豬呼吸道正常菌叢對抗菌藥物敏感性的研究

龔大春，江 濤 周天明 程太平

(長江大學動物科學學院，湖北 荊州 434025) (湖北生物科技職業(yè)學院，湖北 武漢 430070) (長江大學動物科學學院，湖北 荊州 434025)

豬呼吸道正常菌叢對抗菌藥物敏感性的研究

龔大春，江 濤 周天明 程太平

(長江大學動物科學學院，湖北 荊州 434025) (湖北生物科技職業(yè)學院，湖北 武漢 430070) (長江大學動物科學學院，湖北 荊州 434025)

為探討豬呼吸道正常菌叢對抗菌藥物的敏感性，從3個豬場用棉拭法采取豬呼吸道分泌物90份，用K-B法進行了體外藥物敏感試驗。結果顯示，同一個豬場的不同豬群、不同豬場豬群的呼吸道正常菌叢對同一種抗菌藥物的敏感性差異極顯著，且豬呼吸道正常菌叢對多種抗菌藥物的敏感性表現(xiàn)為耐藥、中敏和高敏。由此提示，在臨床治療細菌性疾病時，應合理選用抗菌藥物，減少對正常菌叢的干擾和破壞。

抗菌藥物；正常菌叢；豬；藥敏試驗

細菌耐藥性已成為全球關注的公共衛(wèi)生問題，專家估計細菌耐藥在21世紀對人類生命健康的威脅將不亞于艾滋病、癌癥和心血管疾病[1]。細菌耐藥不僅給人類健康構成了嚴重的威脅，而且給畜牧生產造成了巨大的損失。目前有關豬致病菌的耐藥性已有較多的研究報道，但有關正常菌叢的耐藥性報道較少。為此，筆者對豬呼吸道正常菌叢對抗菌藥物的耐藥性進行了研究，旨在為獸醫(yī)臨床合理用藥提供理論依據(jù)，減少抗菌藥物對豬正常菌叢的干擾，以增強豬群的抗病力，保障養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 材料

(1) 試劑藥品 鹽酸土霉素：白云山獸藥廠生產；磺胺嘧啶鈉：三峽獸藥廠生產；痢菌凈注射液：山西芮城亞寶獸藥廠生產；蒽諾沙星：吉林四方獸藥廠生產；先鋒氧氟沙星： 山東明發(fā)獸藥廠生產；牛肉膏、蛋白胨、瓊脂粉等由長江大學動物科學學院提供。

(2) 藥敏紙片 硫酸鏈霉素、硫酸慶大霉素、硫酸卡那霉素、氯霉素、青霉素G鉀、痢特靈、煙酸氟哌酸、鹽酸環(huán)丙沙星等藥敏紙片均由杭州微生物試劑有限公司生產。

(3) 受試菌料 采集正常健康豬群的豬呼吸道分泌物共90份，其中江南埠河某豬場(A)3個豬群各10份、白水灘某豬場(B)3個豬群各10份、李埠某豬場(C)3個豬群各10份。

1.2 方法

(1) 藥敏紙片與培養(yǎng)基的制備 按文獻[2，3]的方法，制備藥敏紙片和培養(yǎng)基。

(2) 呼吸道正常菌叢的采取方法 將豬保定，用無菌棉簽蘸取滅菌生理鹽水，在豬鼻腔內來回轉捻幾次取出，用滅菌剪刀剪下棉簽的棉試部分，貯存于滅菌小瓶中。

(4)耐藥性判斷標準 按文獻[2，4～7]報道的標準進行耐藥(R)、中敏(I)、高敏(S)的判斷。

2 結果與分析

2.1 3個豬場不同豬群呼吸道正常菌叢的耐藥性

同一個豬場不同豬群呼吸道正常菌叢對同一種抗菌藥物的敏感性有些差異極顯著，表現(xiàn)為高敏、中敏和耐藥；有些差異不顯著，使用較少的藥物表現(xiàn)為敏感一致，使用較多的藥物表現(xiàn)為耐藥一致，這可能與不同的技術員用藥習慣不同和豬群的來源不同有關(表1)。

表1 3個豬場不同豬群呼吸道正常菌叢藥敏試驗結果Table 1 Results of drug sensitization test of respiratory tract resident flora in different pig groups from three pig farms

2.2 3個豬場豬呼吸道正常菌叢的耐藥性比較

3個豬場豬呼吸道正常菌叢對同一種抗菌藥物的敏感性有的差異顯著，表現(xiàn)為高敏、中敏和耐藥，這可能與不同的豬場選用的藥物種類不同、使用的頻度不同有關；有些藥物的敏感性差異不顯著，長期使用的藥物表現(xiàn)為耐藥，尤其對磺胺嘧啶鈉、土霉素、鏈霉素、卡那霉素這些常用抗菌素表現(xiàn)為耐藥，而剛使用的藥物如先鋒氧氟沙星表現(xiàn)為高度的敏感(表2)。

表2 3個豬場豬呼吸道正常菌叢的耐藥性比較Table 2 Comparison of drug-resistance of respiratory tract resident flora in different pig groups from three pig farms

3 討論與小結

(1) 本試驗結果表明，豬呼吸道正常菌叢對抗菌藥物的敏感性表現(xiàn)為耐藥、中敏和高敏，說明不同豬場的豬群、同一豬場的不同豬群、同一豬群的不同個體呼吸道正常菌叢可能攜帶的耐藥基因是不同的。這提示廣大的畜牧獸醫(yī)工作者在獸醫(yī)臨床治療細菌性疾病時，應合理選用抗菌藥物，有條件的最好開展藥敏試驗，避免盲目用藥，以減少對豬呼吸道正常菌叢的干擾和破壞，增強其抗病力，特別不要盲目使用新藥、特效藥，盲目使用這些藥物的結果往往會導致呼吸道的正常菌叢失調，降低豬的抗病力。

(2)據(jù)報道，正常菌叢是動物體內潛在的耐藥基因庫[8]，動物體內正常菌叢表觀耐藥性與同期致病菌的表觀耐藥性呈現(xiàn)較高的相關性[9]。正常菌叢的耐藥性與致病菌耐藥性是否存在某種聯(lián)系，這是一個有趣的值得探討的問題。從理論上分析，細菌的耐藥性來源于該細菌本身固有的耐藥基因和獲得性耐藥基因。細菌固有的耐藥基因具有穩(wěn)定的遺傳性，能代代相傳，具有典型的種屬特異性。獲得性耐藥基因既可以通過多種途徑獲得[10]，也可以在環(huán)境中為生存進化而產生耐藥基因。正常菌叢的耐藥基因與致病菌的耐藥基因是否存在互相傳遞還缺乏實驗證據(jù)，尚需要探討。

[1]張永標，張扣興，唐英春.產質粒介導AmpC酶和ESBLs 細菌的耐藥性及β-內酰胺酶基因型研究[J]. 中華微生物和免疫學雜志,2004，24(7)：562～577.

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[9]龔大春.雞源性致病菌和直腸常在菌對抗菌藥物敏感性的比較研究[J].湖北畜牧獸醫(yī)， 2005，(12)：4～6.

[10]蔣紅霞，曾振靈．細菌耐藥機制及耐藥性控制對策[J]．動物醫(yī)學進展，2001，22，(4)：4～7.

2009-09-08

龔大春 (1963-)，男，湖北鐘祥人，農學碩士，副教授，主要從事獸醫(yī)臨床研究.

10.3969/j.issn.1673-1409(S).2009.04.009

S851.34+7.1

A

1673-1409(2009)04-S031-03