EB病毒EBNA1/IgA與鼻咽癌分期的關(guān)系

成積儒 蔡永林 鄭裕明 李 軍 莫永坤 鐘青燕

摘要: 目的:探討EB病毒EBNA1/IgA抗體與鼻咽癌臨床分期的關(guān)系。方法:用酶聯(lián)免疫吸 附法(ELISA)檢測211例未┚治療的鼻咽癌患者血清中狤BNA1/IgA抗體,按“92分期法 ”進(jìn) 行分期,分別計(jì)算各T?N?M分期及臨床分期的EBNA1/IgA抗體陽性率及抗體水平并進(jìn)行統(tǒng)計(jì) 學(xué)分析。結(jié)果:鼻咽癌患者的EBNA1/IgA抗體表達(dá)與性別和各年齡組沒有相關(guān)性。EBNA1/IgA 抗 體rA值與原發(fā)灶T分期及頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移N分期差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移 M分期差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。鼻咽癌早期(Ⅰ?Ⅱ期)患者的EBNA1/IgA抗體rA值 顯著低于晚期(Ⅲ?Ⅳ期)(P<0.05)。結(jié)論:EBNA1/IgA抗體在早期鼻咽癌表達(dá)水平相 對較低。對于評估鼻咽癌臨床分期有一定的參考價(jià)值。

關(guān)鍵詞:鼻咽癌;EB病毒;EBNA1/IgA;臨床分期

中圖分類號: R739.63 文獻(xiàn)標(biāo)識碼: A 文章編號: 1008-2409(2009)05-0829-03

Relationship between Epstein-Barr virus EBNA1/IgA antibody and clinical stagesof nasopharyngeal carcinoma/CHENG Ji-yu, CAI Yong-lin, ZHENG Yu-ming, et a l.∥Wuzhou Red Cross Hospital, Wuzhou 543002, China

Abstract:Objective: To evaluate the relationship between E pstein-Barr virus(EBV)EBNA1/IgA antibody and clinical stages of nasopharyngea lcarcinoma(NPC). Methods: Serum samples derived from 211 untreated patients withNPC,who were categorized by the project of 92' stage,were examined for the pr esence of antibodies directed against EBNA1/IgA by using enzyme-linked immnunos o rbent assay(ELISA). The positive rate and antibody level of EBNA1/IgA of differ ent TNM stages and clinical stages were analyzed statistically. Results: The exp r ession of EBNA1/IgA antibody was not significantly associated with gender and ag e. The differences in rA of EBNA1/IgA among the stage T and N of NPC were statis tically significant(P<0.05). No significant difference of rA of EBNA1/IgA w as f ound in stage M(P>0.05). The rA of EBNA1/IgA was significantly lower at ear ly s tage(stage Ⅰ and Ⅱ)than at late stage(stage Ⅲ and Ⅳ)of NPC(P<0.05).Con clusion: It is relatively low in early NPC for the expression of EBNA1/IgA, whi ch may be helpful to classify the clinical stage of NPC.

Key words: nasopharyngeal carcinoma; Epstein-Barr virus; EBNA1/IgA; clinical stage

鼻咽癌的發(fā)生與EB病毒密切相關(guān),檢測血清中EB病毒抗體水平對鼻咽癌的早期診斷有著重要 意義[1]。在鼻咽癌細(xì)胞里不但有EB病毒基因組,而且有多種EB病毒特異性抗原,E BNA1是 一個(gè)DNA核結(jié)合性磷酸蛋白,由病毒基因組BKRF1基因編碼,641個(gè)氨基酸組成,富含甘氨酸 - 丙氨酸重復(fù)序列,其主要作用是有助于EBV潛伏感染,對游離EBV基因組的保持與復(fù)制是必須 的[2]。EBNA1還可能在EBV潛伏狀態(tài)的維持和DNA復(fù)制中和阻止蛋白酶對其自身的降 解中發(fā) 揮作用。目前在國內(nèi)外逐漸推廣應(yīng)用檢測EBNA1抗原抗體作為鼻咽癌的血清學(xué)指標(biāo)取得較好 的效果[3-5],而對其與臨床分期的關(guān)注則較少。筆者就EB病毒EBNA1/IgA抗體與 鼻咽癌患者的性別?年齡?TNM分期和臨床分期的關(guān)系進(jìn)行研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2008年在梧州市紅十字會醫(yī)院腫瘤科住院的未經(jīng)治療鼻咽癌患者211例,所有患 者均經(jīng)鼻咽活檢病理檢查確診,病理類型以非角化性癌為主(200/211,占94.8%)。其中 男156例,女55例;年齡22~83歲,中位年齡48歲。所有患者均按1992年福州全國鼻咽癌會 議推薦的鼻咽癌臨床TNM分期法(92分期法)[6]進(jìn)行分期。

1.2 酶聯(lián)吸附試驗(yàn)

EBNA1/IgA試劑盒由中山生物工程有限公司生產(chǎn)提供,嚴(yán)格按照試劑使用說明書執(zhí)行操 作。酶標(biāo)儀450nm波長讀出每孔吸光度(A)值。取每個(gè)標(biāo)本雙孔的平均值為該標(biāo)本的A值,標(biāo) 本的A值除以該反應(yīng)板陽性對照的A 值即為該樣品的相對A值(rA值)。

1.3 臨界值的設(shè)定

以非鼻咽癌的其他相似癥狀病例者為對照組,應(yīng)用受試者工作特征(ROC)曲線確定EBNA1/IgA 抗體檢測的臨界rA值為0.26,即EBNA1/IgA rA≥0.26為陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 13.0軟件對變量進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn),多組中位數(shù)比較采用Kruskal-Wallis檢驗(yàn),兩 組中位數(shù)比較采用Mann-Whitney檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

鼻咽癌患者不同分組EBNA1/IgA抗體rA值分布經(jīng)正態(tài)性檢驗(yàn),資料屬非正態(tài)分布(P<0.0 5)。鼻咽癌患者不同性別?年齡組EBNA1/IgA抗體水平見表1。鼻咽癌患者TNM分期及臨床分 期EBNA1/IgA抗體水平見表2。

鼻咽癌患者男女間EBNA1/IgA抗體rA值比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(z=1.801,P =0.072)。各年齡組EBNA1/IgA抗體rA值比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ²=2.698,P=0. 441)。

鼻咽癌患者EBNA1/IgA抗體rA值,各T分期?N分期及臨床分期間比較,差異有統(tǒng)計(jì) 學(xué)意義(χ 2=12.721,9.723,9.418;P=0.005,0.021,0.024);各M分期間比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué) 意義( z=0.910,P=0.363)。早期鼻咽癌(臨床Ⅰ?Ⅱ期)患者的EBNA1/IgA抗體rA值顯 著低于晚期(臨床Ⅲ?Ⅳ期)(z=2.482,P=0.013)。

3 討論

鼻咽癌的特點(diǎn)是惡性程度高,發(fā)展快,?？稍诙唐趦?nèi)或尚未出現(xiàn)耳鼻癥狀時(shí),已經(jīng)發(fā)展到了 晚 期,有些患者在鼻咽鏡檢查尚未見原發(fā)灶時(shí),就有了頸淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移。腫瘤部位的隱蔽或取 活檢組織技術(shù)的差異,使鼻咽癌患者往往難以得到早期確診和治療。EBNA1作為EB病毒潛伏 期抗原之一,在鼻咽癌癌變前即可檢測出,是人類B淋巴細(xì)胞受EB病毒感染后最早出現(xiàn)的抗 原之一[7]。因此,檢測EB病毒潛伏抗原抗體EBNA1/IgA具有早期診斷的意義。

為探索鼻咽癌血清中EBNA1/IgA抗體及其臨床分期的關(guān)系,筆者將211例鼻咽癌患者按“92分 期法”進(jìn)行臨床分期,用ELISA方法檢測血清中EBNA1/IgA抗體,對其表達(dá)水平進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分 析,發(fā)現(xiàn)EBNA1/IgA抗體表達(dá)與鼻咽癌患者性別?年齡無關(guān),提示不同性別患者的血清EBNA1 /IgA含量基┍鞠嗤,不同年齡組的EBNA1/IgA抗體水平在統(tǒng)計(jì)學(xué)上均無差別。但鼻咽癌 患者 男性明顯多于女性,顯然鼻咽癌的發(fā)生可能與遺傳因素有關(guān),是否說明男性的鼻咽癌易感基 因容易受到EB病毒或其他因素誘發(fā)而突變值得探討。

本研究中原發(fā)灶T1期的EBNA1/IgA抗體rA值明顯低于T2?T3及T4期,淋 巴結(jié)轉(zhuǎn)移N0期明顯低 于N1?N2及N3期,可能是因?yàn)檠逯蠩BNA1/IgA抗體與鼻咽癌組織負(fù)荷量和淋巴結(jié)轉(zhuǎn) 移時(shí)刺 激特異性抗體的產(chǎn)生有關(guān)。臨床Ⅰ?Ⅱ期的EBNA1/IgA抗體水平明顯低于Ⅲ?Ⅳ期,顯示在 早期鼻咽癌患者其臨床表現(xiàn)較輕時(shí),EBNA1/IgA抗體的表達(dá)相對較低。其原因可能是由于未 分化型非角化性癌(我國鼻咽癌高發(fā)區(qū)占絕大多數(shù)的病理類型)細(xì)胞內(nèi)的EB病毒基本處于潛 伏期,并恒定表達(dá)EBNA1?EBERs等蛋白以維持其潛伏感染的狀態(tài)[8];早期鼻咽癌 患者原 發(fā)病灶較小,頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移程度較輕,因而EB病毒的EBNA1抗原表達(dá)可能也相對較少。在 有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移M0?M1兩組病例間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,是否與兩組病例數(shù)差距或是其他因 素影響有關(guān),有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn):

[1] 岑信棠,韋霖,吳文翰,等.香港大學(xué)醫(yī)學(xué)院近10年鼻咽癌研究[J].中國腫瘤臨床,1997,24(9):645-650.

[2] WILLIAMS-AZIZ S L,HARTLINE C B,HARDEN E A,et al.Comparative activities oflipid esters of cidofovir and cycliccidofovir against replication of herpesvirus es in vitro[J]. Antimicrob Agents Chemother,2005,49(9):3724-3733.

[3] FOONG Y T,CHENG H M,SAM C K,et al.Serum and Salivary IgA antibodies againsta defined epitope of the Epstein-Barr virusnuclear Aantigen (EBNA)are eleva ted in nasopharyngeal Carcinoma[J]. Int J Cancer,1990,45(6):1061-1064.

[4] 顧耀亮,張昌卿,吳子柏,等. 抗重組 EB 病毒抗原雙重抗體檢測血清學(xué) 診斷NPC 的研究[J].癌癥,2003,22(9):903-906.

[5] 程偉民,陳國雄,陳鴻霖,等. 以血清EB病毒抗體譜評估患鼻咽癌危險(xiǎn)度 的研究[J]. 中華腫瘤雜志,2002,24(6):561-563.

[6] 劉泰福,徐國鎮(zhèn). 全國鼻咽癌會議紀(jì)要[J]. 中華放射腫瘤學(xué)雜志,19 92,1(4):204-209.

[7] 黃偉剛,林津,陳榮策,等. EBVCA-IgA與EBNA-IgA聯(lián)合檢測對鼻咽癌 診斷的意義[J].實(shí)用醫(yī)技雜志,2003,10(11):1235-1236.

[8] BROOKS L,YAO Q Y,RICKINSON A B,et al.Epstein-Barr virus latent gene trans cription in nasopharyngeal carcinoma cells:coexpression of EBNA1,LMP1,and LMP 2 transcripts[J]. J Virol,1992,66(5):2689-2697.

(收稿日期: 2009-08-11)

[責(zé)任編輯 王慧瑾 鄧德靈]