金蛋茄的離體培養(yǎng)與植株再生試驗(yàn)

丁云霞 陳國(guó)菊 雷建軍 曹必好

（華南農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，廣東廣州，510642）

金蛋茄的離體培養(yǎng)與植株再生試驗(yàn)

丁云霞 陳國(guó)菊 雷建軍 曹必好

（華南農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，廣東廣州，510642）

以珍稀觀(guān)賞蔬菜金蛋茄（L.）為試驗(yàn)材料，探討了不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)對(duì)外植體分化的影響和不同外植體分化能力的差異。試驗(yàn)結(jié)果表明，較適合金蛋茄子葉分化的培養(yǎng)基是MS+ZT 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L，分化率為70.00%；適合下胚軸分化的培養(yǎng)基是MS+ZT 1.0 mg/L，分化率為35.15%；子葉的分化能力比下胚軸的強(qiáng)；適合生根的培養(yǎng)基是MS+IAA 0.5 mg/L，生根率為100%。

金蛋茄 子葉 下胚軸 植株再生

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試材料為金蛋茄，編號(hào)為0302011，從泰國(guó)引進(jìn)。

1.2 試驗(yàn)方法

①無(wú)菌苗的獲得 成熟種子用70%酒精消毒30 s，2%次氯酸鈉溶液震蕩消毒15 min，無(wú)菌水沖洗4～6次，播種在無(wú)激素的1/2 MS培養(yǎng)基上發(fā)芽。種子露白后開(kāi)始計(jì)算苗齡。選取苗齡12 d左右的無(wú)菌苗的子葉和下胚軸作為外植體，接種到不同的分化培養(yǎng)基上。

②不定芽的誘導(dǎo)分化 誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基共19種，基本培養(yǎng)基為MS，添加6-BA濃度為1.0，2.0，3.0，4.0 mg/L，ZT濃度為0.2，0.5，1.0 mg/L，IAA濃度為0.1，0.25，0.5，1.0 mg/L。外植體下胚軸切成1 cm左右的小段，橫向放置，子葉切成1 cm×1 cm的小塊，正面朝上放置在分化培養(yǎng)基上。培養(yǎng)條件為光照時(shí)間16 h/d，溫度25℃，光照強(qiáng)度1500 lx。2周左右繼代1次，4周后統(tǒng)計(jì)結(jié)果。

表1 不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)對(duì)金蛋茄不定芽分化的影響

③生根和移栽 不定芽長(zhǎng)至3 cm左右時(shí)，從基部切下，移至生根培養(yǎng)基中，生根培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基添加IAA。設(shè)置4個(gè)處理：IAA濃度為0.1，0.25，0.5，1.0 mg/L。15 d后統(tǒng)計(jì)生根情況。長(zhǎng)出完整的根系后，打開(kāi)瓶蓋煉苗2～3 d，然后洗凈根部培養(yǎng)基，移至已滅菌的營(yíng)養(yǎng)土中，用塑料膜保濕5 d左右，10 d左右后移至室外，進(jìn)行正常田間管理。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)對(duì)金蛋茄不定芽分化的影響

外植體接種到誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基上1周左右就可以產(chǎn)生愈傷組織，添加不同濃度的6-BA，IAA和ZT都可以誘導(dǎo)子葉和下胚軸產(chǎn)生愈傷組織，誘導(dǎo)率達(dá)到100%。子葉與下胚軸產(chǎn)生的愈傷組織明顯不同。在所設(shè)置的19個(gè)培養(yǎng)基中，下胚軸上產(chǎn)生的愈傷組織都是松脆、柔軟、黃色的（圖1），這一點(diǎn)與余波瀾等[4]的研究一致。而子葉在不同的培養(yǎng)基上產(chǎn)生的愈傷組織不同。在添加6-BA和6-BA+IAA的培養(yǎng)基中，子葉產(chǎn)生的愈傷組織中間為綠色，周?chē)鸀榘咨▓D2），比下胚軸產(chǎn)生的愈傷組織較堅(jiān)硬、緊密。在添加ZT和ZT+6-BA的培養(yǎng)基中，子葉只產(chǎn)生少量綠色的愈傷組織就可分化出芽（圖3）。

不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)組合誘導(dǎo)金蛋茄分化出芽的類(lèi)型不同。6-BA，6-BA+IAA誘導(dǎo)分化的芽是直接由愈傷組織上分化出的單生芽；ZT，ZT+6-BA誘導(dǎo)分化的芽是叢生芽，愈傷組織上分化出的芽的數(shù)目較多，一般有3～4個(gè)，但是只有1～2個(gè)芽能夠正常生長(zhǎng)。

不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)組合誘導(dǎo)金蛋茄不定芽分化的結(jié)果統(tǒng)計(jì)表明（表1），較適合金蛋茄子葉分化的培養(yǎng)基是MS+ZT 1.0 mg/L+BA 2.0 mg/L，分化率為70.00%；適合下胚軸分化的培養(yǎng)基是MS+ZT 1.0 mg/L，分化率為35.15%。

培養(yǎng)基中添加2.0 mg/L 6-BA能比較好的誘導(dǎo)金蛋茄子葉芽分化，并且能形成正常的植株；添加0.2～1.0 mg/L ZT都可以成功誘導(dǎo)金蛋茄子葉芽分化，形成比較多的不定芽，但是濃度過(guò)高，外植體愈傷化強(qiáng)烈，分化出的不定芽不正常。

2.2 不同外植體分化能力的比較

在相同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)組合的培養(yǎng)基中，子葉和下胚軸誘導(dǎo)形成的愈傷組織不同，子葉的分化能力比下胚軸的強(qiáng)。下胚軸分化形成的愈傷組織均為淡黃色、疏松狀，并且平均芽分化率都較子葉的低，最高的也只有32.26%。子葉在6-BA的誘導(dǎo)下分化形成的愈傷組織為中間綠色周?chē)咨⒕o密而堅(jiān)硬的愈傷組織；在ZT的誘導(dǎo)下，只形成少量的綠色愈傷組織；子葉的平均芽分化率最高為70.00%。

圖1 下胚軸產(chǎn)生的愈傷組織及不定芽

圖2 6-BA誘導(dǎo)的子葉產(chǎn)生的不定芽

圖3 ZT誘導(dǎo)的子葉產(chǎn)生的不定芽

2.3 不定根的誘導(dǎo)

由表2可知，MS添加0.1～1.0 mg/L IAA均能夠誘導(dǎo)不定根的產(chǎn)生。適合生根的培養(yǎng)基是MS+IAA0.5 mg/L，不定根發(fā)生早，且質(zhì)量高，10 d左右就可以形成4～5條白色不定根，生根率為100%。

2.4 移栽試驗(yàn)

煉苗移栽后的再生植株，20 d后統(tǒng)計(jì)成活率，成活率為90%。

3 小結(jié)

Sharma等[6]的研究表明，茄子下胚軸誘導(dǎo)的不定芽比子葉和葉片誘導(dǎo)的多。余波瀾等[4]也得到4個(gè)品種的下胚軸都比子葉容易出芽的結(jié)論。本試驗(yàn)結(jié)果表明，金蛋茄與茄子的組織培養(yǎng)有較大的差異，金蛋茄下胚軸的分化效果不如子葉，下胚軸分化效果最佳的培養(yǎng)基是MS+ZT 1.0 mg/L，分化率為35.15%；子葉分化效果最佳的培養(yǎng)基是MS+ZT 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L，分化率為70.00%。生根效果最佳的培養(yǎng)基是MS+ IAA 0.5 mg/L，生根率為100%。

表2 不同濃度IAA對(duì)金蛋茄不定根誘導(dǎo)的影響

[1]Kamat M G,Rao P S.Vegetative multiplication of eggplants (Solanum melongena)using tissue culture techniques[J]. Plant Sci Lett,1978,13:57-65.

[2]趙福寬，高遐虹，程繼鴻，等.激素與低溫脅迫在茄子葉片組織培養(yǎng)中的效應(yīng)[J].北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，2001（2）：27-30.

[3]劉獨(dú)臣，房超，劉小俊，等.茄子花藥培養(yǎng)研究進(jìn)展[J].長(zhǎng)江蔬菜，2006（7）：42-44.

[4]余波瀾，張利明，孫勇如，等.茄子子葉和下胚軸的組織培養(yǎng)和植株再生[J].植物生理學(xué)通訊，2003，39（4）：317-320.

[5]姚春娜，孔英珍，王亞馥.茄子生物技術(shù)研究進(jìn)展[J].生命科學(xué)，2002，14（4）：246-248.

[6]Sharma P,Rajam M V.Genotype explant and position effects on organogenesis and somatic embrygenesis in eggplant[J].Journal of Experimental Botany，1995,46(282): 135-141.

Tissue Culture and Plantlet Regeneration ofL.

DING Yunxia,CHEN Guoju,LEI Jianjun,CAO Bihao

Using the cotyledon and hypocotyls as explants,the influence of growth regulators were studied on differentiation and the regeneration inL..The optimum medium for cotyledon was MS+ZT 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,the rate of regeneration was 70.00%.The optimum medium for hypocotyl was MS+ZT 1.0 mg/L,the rate of regeneration was 35.15%.The optimum medium for rooting was MS+IAA 0.5 mg/L,the rate of rooting was 100%.

L.;Cotyledon;Hypocotyl;Plant regeneration

10.3865/j.issn.1001-3547.2009.18.009

廣東省科技攻關(guān)項(xiàng)目（2005B20901004）

丁云霞（1981-），女，碩士研究生，研究方向?yàn)槭卟诉z傳育種與生物技術(shù)

陳國(guó)菊（1967-），女，通信作者，副教授。E-mail:gjchen@scau.edu.cn

2009-07-02