• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    FTO基因SNP rs9939609, rs1421085多態(tài)性與兒童青少年肥胖及其代謝指標(biāo)的相關(guān)性研究

    2010-01-24 07:29:14曹凌峰羅飛宏支滌靜程若倩沈水仙
    中國循證兒科雜志 2010年1期
    關(guān)鍵詞:等位基因多態(tài)性基因型

    曹凌峰 羅飛宏 支滌靜 程若倩 沈水仙 楊 毅

    飲食和生活習(xí)慣等環(huán)境因素對肥胖的發(fā)生和發(fā)展起著十分關(guān)鍵的作用,但遺傳因素構(gòu)成了肥胖產(chǎn)生的內(nèi)在基礎(chǔ)。研究表明至少5%的肥胖兒童存在單基因的缺陷,而5%左右的肥胖存在復(fù)雜的多基因數(shù)量性狀效應(yīng)[1]。在FTO(fat-mass and obesity associated)基因研究中,單核苷酸多態(tài)性(SNP)與肥胖及其代謝綜合征的關(guān)聯(lián)研究是近10多年的研究熱點(diǎn)和重點(diǎn),既往研究報(bào)道了很多肥胖易感基因SNP,如漿細(xì)胞膜糖蛋白1(ENPP1)基因、脂聯(lián)素(APM1)基因和轉(zhuǎn)錄因子7類似物2(TCF7L2)等,與BMI、胰島素抵抗和肥胖高度相關(guān),但研究結(jié)果不盡一致,提示基因多態(tài)性的效應(yīng)存在人種和人群間的差異[2]。

    在既往研究基因變異和肥胖及其相關(guān)代謝指標(biāo)的關(guān)聯(lián)研究中,一直沿用的基因組連鎖分析和候選基因策略雖然成功地確定了某些與肥胖相關(guān)的基因或基因變異,但僅有少數(shù)能在不同人群和人種中重現(xiàn)。主要的原因是實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)欠缺,表型評估差異,基因標(biāo)記的選擇不一和研究樣本量的不同[3]。

    全基因組關(guān)聯(lián)研究(GWAS)是在全基因組范圍內(nèi)選擇遺傳變異進(jìn)行基因分型, 比較病例和對照間每種變異頻率的差異, 計(jì)算變異與疾病的關(guān)聯(lián)強(qiáng)度, 選出最相關(guān)的變異進(jìn)行驗(yàn)證并最終確認(rèn)與疾病相關(guān)。通過對SNP與不同癥狀的相關(guān)性研究,最終確定這些SNP對于特定疾病患病風(fēng)險(xiǎn)的影響[4]。GWAS研究不需要預(yù)先對特定關(guān)聯(lián)基因進(jìn)行假設(shè),因此主觀理論對研究結(jié)果影響較小。

    在上海市科技攻關(guān)基金項(xiàng)目(024119013)的系列研究中,對AMP1基因SNP276和漿細(xì)胞膜糖蛋白1(K121Q)與肥胖和(或)超重的相關(guān)性進(jìn)行分析,采用的是國外候選基因策略所獲得的關(guān)聯(lián)位點(diǎn)[5],未發(fā)現(xiàn)這2個基因多態(tài)性與中國漢族兒童代謝指標(biāo)的相關(guān)性,可能與上述原因有關(guān)。而本文采用的是基于國外GWAS研究策略所獲得的關(guān)聯(lián)位點(diǎn),以了解FTO基因SNP rs9939609、 rs1421085多態(tài)性與中國漢族兒童青少年單純性肥胖及代謝指標(biāo)間的相關(guān)性,為今后類似研究提供方法學(xué)選擇的借鑒。

    1 方法

    1.1 研究對象、人體指標(biāo)測量、代謝指標(biāo)檢測、基因分型和統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 FTO基因SNP rs9939609、 rs1421085多態(tài)性的研究人群(納入標(biāo)準(zhǔn)、排除標(biāo)準(zhǔn)、正常對照組的設(shè)計(jì),倫理和知情同意),空腹血糖受損的判斷方法,胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)、胰島素敏感指數(shù)(QUICKI)的計(jì)算方法, DNA抽提方法,人體指標(biāo)測量數(shù)據(jù)、一般資料數(shù)據(jù)、代謝指標(biāo)檢測數(shù)據(jù)、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法均與參考文獻(xiàn)[5]相同,在此不贅述。

    本研究采用的基因探針型號為:rs 9939609:C_30090620_10;rs1421085:C_8917103_10,2×ABI Taqman Universal PCR master mix,No AmpErase UNG (lot No. E09854),20 ng基因組DNA模板,儀器采用ABI7900HT Sequence Detection System。重復(fù)性實(shí)驗(yàn):隨機(jī)取70份樣品,約占總數(shù)的10%,基因分型結(jié)果與原先測定的結(jié)果完全符合。

    rs9939609和rs1421085分型圖見圖1。

    圖1 FTO基因SNP rs9939609和rs1421085多態(tài)性的檢測結(jié)果

    Fig 1 FTO gene SNP rs9939609 and rs1421085 allele distribution plot

    Notes A:rs9939609; B:rs1421085

    2 結(jié)果

    2.1 研究對象的基本情況 與正常對照組比較,肥胖+超重組的BMI、血清空腹葡萄糖(FPG)、空腹胰島素(FIns)和三酰甘油(TG)水平均顯著高于正常對照組(P<0.01),具體數(shù)據(jù)見參考文獻(xiàn)[5]。

    2.2 基因分布頻率的平衡性檢驗(yàn) rs9939609和rs1421085多態(tài)性的基因分布頻率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(rs9939609:χ2=0.144,P=0.704;rs1421085:χ2=0.878,P=0.349),基因型期望值與觀察值吻合較好,符合Hardy-Weinberg平衡。

    2.3 各組等位基因頻率及基因型頻率比較 肥胖、超重和正常對照組rs9939609分型成功率分別為94.9%(224/236例)、97.9(234/239例)和95.9%(231/241名)。rs9939609 AA基因型頻率:肥胖組為2.7%,超重組為0.4%,正常對照組為1.7%;肥胖+超重組A等位基因頻率顯著高于正常對照組,P=0.048,OR=1.437,95%CI: 1.006~2.078(表1)。

    肥胖、超重和正常對照組rs1421085分型成功率分別為92.8%(219/236例)、97.1%(232/239例)和95.4%(230/241名)。rs1421085 CC基因型頻率:肥胖組為2.7%,超重組為0.9%,正常對照組為1.7%,肥胖+超重組C等位基因頻率高于正常對照組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P=0.076,OR=1.388,95%CI:0.965~1.200(表2)。

    2.4 FTO基因SNP rs9939609、rs1421085多態(tài)性與肥胖代謝指標(biāo)間的相關(guān)性 rs9939609 TT基因型BMI顯著低于TA+AA基因型(P=0.000 3);rs1421085 TT基因型BMI顯著低于TC+CC基因型(P=0.000 5)。rs9939609 TT基因型FPG、FIns、TG、總膽固醇(TC)、HOMA-IR、QUICKI與TA+AA基因型差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;rs1421085 TT基因型FPG、FIns、TG、TC、HOMA-IR、QUICKI與TC+CC基因型差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表3)。

    表1 肥胖組、超重組和正常對照組rs9939609等位基因頻率及基因型頻率比較[n(%)]

    Notes OB:obesity group;OW:overweight group;NC:normal control group;1)obesity+overweight groupvsnormal control group,χ2=3.901,P=0.048,OR=1.437(95%CI:1.006-2.078);2)obesity+overweight groupvsnormal control group,χ2=5.57,P=0.061 7

    表2 肥胖組、超重組和正常對照組rs1421085等位基因頻率及基因型頻率比較[n(%)]

    Notes OB:obesity group;OW:overweight group;NC:normal control group;1)obesity+overweight groupvsnormal control group,χ2=3.148,P=0.076,OR=1.388(95%CI:0.965-1.200);2)obesity+overweight groupvsnormal control group,χ2=4.026,P=0.136 6

    表3 FTO基因SNP rs9939609、rs1421085多態(tài)性與肥胖及其相關(guān)代謝指標(biāo)間的相關(guān)性

    Notes M:male;F:female

    3 討論

    人類與肥胖相關(guān)的候選基因的數(shù)量有幾百種,其SNP數(shù)量也相當(dāng)龐大。1996年,Risch和Merikangas率先提出使用GWAS方法來確定基因多態(tài)性與疾病的相關(guān)性。近年來,隨著人類基因組計(jì)劃的順利完成和國際人類基因組單倍型圖計(jì)劃(HapMap Project)的不斷發(fā)展,以及高通量基因分型技術(shù)的成熟,使得同時研究幾萬,幾十萬,甚至幾百萬個SNP成為可能[6],基因連鎖分析或候選基因策略,僅能在單基因缺陷的疾病或特性中發(fā)揮重要作用,但在特定疾病的多基因遺傳模式中,對確定多基因與復(fù)雜性疾病或特性的相關(guān)分析時作用相對有限。相對而言,GWAS能更精確地確定導(dǎo)致復(fù)雜性疾病的易感性基因,從而闡明這些復(fù)雜性疾病的遺傳學(xué)發(fā)病機(jī)制,是目前科學(xué)界公認(rèn)的最為有效的復(fù)雜疾病的研究方法。2006年后,相繼有40多種復(fù)雜性疾病及其數(shù)量性狀(如BMI和身高等)的GWAS研究報(bào)道,并發(fā)現(xiàn)了某些以往未檢測到但與疾病或特性密切相關(guān)的基因和多態(tài)性位點(diǎn),如FTO基因。

    FTO基因位于染色體16q12.2,在藻類和脊椎動物中高度保守,但在無脊椎動物、真菌和綠色植物中不表達(dá)[7,8]。FTO基因?qū)儆诜茄t色加雙氧酶家族,編碼2-酮戊二酸-依賴型核酸脫甲基酶[9,10]。FTO基因mRNA在大腦內(nèi),尤其下丘腦mRNA的表達(dá)最豐富,但在其他組織也有表達(dá)[7,9]。動物實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),小鼠進(jìn)食時下丘腦弓狀核FTO基因mRNA表達(dá)水平上調(diào),禁食時則下調(diào)[9,11],但在大鼠中調(diào)控模式與此相反[7],F(xiàn)TO基因能夠使DNA去甲基化,并參與DNA修復(fù)、脂肪酸代謝和翻譯后修飾。

    2007年,F(xiàn)rayling等[12]率先報(bào)道了位于FTO基因第1內(nèi)含子的rs9939609與成人和兒童肥胖具高度相關(guān)性,隨后在歐洲幾項(xiàng)獨(dú)立研究中,也分別報(bào)道了該基因多態(tài)性與高加索人群、西班牙人群BMI和肥胖的相關(guān)性。FTO基因是至今為止在歐洲人群中唯一的、重復(fù)成功的肥胖易感基因[13]。在東亞地區(qū),在有限的報(bào)道中結(jié)果并不一致。目前在中國僅見臺灣、北京和上海地區(qū)的成年人群FTO基因多態(tài)性與肥胖的關(guān)聯(lián)報(bào)道。Chang等[14]報(bào)道,F(xiàn)TO基因rs9939609多態(tài)性與中國臺灣成人肥胖和BMI存在相關(guān)性,但與2型糖尿病無相關(guān)性;但在上海和北京的成人研究中未發(fā)現(xiàn)其與肥胖、BMI和糖尿病之間的關(guān)聯(lián)性[15]。在日本人群的研究結(jié)果也不盡相同,Horikoshi等[16]未發(fā)現(xiàn)rs9939609多態(tài)性與BMI和肥胖的相關(guān)性;Omori等[17]研究得出陽性結(jié)果。提示研究結(jié)果可能與人群樣本的選擇有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn),肥胖+超重組rs9939609 A等位基因頻率顯著高于正常對照組,rs1421085 C等位基因頻率高于正常對照組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;rs1421085 TC +CC基因型和rs9939609 TA +AA 基因型的BMI顯著高于TT基因型。因此提示在中國漢族兒童青少年中rs1421085、rs9939609多態(tài)性均與肥胖的體脂形成有密切的關(guān)聯(lián)性。

    本研究正常對照組rs9939609 A等位基因和rs1421085 C等位基因的頻率分別為9.7%和9.8%,其中A等位基因頻率略低于中國臺灣人群(12.6 %)[14],而AA和CC的基因型頻率均為1.7%, 與文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)果一致[14],但明顯低于歐洲人群(45%)[18]和非洲裔美國人(21%)[13],提示FTO基因該2個多態(tài)性位點(diǎn)基因頻率存在顯著的種族差異。

    本研究人群的rs9939609和rs1421085多態(tài)性與BMI顯著相關(guān),但與肥胖其他相關(guān)代謝指標(biāo)包括FPG、FIns、TC、TG和HOMA-IR等均無顯著相關(guān)性;與日本[15]和中國[16]的研究結(jié)果較為一致。1項(xiàng)納入17 037名高加索人群的Meta分析結(jié)果顯示,F(xiàn)TO基因SNP rs9939609和rs1421085多態(tài)性與FPG、TG、FIns存在相關(guān)性[19]。提示rs9939609和rs1421085多態(tài)性對肥胖患者代謝指標(biāo)的影響有種族和地區(qū)差異。

    本研究首次證實(shí)了FTO基因多態(tài)性與中國漢族兒童青少年BMI的相關(guān)性,雖然其rs9939609 A等位基因頻率遠(yuǎn)低于歐洲人群,但該等位基因?qū)MI的作用與歐洲人群較為相似,但對代謝指標(biāo)影響卻有所不同。由于中國是個多民族國家,在其他民族兒童青少年中FTO基因該位點(diǎn)多態(tài)性是否還有類似的作用,尚有待進(jìn)一步研究證實(shí)。

    本研究的不足之處與局限性:本研究對象僅限于上海某地區(qū)的漢族兒童青少年。作為全基因組相關(guān)研究,研究對象的數(shù)量尚顯不足。

    [1]Bouchard C. Childhood obesity: are genetic differences involved? Am J Clin Nutr,2009,89(5):1494-1501

    [2]Bell CG, Walley AJ, Froguel P. The genetics of human obesity. Nat Rev Genet,2005,6(3):221-234

    [3]Rankinen T, Zuberi A, Chagnon YC, et al. The human obesity gene map: the 2005 update. Obesity (Silver Spring),2006,14(4): 529-644

    [4]Kuniholm MH. Replicating genome-wide association studies. Science,2007,318(5849):390-391

    [5]Cao LF(曹凌峰),Luo FH,Zhi DJ,et al.The relationship between SNP276 polymorphism of adiponectin gene and obesity in children and adolescents.Chin J Evid Based Pediatr(中國循證兒科雜志),2009,4(6):525-529

    [6]Goodman E, Daniels SR, Morrison JA, et al. Contrasting prevalence of and demographic disparities in the World Health Organization and National Cholesterol Education Program Adult Treatment Panel Ⅲ definitions of metabolic syndrome among adolescents. J Pediatr,2004,145(4):445-451

    [7]Fredriksson R, Hagglund M, Olszewski PK, et al. The obesity gene, FTO, is of ancient origin, upregulated during food deprivation and expressed in neurons of feeding-related nuclei of the brain. Endocrinology, 2008,149(5):2062-2071

    [8]Robbens S, Rouzé P, Cock JM, et al. The FTO gene, implicated in human obesity, is found only in vertebrates and marine algae. J Mol Evol,2008,66(1): 80-84

    [9]Gerken T, Girard CA, Tung YC, et al. The obesity-associated FTO gene encodes a 2-oxoglutarate-dependent nucleic acid demethylase.Science,2007,318(5855): 1469-1472

    [10]Fernández AM, Kim JK, Yakar S, et al.Functional inactivation of the IGF-I and insulin receptors in skeletal muscle causes type 2 diabetes. Genes Dev,2001,15(15): 1926-1934

    [11]Stratigopoulos G, Padilla SL, LeDuc CA, et al.Regulation of Fto/Ftm gene expression in mice and humans. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol ,2008,294(4):1185-1196

    [12]Frayling TM, Timpson NJ, Weedon MN,et al. A common variant in the FTO gene is associated with body mass index and predisposes to childhood and adult obesity. Science,2007,316(5826):889-894

    [13]Loos RJ, Bouchard C. FTO: the first gene contributing to common forms of human obesity. Obes Rev,2008,9(3):246-250

    [14]Chang YC, Liu PH, Lee WJ,et al. Common variation in the fat mass and obesity-associated (FTO) gene confers risk of obesity and modulates BMI in the Chinese population.Diabetes,2008,57(8):2245-2252

    [15] Li H, Wu Y, Loos RJ,et al. Variants in the fat mass- and obesity-associated (FTO) gene are not associated with obesity in a Chinese Han population. Diabetes,2008,57(1):264-268

    [16]Horikoshi M, Hara K, Ito C,et al. Variations in the HHEX gene are associated with increased risk of type 2 diabetes in the Japanese population. Diabetologia,2007,50(12):2461-2466

    [17]Omori S, Tanaka Y, Takahashi A,et al. Association of CDKAL1, IGF2BP2, CDKN2A/B, HHEX, SLC30A8, and KCNJ11 with susceptibility to type 2 diabetes in a Japanese population. Diabetes,2008,57(3):791-795

    [18]Peeters A, Beckers S, Verrijken A,et al. Variants in the FTO gene are associated with common obesity in the Belgian population. Mol Genet Metab,2008,93(4):481-484

    [19]Freathy RM, Timpson NJ, Lawlor DA,et al. Common variation in the FTO gene alters diabetes-related metabolic traits to the extent expected given its effect on BMI. Diabetes,2008,57(5):1419-1426

    猜你喜歡
    等位基因多態(tài)性基因型
    單核苷酸多態(tài)性與中醫(yī)證候相關(guān)性研究進(jìn)展
    親子鑒定中男性個體Amelogenin基因座異常1例
    智慧健康(2021年17期)2021-07-30 14:38:32
    WHOHLA命名委員會命名的新等位基因HLA-A*24∶327序列分析及確認(rèn)
    馬鈴薯cpDNA/mtDNA多態(tài)性的多重PCR檢測
    DXS101基因座稀有等位基因的確認(rèn)1例
    GlobalFiler~? PCR擴(kuò)增試劑盒驗(yàn)證及其STR遺傳多態(tài)性
    西安地區(qū)育齡婦女MTHFRC677T基因型分布研究
    BAMBI基因敲除小鼠的繁育、基因型鑒定
    CYP3A4*1G基因多態(tài)性及功能的初步探討
    等位基因座D21S11稀有等位基因32.3的確認(rèn)
    极品人妻少妇av视频| 日韩免费av在线播放| 在线永久观看黄色视频| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 99久久精品国产亚洲精品| 亚洲欧洲日产国产| 2018国产大陆天天弄谢| 久久久国产一区二区| 日本wwww免费看| 精品久久蜜臀av无| 国产高清videossex| 99精品久久久久人妻精品| 国产野战对白在线观看| 国产深夜福利视频在线观看| 久久久久久免费高清国产稀缺| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 麻豆乱淫一区二区| 黄片大片在线免费观看| 这个男人来自地球电影免费观看| 中文欧美无线码| 免费在线观看黄色视频的| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 国产精品一区二区精品视频观看| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 搡老乐熟女国产| 午夜激情av网站| 精品一区二区三卡| 麻豆av在线久日| 国产精品久久电影中文字幕 | 一区二区三区激情视频| 国产av一区二区精品久久| 国产福利在线免费观看视频| 夫妻午夜视频| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 国产成人欧美| 人人澡人人妻人| 男女免费视频国产| 电影成人av| 国产极品粉嫩免费观看在线| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 久久性视频一级片| 最黄视频免费看| 老司机福利观看| 一级毛片电影观看| av国产精品久久久久影院| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 另类精品久久| 国产野战对白在线观看| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 99九九在线精品视频| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 老汉色∧v一级毛片| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 欧美黄色片欧美黄色片| 日韩视频一区二区在线观看| 天天操日日干夜夜撸| 亚洲天堂av无毛| 婷婷丁香在线五月| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 久久影院123| 亚洲欧美一区二区三区久久| 亚洲专区字幕在线| 女性被躁到高潮视频| 午夜激情av网站| 精品福利观看| 美女国产高潮福利片在线看| 久久久久久久久久久久大奶| 性色av乱码一区二区三区2| 国产精品av久久久久免费| 电影成人av| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 黄片播放在线免费| 在线 av 中文字幕| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产一区二区三区综合在线观看| 国产精品偷伦视频观看了| 大片电影免费在线观看免费| 精品国产国语对白av| 久久久久久免费高清国产稀缺| 少妇被粗大的猛进出69影院| 18禁美女被吸乳视频| 亚洲人成电影免费在线| 两个人看的免费小视频| 757午夜福利合集在线观看| av线在线观看网站| 亚洲成人国产一区在线观看| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 国产在线精品亚洲第一网站| 99精品久久久久人妻精品| 夜夜夜夜夜久久久久| 亚洲伊人久久精品综合| 欧美国产精品一级二级三级| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 国产成人免费无遮挡视频| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲精品成人av观看孕妇| 精品亚洲成a人片在线观看| 亚洲精品美女久久av网站| 欧美精品一区二区大全| 一区在线观看完整版| 欧美一级毛片孕妇| 精品第一国产精品| 无限看片的www在线观看| av天堂在线播放| 国产精品二区激情视频| 国产精品 国内视频| 成人三级做爰电影| 老熟妇乱子伦视频在线观看| tube8黄色片| 久久久欧美国产精品| 亚洲黑人精品在线| 人妻久久中文字幕网| 免费日韩欧美在线观看| 男女高潮啪啪啪动态图| 香蕉久久夜色| 在线观看www视频免费| 国产欧美日韩一区二区三| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 男女之事视频高清在线观看| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 久久国产精品人妻蜜桃| 色播在线永久视频| 国产高清videossex| 欧美日韩视频精品一区| 亚洲成a人片在线一区二区| 窝窝影院91人妻| 九色亚洲精品在线播放| av线在线观看网站| 国产主播在线观看一区二区| 国产男女超爽视频在线观看| 欧美精品一区二区大全| 日本wwww免费看| 国产亚洲欧美精品永久| 啦啦啦在线免费观看视频4| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 丝袜在线中文字幕| 一区二区日韩欧美中文字幕| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| av一本久久久久| 黄色成人免费大全| 久久亚洲精品不卡| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 在线永久观看黄色视频| 久久久国产成人免费| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 国产真人三级小视频在线观看| 亚洲精华国产精华精| 久久久久久久久免费视频了| 亚洲欧美色中文字幕在线| 最新的欧美精品一区二区| 国产99久久九九免费精品| 99国产极品粉嫩在线观看| 国产成人精品久久二区二区91| 久久人妻av系列| 嫩草影视91久久| 天天操日日干夜夜撸| 欧美久久黑人一区二区| 国产精品久久久av美女十八| 视频在线观看一区二区三区| 搡老熟女国产l中国老女人| 精品一品国产午夜福利视频| 99久久国产精品久久久| 黑人操中国人逼视频| 精品人妻1区二区| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 又黄又粗又硬又大视频| 久久久久久免费高清国产稀缺| 久久天堂一区二区三区四区| 亚洲精品自拍成人| 最近最新中文字幕大全电影3 | 高清毛片免费观看视频网站 | 久久精品国产综合久久久| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 一区二区av电影网| 国产精品久久电影中文字幕 | 一边摸一边抽搐一进一小说 | 一级a爱视频在线免费观看| 中文字幕制服av| 免费在线观看完整版高清| 十八禁人妻一区二区| 久久久国产一区二区| 免费日韩欧美在线观看| 国产精品国产av在线观看| 桃红色精品国产亚洲av| 黑人猛操日本美女一级片| 亚洲精品成人av观看孕妇| 亚洲男人天堂网一区| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 成人永久免费在线观看视频 | 母亲3免费完整高清在线观看| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 国产国语露脸激情在线看| 人成视频在线观看免费观看| 最黄视频免费看| 亚洲欧洲日产国产| 成年版毛片免费区| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 精品乱码久久久久久99久播| 一区二区三区激情视频| 国产精品国产av在线观看| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲成国产人片在线观看| 亚洲午夜理论影院| 大型黄色视频在线免费观看| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 国产免费福利视频在线观看| 成人国语在线视频| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 三上悠亚av全集在线观看| 啦啦啦 在线观看视频| 一区在线观看完整版| 最新美女视频免费是黄的| 在线观看66精品国产| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 久久久水蜜桃国产精品网| 国产午夜精品久久久久久| 欧美乱妇无乱码| 国产成+人综合+亚洲专区| 免费在线观看完整版高清| 少妇的丰满在线观看| 国产精品亚洲一级av第二区| 人成视频在线观看免费观看| 成人永久免费在线观看视频 | 美国免费a级毛片| 黄片小视频在线播放| 国产精品亚洲av一区麻豆| 午夜两性在线视频| 人成视频在线观看免费观看| 我要看黄色一级片免费的| 亚洲久久久国产精品| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 一边摸一边抽搐一进一出视频| 啦啦啦 在线观看视频| 亚洲欧洲日产国产| 日本欧美视频一区| 亚洲成a人片在线一区二区| 一区二区三区激情视频| 男女边摸边吃奶| 91九色精品人成在线观看| 中文字幕人妻丝袜一区二区| av一本久久久久| 午夜福利视频在线观看免费| 国产欧美日韩一区二区精品| 国产精品1区2区在线观看. | 中文欧美无线码| 美女国产高潮福利片在线看| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 99精品在免费线老司机午夜| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 亚洲精品国产一区二区精华液| 三上悠亚av全集在线观看| 亚洲av国产av综合av卡| 亚洲色图av天堂| 国产男女超爽视频在线观看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产精品国产av在线观看| 狂野欧美激情性xxxx| 中文字幕制服av| 又大又爽又粗| 国产精品99久久99久久久不卡| 国产精品av久久久久免费| 免费在线观看日本一区| 亚洲第一青青草原| 久久久久精品国产欧美久久久| 国产亚洲精品第一综合不卡| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 纯流量卡能插随身wifi吗| 99riav亚洲国产免费| 我要看黄色一级片免费的| 五月开心婷婷网| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 国产淫语在线视频| 老司机午夜福利在线观看视频 | 日本av免费视频播放| 9热在线视频观看99| 午夜福利免费观看在线| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| a级片在线免费高清观看视频| 日韩中文字幕视频在线看片| 在线观看人妻少妇| 精品国产一区二区久久| 亚洲全国av大片| 成年人黄色毛片网站| 水蜜桃什么品种好| 国产成人精品久久二区二区91| 午夜91福利影院| 搡老岳熟女国产| 午夜福利在线观看吧| 黄色怎么调成土黄色| 丝瓜视频免费看黄片| 国产亚洲精品久久久久5区| 多毛熟女@视频| 欧美 日韩 精品 国产| 99国产精品一区二区三区| 欧美黑人精品巨大| 母亲3免费完整高清在线观看| 天堂8中文在线网| 欧美av亚洲av综合av国产av| 18在线观看网站| 国产激情久久老熟女| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 大码成人一级视频| 国产老妇伦熟女老妇高清| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 男女床上黄色一级片免费看| 后天国语完整版免费观看| 五月天丁香电影| 久久久久精品人妻al黑| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 亚洲精品中文字幕在线视频| 69av精品久久久久久 | 久久久精品免费免费高清| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 99re6热这里在线精品视频| 日韩中文字幕视频在线看片| 超碰97精品在线观看| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| e午夜精品久久久久久久| 9热在线视频观看99| 91成年电影在线观看| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 亚洲精品国产区一区二| 精品免费久久久久久久清纯 | 美女福利国产在线| 日韩成人在线观看一区二区三区| 黄频高清免费视频| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 欧美 日韩 精品 国产| 国产av精品麻豆| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 久久久久久久大尺度免费视频| 1024视频免费在线观看| 91九色精品人成在线观看| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 69精品国产乱码久久久| 手机成人av网站| 色94色欧美一区二区| 久久影院123| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 操出白浆在线播放| 9热在线视频观看99| 国产午夜精品久久久久久| 国产片内射在线| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 欧美成狂野欧美在线观看| 色老头精品视频在线观看| 一个人免费在线观看的高清视频| 欧美精品av麻豆av| 在线观看人妻少妇| 91国产中文字幕| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产欧美日韩精品亚洲av| 中文字幕色久视频| 另类精品久久| 亚洲一码二码三码区别大吗| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 亚洲国产欧美一区二区综合| 国产亚洲精品一区二区www | 19禁男女啪啪无遮挡网站| 久久久国产一区二区| 好男人电影高清在线观看| 亚洲黑人精品在线| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产精品国产av在线观看| 99久久精品国产亚洲精品| 国产成人精品在线电影| 久久久精品94久久精品| 99久久人妻综合| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 精品国产乱码久久久久久男人| 久久青草综合色| 在线观看免费视频网站a站| 日本一区二区免费在线视频| 女同久久另类99精品国产91| 亚洲性夜色夜夜综合| 黑人欧美特级aaaaaa片| 下体分泌物呈黄色| 国产日韩欧美在线精品| 无人区码免费观看不卡 | 精品国产一区二区三区久久久樱花| 看免费av毛片| 亚洲第一青青草原| 国产精品免费大片| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 国产精品偷伦视频观看了| 曰老女人黄片| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 19禁男女啪啪无遮挡网站| 成年女人毛片免费观看观看9 | 国产成人欧美| 这个男人来自地球电影免费观看| 成人永久免费在线观看视频 | av国产精品久久久久影院| 久久亚洲精品不卡| aaaaa片日本免费| 午夜日韩欧美国产| 12—13女人毛片做爰片一| 黑丝袜美女国产一区| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 搡老岳熟女国产| 久久久久国内视频| 日日爽夜夜爽网站| 久久久欧美国产精品| 国产黄频视频在线观看| 怎么达到女性高潮| 男人舔女人的私密视频| 国产免费福利视频在线观看| 久久国产精品人妻蜜桃| 日韩视频在线欧美| 免费观看a级毛片全部| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 美女主播在线视频| 久久久久久久久免费视频了| 亚洲第一av免费看| 日本vs欧美在线观看视频| 18禁观看日本| 亚洲天堂av无毛| 动漫黄色视频在线观看| 中亚洲国语对白在线视频| 老司机亚洲免费影院| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 久久ye,这里只有精品| 免费少妇av软件| 精品一区二区三区四区五区乱码| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 麻豆av在线久日| 亚洲中文日韩欧美视频| 黄片小视频在线播放| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 新久久久久国产一级毛片| 在线观看免费午夜福利视频| 麻豆成人av在线观看| 免费观看av网站的网址| 丁香六月欧美| 亚洲视频免费观看视频| 2018国产大陆天天弄谢| 波多野结衣av一区二区av| 色婷婷av一区二区三区视频| 一边摸一边做爽爽视频免费| 狠狠狠狠99中文字幕| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 亚洲中文av在线| 丰满迷人的少妇在线观看| 人妻 亚洲 视频| 91麻豆av在线| 亚洲成人免费av在线播放| 99精品久久久久人妻精品| www日本在线高清视频| 国产亚洲欧美在线一区二区| 天堂8中文在线网| 另类亚洲欧美激情| 亚洲avbb在线观看| 丝袜喷水一区| 精品国产一区二区久久| 丝袜在线中文字幕| 免费看十八禁软件| 岛国在线观看网站| 99国产综合亚洲精品| 国产1区2区3区精品| 国产主播在线观看一区二区| 精品欧美一区二区三区在线| 大型黄色视频在线免费观看| 欧美乱妇无乱码| 亚洲精品成人av观看孕妇| 一级,二级,三级黄色视频| 我要看黄色一级片免费的| 99精国产麻豆久久婷婷| 久久精品国产综合久久久| 精品久久久久久久毛片微露脸| 色视频在线一区二区三区| 91成人精品电影| 精品一区二区三区四区五区乱码| 久久久久久久大尺度免费视频| 最新的欧美精品一区二区| 色老头精品视频在线观看| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 亚洲精品国产精品久久久不卡| 国产在线精品亚洲第一网站| 蜜桃在线观看..| 久久久久精品国产欧美久久久| 国产不卡一卡二| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 午夜免费成人在线视频| e午夜精品久久久久久久| 欧美+亚洲+日韩+国产| 三级毛片av免费| 蜜桃国产av成人99| 亚洲一区二区三区欧美精品| 成年人午夜在线观看视频| 51午夜福利影视在线观看| 精品国产国语对白av| 90打野战视频偷拍视频| 99国产精品99久久久久| 免费在线观看完整版高清| www.熟女人妻精品国产| 99国产极品粉嫩在线观看| 两性夫妻黄色片| 超碰97精品在线观看| 制服诱惑二区| 成人国产一区最新在线观看| 久久这里只有精品19| 国产高清视频在线播放一区| 国产极品粉嫩免费观看在线| 日韩免费av在线播放| 欧美日韩福利视频一区二区| 岛国在线观看网站| 黑丝袜美女国产一区| 久久精品国产综合久久久| 国产av精品麻豆| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 天堂中文最新版在线下载| 99国产精品一区二区三区| 免费观看人在逋| 国产精品久久久久久精品电影小说| 最近最新免费中文字幕在线| 国产精品99久久99久久久不卡| 亚洲av国产av综合av卡| 国产一区二区三区视频了| 丝袜人妻中文字幕| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 中亚洲国语对白在线视频| 水蜜桃什么品种好| 69av精品久久久久久 | 国产精品av久久久久免费| 久久精品国产综合久久久| 黑丝袜美女国产一区| 99国产精品99久久久久| 亚洲av电影在线进入| 男男h啪啪无遮挡| 日韩视频一区二区在线观看| 在线播放国产精品三级| 丝袜美足系列| 老汉色av国产亚洲站长工具| 窝窝影院91人妻| 五月开心婷婷网| 精品少妇内射三级| videosex国产| 看免费av毛片| 国产精品九九99| 丰满少妇做爰视频| 男女下面插进去视频免费观看| 水蜜桃什么品种好| 大香蕉久久成人网| 999久久久精品免费观看国产| 波多野结衣一区麻豆| 成人特级黄色片久久久久久久 | 91国产中文字幕| 妹子高潮喷水视频| 女警被强在线播放| 成人国产一区最新在线观看| 亚洲免费av在线视频| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 视频区图区小说| 国产野战对白在线观看| 日韩中文字幕视频在线看片| tube8黄色片| 亚洲精品国产一区二区精华液| av视频免费观看在线观看| 最新美女视频免费是黄的| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 久久99热这里只频精品6学生| av有码第一页| netflix在线观看网站| 极品教师在线免费播放| av不卡在线播放| 色精品久久人妻99蜜桃| 亚洲精品在线美女| 91精品三级在线观看| 一区在线观看完整版| 欧美 日韩 精品 国产| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 欧美精品高潮呻吟av久久| 欧美成人免费av一区二区三区 | 欧美日韩国产mv在线观看视频| 日本a在线网址| 国产精品98久久久久久宅男小说| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 亚洲精品成人av观看孕妇| 大型av网站在线播放| 久热爱精品视频在线9| a在线观看视频网站| 丝袜在线中文字幕| 亚洲成a人片在线一区二区| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 丰满迷人的少妇在线观看| 国产精品.久久久| av不卡在线播放| 高清毛片免费观看视频网站 | 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 乱人伦中国视频| 国产激情久久老熟女| 亚洲,欧美精品.| 亚洲中文日韩欧美视频| 大型av网站在线播放| 热re99久久精品国产66热6| aaaaa片日本免费| h视频一区二区三区| 国产成人av激情在线播放| 黄色视频,在线免费观看| 一本久久精品| 麻豆av在线久日| 久久久久久久国产电影| 大码成人一级视频| 亚洲第一青青草原| 岛国在线观看网站| 色婷婷av一区二区三区视频|