庫拉索蘆薈多糖和木立蘆薈多糖體內(nèi)抗腫瘤作用

朱坤杰， 宋 娟， 沈云虹， 邢煥煥， 王 潔

(齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院，黑龍江齊齊哈爾161006)

蘆薈多糖(Aloe polysaccharide，AP)是蘆薈凝膠部分除去水分以外的主要成分，在新鮮的凝膠中含量約為0.27%～0.5%，AP作為藥用品種蘆薈的主要活性物質(zhì)之一，已經(jīng)受到人們的高度重視。研究證明，AP具有殺菌、消炎、抗輻射、抗艾滋病病毒、抗腫瘤和調(diào)節(jié)免疫［1］等多種藥理作用，其中它的抗腫瘤作用更是備受關(guān)注。以往進行的觀察主要以粗多糖(純度約為30% ～50%)為基礎(chǔ)。本實驗主要對純度約為88%和75.6%的木立蘆薈多糖和庫拉索蘆薈多糖的體內(nèi)抗腫瘤作用做了進一步的觀察。

1 實驗材料

1.1 動物 昆明種小鼠80只，♀♂兼用，由黑龍江省腫瘤研究所提供，動物合格證號:醫(yī)動字9-3-2。

1.2 藥品 純度75.6%庫拉索蘆薈多糖及88.0%木立蘆薈多糖，由中科院上海藥物研究所提供。S180、H22荷瘤小鼠均購于黑龍江省腫瘤研究所;5-Fu上海旭東海普藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號:200211。

1.3 儀器 血球計數(shù)板，上海市求精生化儀器廠生產(chǎn)，電子天平。

2 實驗方法

2.1 蘆薈多糖對S180小鼠的腫瘤抑制率 將傳代8～10 d健康狀況良好的S180荷瘤小鼠脫頸處死，酒精浸泡消毒，無菌狀態(tài)下取出腹水，并用無菌生理鹽水按一定的比例稀釋成瘤細胞懸液(瘤細胞含量約為2×107/mL)。取純系昆明種小鼠80只，每只小鼠右腋窩皮下接種0.2 mL，接種24 h后，隨機分成8組，每組10只:1組為生理鹽水對照組;2組為5氟尿嘧啶陽性對照組(15 mg/kg·d);3、4、5組為木立蘆薈多糖高、中、低劑量組(100 mg/kg·d，50 mg/kg·d，25 mg/kg·d);6、7、8組為庫拉索蘆薈多糖高、中、低劑量組，給藥劑量和木立蘆薈多糖相同。于腫瘤接種后24 h灌胃給藥，給藥容量0.2 mL/10 g，療程10 d。另設(shè)空白對照組(10只)同步灌胃同容量的生理鹽水。停藥后24 h稱量小鼠體重，然后脫頸處死小鼠，剖取瘤體、脾臟、胸腺，稱取其重量，計算抑瘤率、脾指數(shù)、胸腺指數(shù)。

腫瘤抑制率=1-實驗組平均瘤重/對照組平均瘤重［2］

免疫器官指數(shù)=免疫器官重量(mg)/小鼠體重(g)

我們同時觀察了不同藥物對小鼠荷瘤期間體重的影響。以給藥結(jié)束后同給藥前小鼠體重的差值進行組間比較，觀察抗腫瘤治療期間小鼠體重的變化。

2.2 兩種蘆薈多糖對H22荷瘤小鼠生存期的影響 無菌條件下抽取傳代7 d的H22荷瘤小鼠腹水，無菌生理鹽水溶液按一定比例稀釋成瘤細胞懸液(瘤細胞含量約為2×107/mL)。取純系昆明種小鼠80只，每鼠腹腔接種H22瘤細胞懸液0.2 mL。分組及給藥途徑同前，連續(xù)給藥14 d，然后繼續(xù)觀察30 d，記錄小鼠的生存時間，計算生命延長率。生命延長率(%)=(用藥組平均生存天數(shù)-對照組平均生存天數(shù))/對照組平均生成天數(shù)×100%。

3 結(jié)果

3.1 蘆薈多糖對S180荷瘤小鼠的腫瘤抑制率 不同劑量的庫拉索蘆薈多糖及木立蘆薈多糖對S180荷瘤小鼠腫瘤生長的抑制作用見表1。對荷瘤小鼠體重及胸腺和脾指數(shù)的影響見表2。

由表1可知，低劑量的木立蘆薈和庫拉索蘆薈多糖對S180荷瘤小鼠體內(nèi)的腫瘤生長具有明顯的抑制作用，其腫瘤抑制率和5-FU相似，但兩種多糖的中高劑量組的腫瘤抑制作用不明顯?？梢?，兩種蘆薈多糖在25 mg/kg時發(fā)揮較好的抗腫瘤作用，抑瘤率為40%以上，隨著劑量的增加，抑瘤作用并不增強。

表1 不同劑量的兩種蘆薈多糖對S180荷瘤小鼠的體內(nèi)抑瘤作用

表2 不同劑量的兩種蘆薈多糖對荷瘤小鼠體重及胸腺和脾指數(shù)的影響

從動物給藥期間體重的變化可見，同空白組比較，荷瘤組小鼠體重明顯增加，化療藥物5-FU可明顯降低荷瘤小鼠的體重，使小鼠體重呈負增長狀態(tài)。而不同劑量兩種蘆薈多糖對荷瘤小鼠體重的影響與5-FU有明顯差異。其中低劑量組小鼠體重變化和空白組相似?？梢?，兩種蘆薈多糖在發(fā)揮抗腫瘤作用的同時對荷瘤機體的生長無明顯影響。

荷瘤小鼠的胸腺指數(shù)有增加的趨勢，但脾指數(shù)顯著降低。5-FU可顯著降低荷瘤小鼠胸腺和脾臟的重量，使胸腺指數(shù)和脾指數(shù)明顯降低。兩種蘆薈多糖可降低荷瘤小鼠的胸腺指數(shù)，但增加荷瘤小鼠的脾指數(shù)，和5-FU組比較具有顯著差異，特別是低劑量的庫拉索蘆薈多糖組，增加脾指數(shù)的作用更明顯，和模型組比較差異顯著，P＜0.05。

3.2 蘆薈多糖對H22荷瘤小鼠生存期的影響 兩種蘆薈多糖對H22荷瘤小鼠生存期影響的測定結(jié)果見表3。

從表3可見，兩種蘆薈多糖均可不同程度地延長H22腹水瘤小鼠的生存時間，以中、低劑量的作用較好，小鼠生命延長率達45%以上。高劑量組作用不明顯。

表3 兩種蘆薈多糖對H22荷瘤小鼠生存時間的影響

4 討論

我們的實驗結(jié)果顯示，化療藥物5-FU對S180荷瘤小鼠的腫瘤抑制率和生命延長率分別為49%和59.4%。低劑量(25 mg/kg·d)的兩種蘆薈多糖也顯示較好的體內(nèi)抗腫瘤作用，腫瘤抑制率為40%以上，中、低劑量的兩種蘆薈多糖對荷瘤小鼠的生命延長率為45%以上，且兩種蘆薈多糖的抗腫瘤作用無明顯差異，和文獻報道相似，不同的是，已有文獻報道的有效劑量多為100 mg/kg·d［3］。實驗還發(fā)現(xiàn)，模型組小鼠體重顯著增加，5-FU可使荷瘤小鼠體重明顯降低，可見5-FU在發(fā)揮抗腫瘤作用的同時可能影響機體的生長從而給機體造成損傷。蘆薈多糖發(fā)揮明顯抗腫瘤作用的同時，對小鼠體重影響不明顯，蘆薈多糖給藥組小鼠體重變化和空白組小鼠的變化相似。提示兩種蘆薈多糖抗腫瘤作用的同時，對機體的生長影響較小，對機體的損傷小，或優(yōu)于5-FU。

對荷瘤小鼠免疫器官重量的檢測結(jié)果顯示，荷瘤小鼠的胸腺指數(shù)有增加的趨勢，但脾指數(shù)顯著降低，提示荷瘤小鼠的免疫功能可能出現(xiàn)紊亂。5-FU可顯著降低荷瘤小鼠胸腺和脾臟的重量，使胸腺指數(shù)和脾指數(shù)明顯降低，加重荷瘤機體的免疫損傷。而兩種蘆薈多糖可降低荷瘤小鼠的胸腺指數(shù)，增加荷瘤小鼠的脾指數(shù)，逆轉(zhuǎn)荷瘤小鼠的免疫器官指數(shù)的改變，和5-FU組比較具有顯著差異。提示改善荷瘤機體免疫功能紊亂可能是蘆薈多糖抗腫瘤作用的重要機制。

本次實驗提示，75.6%和88%的庫拉索蘆薈多糖和木立蘆薈多糖有效抗腫瘤劑量較以往文獻報道的劑量明顯降低，可能與多糖的純度提高有關(guān)。此外，蘆薈多糖對免疫系統(tǒng)的作用不能簡單地用增強免疫系統(tǒng)功能來描述，因為兩者均可抑制荷瘤小鼠的胸腺指數(shù)的增加，這一結(jié)果和已有的研究結(jié)果不同［3］;低劑量庫拉索蘆薈多糖則可明顯增加荷瘤小鼠脾指數(shù)，其他各給藥組也表現(xiàn)一定的增加趨勢。因此，推測恢復(fù)荷瘤機體的免疫功能紊亂可能是其發(fā)揮抗腫瘤作用機制的一個重要方面，特別是兩者對脾臟功能的影響可能是其發(fā)揮抗腫瘤作用的主要免疫機制，相關(guān)進一步的研究觀察工作正在進行。

［1］Antoni F，Emma S.Sanchez S S.Compositional features of polysaccharides from Aloe Vera(Aloe barbadensis Miller)plant tissues［J］.Carbohydrate Polymers，1999，39:109-117.

［2］徐淑云，卞如濂，陳 修.藥理實驗方法學(xué)［M］.第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社，1991.

［3］鄒 翔，汲晨鋒，高世勇，等.3種蘆薈多糖抗腫瘤作用的比較分析［J］.哈爾濱商業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)，2004，20(1):14-17.