ 10 32.37±6.552） 301.12±51.682） 18.34±3.66 51.71±10.761） 75.47±5.132） 1.34±0.421）TreatⅡ 10 37.11±4.191） 327.33±51.541） 21.17±2.401） 57.66±10.36 106.83±37.45 0.62±0.191）TreatⅢ 10 34.39±6.091） 336.68±82.061） 22.09±3.511） 58.77±15.05 81.73±17.101） 1.24±0.29

2.5 對(duì)2型糖尿病模型大鼠體質(zhì)量的影響 由表5的結(jié)果可見(jiàn),造模前各組大鼠體質(zhì)量無(wú)明顯差異（P＞0.05）,給予高脂乳劑及STZ誘發(fā)糖尿病后各組體質(zhì)量比正常對(duì)照組輕,差異顯著（P＜0.01）。給藥后第2周的體質(zhì)量與模型對(duì)照組比較,土鱉蟲(chóng)、土鱉蟲(chóng)+黃芪組的體質(zhì)量增加明顯（P＜0.05）,二甲雙胍組的體質(zhì)量與模型對(duì)照組比較有顯著差異（P＜0.01）。隨著給藥時(shí)間延長(zhǎng)至第4周,給藥各組的體質(zhì)量均高于模型對(duì)照組,差異顯著;與此同時(shí),土鱉蟲(chóng)組、土鱉蟲(chóng)+黃芪組及二甲雙胍陽(yáng)性對(duì)照組的體質(zhì)量均比正常對(duì)照組輕,差異顯著（P＜0.01）。土鱉蟲(chóng)對(duì)照組對(duì)正常大鼠體質(zhì)量無(wú)明顯影響。

2.6 對(duì)2型糖尿病模型大鼠臟器質(zhì)量的影響 由表6可見(jiàn),模型對(duì)照組心、肝、肺、腎質(zhì)量均重于正常對(duì)照組,土鱉蟲(chóng)組、土鱉蟲(chóng)+黃芪組與二甲雙胍陽(yáng)性對(duì)照組能糾正2型糖尿病大鼠增重的心臟、肝臟;三個(gè)用藥組能不同程度減輕增重的肺臟。唯二甲雙胍治療對(duì)照組有差異（P＜0.05）;土鱉蟲(chóng)、土鱉蟲(chóng)+黃芪能改善脾臟的萎縮,而二甲雙胍無(wú)此作用,二甲雙胍與土鱉蟲(chóng)+黃芪能糾正增重的腎臟。與模型對(duì)照組相比,二甲雙胍能糾正萎縮的胸腺,而正常大鼠用土鱉蟲(chóng)、2型糖尿病大鼠用土鱉蟲(chóng)治療與正常對(duì)照組相比,胸腺萎縮明顯（P＜0.01）。

2.7 對(duì)2型糖尿病模型大鼠一般狀態(tài)影響 實(shí)驗(yàn)期間,模型組大鼠均出現(xiàn)多飲、多食、多尿及消瘦等代謝紊亂的癥狀。生長(zhǎng)減慢,體質(zhì)量減輕、體毛減少、凌亂、枯黃無(wú)光澤、活動(dòng)減少、墊料極潮,每日更換1～2次。

3 討論

根據(jù)國(guó)際糖尿病聯(lián)盟統(tǒng)計(jì),目前全球糖尿病患者為2.33億;中國(guó)衛(wèi)生部統(tǒng)計(jì),我國(guó)患病人數(shù)為4 000萬(wàn),其中2型糖尿病患者占國(guó)內(nèi)主要大型醫(yī)院就診糖尿病患者的比例高達(dá)95%以上[2],其最嚴(yán)重的慢性并發(fā)癥之一是心血管系統(tǒng)病變,是為常人的3～4倍,雖然糖尿病血管并發(fā)癥因發(fā)生器官不同而臨床表現(xiàn)各異,但他們卻有相同或相似的病理機(jī)制。臨床上糖尿病患者常患有自身免疫性疾病,并有特異性人類(lèi)白細(xì)胞抗原（HLA）的發(fā)現(xiàn),胰島細(xì)胞自身抗體（TCA）的發(fā)現(xiàn),正說(shuō)明糖尿病的發(fā)生與自身免疫關(guān)系密切。糖尿病人由于自身免疫系統(tǒng)存在障礙,而不能正確識(shí)別自身的抗體,使胰島β細(xì)胞的功能發(fā)生改變,引起機(jī)體血糖含量顯著高于正常。由于高血糖可引起體內(nèi)蛋白糖化,在組織內(nèi)沉積,并可引起廣泛的蛋白質(zhì)交聯(lián),是血管病變的重要特征。因此,控制高血糖,將可能成為預(yù)防或延緩糖尿病血管并發(fā)癥發(fā)生的新途徑。本研究表明土鱉蟲(chóng)、土鱉蟲(chóng)+黃芪可降低2型糖尿病大鼠血糖的水平。

補(bǔ)體系統(tǒng)是由多種糖蛋白組成的蛋白酶解系統(tǒng),根據(jù)生物學(xué)功能分為補(bǔ)體固有成分、補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白和補(bǔ)體受體。在機(jī)體抗感染、免疫調(diào)節(jié)、免疫監(jiān)視中發(fā)揮重要作用,特定情況下也可以導(dǎo)致組織損傷。在臨床上同時(shí)測(cè)定總補(bǔ)體活性CH50以及補(bǔ)體成分C3、C4可以反映補(bǔ)體功能。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),補(bǔ)體成分及活化產(chǎn)物廣泛沉積在糖尿病患者的血管病變組織中,提示補(bǔ)體活化參與糖尿病血管病變的發(fā)生;還發(fā)現(xiàn)2型糖尿病患者C3升高,C3是心臟性死亡、再發(fā)性心梗等嚴(yán)重心臟事件的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,2型糖尿病模型大鼠補(bǔ)體CH 50水平下降,C3水平升高,表示補(bǔ)體系統(tǒng)受損、心臟受損;土鱉蟲(chóng)、土鱉蟲(chóng)+黃芪能恢復(fù)補(bǔ)體水平,提升免疫功能,降低C3水平,改善心臟損害。與此同時(shí),糖尿病模型大鼠的心臟均重于正常對(duì)照組,土鱉蟲(chóng)、土鱉蟲(chóng)+黃芪能糾正2型糖尿病大鼠增重的心臟,改善糖尿病并發(fā)心臟受損。此外,尚可改善脾臟的萎縮,糾正增重的肝臟、腎臟及肺。然而,中醫(yī)認(rèn)為糖尿病與肺、脾、腎三臟虧虛有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)用土鱉蟲(chóng)、黃芪治療糖尿病,以期達(dá)到益氣健脾,滋陰補(bǔ)腎兼活血通絡(luò)之目的。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明,脂質(zhì)代謝紊亂可影響血小板的粘附和聚集,使血小板聚集功能增強(qiáng),繼發(fā)性促凝增加而處于高凝狀態(tài),此屬于中醫(yī)“瘀血”范疇。祖國(guó)醫(yī)學(xué)稱糖尿病為消渴癥,根據(jù)中醫(yī)”消渴血瘀”理論,2型糖尿病患者具有氣陰兩虛及血瘀現(xiàn)象,這是因?yàn)橄嗜站?氣陰必虧,氣虛陰虛,所以糖尿病與瘀血的關(guān)系密不可分?？梢?jiàn)瘀血既是一種致病因素,又是一種病理產(chǎn)物,并貫穿于疾病的始終,采用化瘀、抗凝、通瘀泄瀉之中藥土鱉蟲(chóng)其作用平和,不傷陰津[3],能降低2型糖尿病大鼠的CHO、TG、HDL,升高LDL,從而糾正血脂紊亂。然而土鱉蟲(chóng)對(duì)正常大鼠各項(xiàng)指標(biāo)的影響,已在各項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果中描述,至于對(duì)正常大鼠某些免疫指標(biāo)、免疫器官影響的確切機(jī)理有待進(jìn)一步研究闡明。黃芪入肺、脾經(jīng),具有補(bǔ)中益氣、升陽(yáng)益表等功能,藥理研究表明:黃芪含有黃芪皂苷、黃芪多糖、氨基酸類(lèi)及微量元素等多種成分,可擴(kuò)血管、降血壓;增加血流量,降低血小板粘附率,從而改善微循環(huán)[4]。本研究結(jié)果表明,應(yīng)用黃芪針對(duì)氣陰兩虛發(fā)病之本起到抑制病機(jī)進(jìn)展、截?cái)嗖?shì)作用,土鱉蟲(chóng)有化淤、抗凝、通痰泄瀉作用能降血糖降血脂,兩者合用共同治療2型糖尿病。

綜上所述,本實(shí)驗(yàn)以高脂、高糖與STZ制備2型糖尿病大鼠模型。M c Garry認(rèn)為脂代謝紊亂是糖代謝紊亂的根源,并將糖尿病稱為糖脂病,脂質(zhì)對(duì)β細(xì)胞毒性作用隨葡萄糖水平增加而增加[5,6]。本研究結(jié)果表明:體液免疫、補(bǔ)體系統(tǒng)與糖、脂代謝紊亂及臟器受損密切相關(guān),也是2型糖尿病及其并發(fā)癥的根源。將土鱉蟲(chóng)與黃芪合用增加適應(yīng)癥即治療糖尿病及其心血管并發(fā)癥,可能與其提高IgA含量,補(bǔ)體CH50水平,降低C3水平對(duì)免疫系統(tǒng)及補(bǔ)體系統(tǒng)有一定的免疫調(diào)節(jié)作用有關(guān)。

1 楊耀芳,王賽前,封美佳etal.土鱉蟲(chóng)對(duì)血瘀大鼠紅細(xì)胞CR1活性及抗心磷脂抗體水平的影響[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志,2005;21（1）:53-56.

2 李 征,黃東臨.產(chǎn)品定位改變2008年降糖藥營(yíng)銷(xiāo)格局[J].中國(guó)處方藥,2009;82（1）:60-61.

3 楊耀芳,彭名淑,寧愛(ài)華etal.土鱉蟲(chóng)對(duì)血虛小鼠紅細(xì)胞免疫功能的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)免疫學(xué)雜志,2003;19（10）:686-689.

4 李 青,張 鶴,丁振華etal.保元Ⅱ號(hào)對(duì)糖尿病大鼠腎臟中Smad蛋白表達(dá)的影響[J].中華中醫(yī)藥雜志,2009;24（3）:370-372.

5 Mc Garry JD.Bantinglecture2001:Dysregulation of fatty acid metabolism in the etiology of type 2 diabetes[J].Diabetes,2002;51（1）:17-18.

6 EI-Assaad W,Buteau J,Peyot M Letal.Saturated fatty acids synergize with elevatedglucose to causepancreatic beta-celldeath[J].Endocrinology,2003;144（9）:4154-4163.

[收稿2010-05-19 修回2010-06-04]

（編輯 倪 鵬）

The effects of Eupolyphaga SinensisWalker and Astragalus on immune system and complement in model ratsw ith type 2 diabetes

YANGYao-Fang,QIANWei,JINLei.TheFifthPeople'sHospitalofShanghaiFudanUniversity,Shanghai200240,China

Objective:To study the effects of Eupolyphaga SinensisWalker and Astragalus on diabetes immunity and complement by themodel ratswith type 2 diabetes.Methods:Themodel of type2 diabetic ratswasestablished by ighyper-lipid fodder and injecting small dose of streptozotocin into abdomen.Itwas observed that how the influence of Eupolyphaga SinensisWalker（ig,10 g/kg/d for fourweeks）and Astragalus（ig,3.5 g/kg/d for four weeks）on blood glucose,blood fat and immune functions（IgG,IgM,IgA,CH50,C3 and C4）.The rats body weightwasmeasured before and after establishing themodel.Anatomical separation of heart,liver,sp leen,lung,kidney and thymuswere performed,and the organ indexeswas calculated.Results:The model of type 2 diabetic ratswas estab lished,and the levels of blood glucose,cholesterol（CHO）,triacylglycerol（TG）and low-density lipoprotein（LDL）increased.The plasma levels of IgG and complement CH50 decreased,whereas the plasma levers of complementC3 and C4 increased.Bodyweightand theweightof thymus decreased,whereas theweightof heart,liver and lung all increased.Eupolyphaga SinensisWalker and Astragalus cou ld reduce the level of blood glucose,CHO,TG and LDH,increase HDL and CH 50 leves and reduce complement C3.The drugs improved theweight loss of type 2 diabetic rats,rectified the ratsmodel heart,and increased sp leen weight,while thymusweightmarkedly depressed.Conclusion:Both Eupolyphaga Sinensis Walker and Astragaus have good hypoglycemic effect in type2 diabetic rats,which is closely related with increaseof IgA and CH50 levels and improvementof the immune and comp lement systems.

Eupolyphaga SinensisWalker;Astragalus;Immunity;Comp lement;Type 2 diabetes

R392.5

A

1000-484X（2010）12-1091-05

10.3969/j.issn.1000-484X.2010.12.008

①本文為上海市閔行科委自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（05-071）

楊耀芳（1953年-）,女,教授,碩士生導(dǎo)師,主要從事免疫藥理學(xué)研究。

·神經(jīng)內(nèi)分泌與免疫·